人工種子與脫毒20xx版-資料下載頁
2025-05-07 22:22本頁面
【正文】 成的無性胚，稱為珠心胚。珠心胚與維管束系統(tǒng)無聯(lián)系，因此由珠心胚產(chǎn)生的植株全部均無病毒。但珠心胚 大多是不育的，必須分離培養(yǎng)才能發(fā)育成正常的幼苗。珠心胚培養(yǎng)技術(shù)對除去柑橘主要病毒，如引起銀屑病、葉脈突出病、柑橘裂皮病、柑橘速衰病等的病毒，都十分有效。 5）花藥培養(yǎng)脫毒 ? 花藥培養(yǎng)實(shí)際上是單倍體培養(yǎng)，由此獲得單倍體植株，再通過染色體加倍獲得無病毒植株 。 脫毒植物的鑒定 利用生長點(diǎn)培養(yǎng)無毒苗的成苗率和脫毒率都非常低，有時無毒株只占千分之幾。因此，每一莖尖分化產(chǎn)生的植株，在作為母本生產(chǎn)無病毒原種以前，必須進(jìn)行特定病毒鑒定。由于在培養(yǎng)的植株中許多病毒具有延遲的恢復(fù)期，所以在最初 18個月中每隔一定時間仍需進(jìn)行鑒定。只有病毒顯示持續(xù)陰性反應(yīng)的無病毒植株，才能進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖。無病毒植株容易再被感染，因此在繁殖的不同時期仍需重復(fù)進(jìn)行鑒定。 常用的鑒定法有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法和電子顯微鏡檢查法等 。 外觀判斷法 —— 直接檢測法 指示植物法 抗血清鑒定法 電子顯微鏡檢查法 酶聯(lián)免疫鑒定法 (ELISA) 分子生物學(xué)方法 外觀判斷法： 帶病毒株往往葉片發(fā)黃，凹凸不平，畸形，可根據(jù)這些表現(xiàn)來判斷。但有些病毒表現(xiàn)不明顯，僅靠這一方法還不夠。 指示植物檢測法： 指示植物又稱鑒別寄主，指的是對某種或某些特定病毒非常敏感，而且癥狀表現(xiàn)十分明顯的植物。 通常不同病毒應(yīng)選用不同的植物。馬鈴薯病毒常用指示植物有千日紅、曼陀羅、豇豆、辣椒等。 分為 2種 ①汁液感染法 ②嫁接檢測法 利用嫁接法接種，把待測的植物接種在敏感植物上，然后視其有無病斑，來判斷是否脫除了病毒。 指示植物 接穗 嫁接后的植物 抗血清鑒定法（抗原－抗體反應(yīng)） 原理：由于病毒是由蛋白質(zhì)和核酸組成的，是一種較好的抗原。將病毒給動物注射后產(chǎn)生抗體?？乖涂贵w結(jié)合產(chǎn)生血清反應(yīng)。 抗原：病毒。 抗體：是指生物體在外來抗原的刺激下產(chǎn)生的一種免疫球蛋白，主要存在于血清中，含抗體的血清稱為抗血清。 電子顯微鏡檢查法 用電子顯微鏡直接觀察經(jīng)脫毒培養(yǎng)的葉片，檢查是否有病毒粒子存在，還可測量病毒顆粒的大小、形狀和結(jié)構(gòu)。 酶聯(lián)免疫吸附測定法 (ELISA) 把抗原 抗體的 免疫反應(yīng) 于 酶的催化反應(yīng) 相結(jié)合而發(fā)展起來的一種綜合性技術(shù)，靈敏度高，特異性強(qiáng)，發(fā)展最快應(yīng)用最廣的方法。 原理： 采用酶標(biāo)記的特異抗體指示抗原 抗體的結(jié)合，從而檢測樣品中的抗原定量測定法。 分子生物學(xué)方法 ? 核酸雜交 ? PCR 快速繁殖 莖尖培養(yǎng)得到的脫毒苗不多，用于生產(chǎn)需擴(kuò)大繁殖。 擴(kuò)繁方法： 1）組培快繁 2）無毒苗栽到土壤中進(jìn)行擴(kuò)繁。如甘薯、草 莓等利用蔓，馬鈴薯、姜、蒜等利用地下部分繁殖。為了預(yù)防病毒再感染，擴(kuò)繁應(yīng)在培育溫室或防蟲罩內(nèi)，因?yàn)槔ハx傳播病毒。 3）兩種方法相結(jié)合，試管內(nèi)擴(kuò)繁，移栽后再擴(kuò)繁。 注意： 培養(yǎng)變異的產(chǎn)生，應(yīng)及時去除 脫毒苗并非永遠(yuǎn)是無毒苗，由于昆蟲等的傳播，不免會再感染病毒，所以要經(jīng)常脫毒，一般脫毒苗用 1－ 3代 。 脫毒試管苗為原原種－－繁殖一代為原種－－原1代－－原 2代 小結(jié)：脫毒快繁的一般過程 診斷：首先了解供試材料感染病毒的種類 莖尖培養(yǎng)脫毒或結(jié)合熱處理 鑒定 繁殖 馴化移植 習(xí)題： ? 應(yīng)用。 ? 用。
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