植物脫毒技術(shù)ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-01-14 22:30本頁(yè)面
【正文】 件 ? 在莖尖培養(yǎng)中照光培養(yǎng)通常都比暗培養(yǎng)的效果好。在馬鈴薯中建立莖尖培養(yǎng)物的最適光照強(qiáng)度是100lx，但 4周后應(yīng)增加到 200lx。當(dāng)莖已長(zhǎng)到 1cm高時(shí)，光照強(qiáng)度應(yīng)進(jìn)一步增加到 4000lx。 ? 溫度通常是 25℃ +2℃ 。 (四 )、外植體的生理狀態(tài) ? 莖尖最好是由活躍生長(zhǎng)的芽上切取。在麝香石竹和菊花中，培養(yǎng)頂芽莖尖比培養(yǎng)腋芽莖尖效果好。但在草莓中 Boxus（ 1977）沒(méi)有看到這種差別。即使在腋芽比頂芽表現(xiàn)較差的情況下，為了增加脫毒植株的總數(shù)也還是要采用腋芽，這是因?yàn)橐秆吭诿總€(gè)枝條上有好幾個(gè)，而頂芽只有一個(gè)。 ? ? 取芽的時(shí)間也是個(gè)重要因素，這對(duì)于溫帶樹(shù)種，植株的生長(zhǎng)只限于短暫的春季，此后很長(zhǎng)時(shí)間莖尖進(jìn)行休眠，直到低溫或光打破休眠為止。在這種情況下，莖尖培養(yǎng)應(yīng)在春季進(jìn)行，而若要在休眠期進(jìn)行，則必須采用適當(dāng)處理。在李屬植物中，取芽之前必須把芽保存在 4℃ 下近 6個(gè)月之久。 ? 莖尖培養(yǎng)的效率除取決于外植體的存活率和莖的發(fā)育程度之外，還取決于莖的生根能力及其脫毒程度。在麝香石竹中，雖然冬季培養(yǎng)的 莖尖產(chǎn)生的莖最易生根，但夏季得到無(wú)病毒植株的頻率最高。在所研究過(guò)的大多數(shù)馬鈴薯品種中，在春季和初夏采集的莖尖比在較晚季節(jié)采集的容易生根。 (五 )、熱療法和冷療法 ? 盡管頂端分生組織常常不帶病毒，但不能把它看成一種普遍現(xiàn)象。現(xiàn)有足夠證據(jù)表明，某些病毒實(shí)際上也能侵染正在生長(zhǎng)的分生區(qū)域。若把莖尖培養(yǎng)和熱療法結(jié)合起來(lái)，也有可能獲得脫毒植株。熱處理可以在切取莖尖之前的母株上進(jìn)行，也可以在莖尖培養(yǎng)期間進(jìn)行。應(yīng)用前一個(gè)方法還有一個(gè)有點(diǎn)，即由受熱處理之后的母株上，可以切取較大的外植體進(jìn)行培養(yǎng)，因而可以增加能夠存活并發(fā)育成無(wú)病毒植株的莖尖的百分?jǐn)?shù)。 例如： 在草莓中，將熱處理（ 36℃,6 周）與莖尖培養(yǎng)結(jié)合起來(lái)，比單獨(dú)莖尖培養(yǎng)對(duì)于消除溫性黃邊病菌更有效。在大多數(shù)的草莓品種中，熱處理還能提高植株的生長(zhǎng)速率。 馬鈴薯 S病毒（ PVS）和馬鈴（ PVX）是兩種常見(jiàn)的馬鈴薯病毒，單獨(dú)通過(guò)熱療法或單獨(dú)通過(guò)莖尖培養(yǎng)都不容易消除。然而，通過(guò)培養(yǎng)經(jīng)過(guò)熱處理的植株上的莖尖，已在幾個(gè)馬鈴薯品種中消除了這兩種非常穩(wěn)定的病毒。 ? 對(duì)于熱處理時(shí)間長(zhǎng)短要慎重決定，時(shí)間太長(zhǎng)，對(duì)于植株有傷害。 ? 據(jù)報(bào)道，在菊花中，熱處理的時(shí)間由十天增加到 30天，可使無(wú)毒植株百分?jǐn)?shù)由9％增加到 90％ ,。處理 40天或者更長(zhǎng)并不能再增加無(wú)毒植株的百分?jǐn)?shù)，卻會(huì)顯著減少能形成植株的莖尖總數(shù)。 ? 有跡象表明，高 溫處理除了可以消除病毒之外，也能鈍化寄主組織中的抗病毒因子。 ? 用低溫處理脫毒的方法叫做冷療法。菊花植株在 5℃ 下經(jīng)過(guò) 4個(gè)月冷處理后進(jìn)行莖尖培養(yǎng)，在離體形成的植株中有 67％脫除了菊花矮化病毒， 22％脫除了菊花褪綠斑駁病毒；若把冷處理的時(shí)間延長(zhǎng)到 7個(gè)月，脫除這 2種病毒的株數(shù)分別增加到 73％和 49％ 。只進(jìn)行莖尖培養(yǎng)而未予冷處理的植株則沒(méi)有這種脫毒效果。 （六）化學(xué)療法 ? 雖然對(duì)于感染病毒的整體植株來(lái)說(shuō)，目前還缺乏有效的治療藥物，但是通過(guò)在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)試劑，卻有可能抑制植物組織和原生質(zhì)體中的病毒。 ? 例如：加在培養(yǎng)中的一種核苷類似物三氮唑核苷能有效的消除馬鈴薯葉肉原生質(zhì)體再生植株中的 PVX病毒。 目前常采用將熱處理和莖尖分生組織培養(yǎng)結(jié)合起來(lái)的方法脫毒。 ? 特點(diǎn)： 既可縮短熱處理時(shí)間，提高植株成活率，又可剝離較大的莖尖，提高莖尖培養(yǎng)的成活率和脫毒率。 ? 適用： 大多數(shù)植物，并可除去一般培養(yǎng)難以去除的紡錘塊莖類病毒。 謝 謝！
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