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植物脫毒技術ppt課件(編輯修改稿)

2025-02-10 22:30 本頁面
 

【文章內容簡介】 毒活性,使病毒在植物體內增殖減緩或增殖停止,失去傳染能力。 ? 作為一種物理效應可以加速植物細胞的分裂,使植物細胞在與病毒繁殖的競爭中取勝。 植物生長區(qū)與熱處理區(qū)關系圖解 ? 香石竹(康乃馨)在 38℃ ~ 40℃ 下經兩個月處理可除去全部病毒。 ? 馬鈴薯在 37℃ 下處理 10~ 20天能除去卷葉病毒。 熱空氣處理脫毒法 ? 試驗母株在高溫生長室中生長一段時間,其頂端分生組織比次生分生組織生長迅速,后切取其莖尖分生組織進行離體培養(yǎng)。 ? 生長室溫度 3540℃ ? 光照 3000— 10000 lx 熱處理,可通過熱水或熱空氣進行。 熱水對休眠芽效果較好;熱空氣對活躍生長的莖尖效果較好,既能消除病毒,又能使寄主植物又較高的存活機會。熱空氣處理比較容易進行:把旺盛生長的植物移入到一個熱療室中,在 35~40℃ 處理一定時間即可。 處理時間的長短,可由幾 分鐘到數(shù)周不等。 ? 熱處理時,最初幾天空氣溫度應逐步增高,直到達到要求為止。若鈍化病毒所需要的連續(xù)高溫處理會傷害寄主組織,則應當試驗高低溫交替的效果。在熱處理期間應當保持適當?shù)臐穸群凸庹?。而且要對植物進行修剪,以增加植物忍受熱處理的能力。 熱處理的優(yōu)缺點 ? 優(yōu)點 : 方法簡單,效果明顯。 ? 缺點 : ? 1)具有局限性,不能去除所有病毒。只對圓形病毒(蘋果花葉病毒),或對線狀病毒(馬鈴薯卷葉病毒)有效;而對桿狀病毒(千日紅病毒)無效。 ? 2)熱處理后只有小部分植株能夠存活。極易使植物材料受熱枯死,造成損失 ? 3)延長熱處理時間,病毒鈍化效果好,同時也可能會鈍化植物組織中的抗性因子而降低處理效果。 和單獨采用熱療法相比,莖尖培養(yǎng)具有更廣泛的適用性。很多不能由單獨的熱處理消除的病毒,可以通過莖尖培養(yǎng)和熱處理相結合,或單獨的莖尖培養(yǎng)而消除。因而,莖尖培養(yǎng)現(xiàn)在已經成為消除病毒的一個很常用的手段。 1 4通過莖尖培養(yǎng)消除病菌 ? 1)原理及依據(jù) ? 病毒在植物體內分布不均,莖尖處含量最少 ? 病毒 DNA分子與細胞分裂蛋白質合成競爭 ? 2)操作程序 ? 外植體經表面消毒滅菌后,在解剖鏡下,經無菌操作切取小莖尖,接種到備用培養(yǎng)基上,放入培養(yǎng)室內進行培養(yǎng),并及時觀察和記錄培養(yǎng)結果。 1 1 外植體名稱 在應用組織培養(yǎng)方法以獲得無病菌植物時,所用的所用的外植體可以是莖尖,也可以是莖的頂端分生組織。在這里,頂端分生組織是指莖的最幼齡葉原基上方的一部分,最大直徑約為 100um,最大長度約為 250um。 莖尖是由頂端分生組織及其下方的 13個葉原基一起構成的(如圖 1 2),雖然通過頂端分生組織培養(yǎng)消除病毒的機會較高,但在大多數(shù)已發(fā)表的的工作中,無毒植物都市通過莖尖培養(yǎng)得到的。 1 2剝取莖尖的方法 ? 解剖鏡(體視顯微鏡),解剖針,解剖刀。為了防止莖尖變干,要在襯有無菌濕濾紙的培養(yǎng)皿內進行解剖。 ? 莖尖外植體要用 75%酒精浸蘸一下或 %的次氯酸鈉消毒( 10分鐘)。 ? 在剖取莖尖時,要把莖芽置于解剖鏡下,一手用一把細鑷子將其按住,另一手用解剖針將葉片和葉原基剝掉。當形似一個透明閃亮的半球形頂端分生組織暴露出來之后,用一個鋒利的長柄刀片將分生組織切下來,上面可以帶有葉原基,也可不帶,然后用同一工具接種到培養(yǎng)基上。對于難以生根的要嫁接到健康的砧木上。 ? 注意,不要太大,以免帶有較老的組織。 莖尖脫毒方法 1)取樣與消毒 可直接選定的植株上取頂芽進行消毒接
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