細(xì)胞進(jìn)展tcrmhppt課件-資料下載頁(yè)
2025-05-04 12:01本頁(yè)面
【正文】 HLA/抗原肽四聚體結(jié)合的 T細(xì)胞克隆通過(guò)熒光激活的細(xì)胞分選方法分離出來(lái) ， 在體外用傳統(tǒng)的方法進(jìn)行刺激并擴(kuò)增 。 * MHC四聚體修飾 APC體外培養(yǎng)法 制備抗原特異性的 T淋巴細(xì)胞：用親和素 抗 B細(xì)胞抗體融合蛋白 （ antiCD20 B9E9scFvSA）將 HLAI/抗原肽復(fù)合物 （ HLAI類分子經(jīng)過(guò)生物素化 ） 結(jié)合到自身 B細(xì)胞表面 ， 將經(jīng)過(guò)處理的 B細(xì)胞作為抗原提呈細(xì)胞 ， 與PBMN在體外培養(yǎng) 814天 ， 僅需一次刺激便可產(chǎn)生特異性 CTL。這種方法為體外擴(kuò)增抗原特異性 T細(xì)胞提供了有效手段 ， 例如制備病毒抗原 、 腫瘤抗原特異性的 CTL。 與其他技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用研究抗原特異性 T細(xì)胞 * 四聚體技術(shù)與細(xì)胞內(nèi)染色技術(shù)聯(lián)合運(yùn)用 能夠檢測(cè)抗原特異性 T細(xì)胞的細(xì)胞周期 （ 活化與增殖 ） 、 死亡方式 （ 衰老和凋亡 ） 、 效應(yīng)功能 （ 胞毒能力和細(xì)胞因子產(chǎn)生 ） 。 有利于研究在各種環(huán)境和疾病狀態(tài)下抗原特異性 T細(xì)胞的產(chǎn)生 、 活化和功能 ， 從而揭示細(xì)胞免疫應(yīng)答的機(jī)制 。 T細(xì)胞識(shí)別配體的多聚化提高了與受體結(jié)合的親和力 ? pMHC四聚體：應(yīng)用于特異性同種 T細(xì)胞的檢測(cè) ? pMHC二聚體：誘導(dǎo)或抑制特異性同種 T細(xì)胞 圖 1. pMHC四聚體結(jié)構(gòu)示意圖 圖 2. pMHC二聚體結(jié)構(gòu)示意圖 可溶性 pMHC二聚體特異性抑制同種 T細(xì)胞應(yīng)答 圖 7. 可溶性 pMHC二聚體誘導(dǎo)特異性的同種 T細(xì)胞耐受的示意圖 Tyr/HLAA2二聚體抑制增殖作用具有 pMHC特異性 圖 a, HLAA2ve PBLs b, HLAA2ve PBLs 與T2/Tyr混合培養(yǎng) c, b+抗原 肽 Tyr368376 d, b+HIV/HLAA2二聚體 e, b+Tyr/HLAA2二聚體 Tyr/HLAA2二聚體抑制同種反應(yīng)體系中 CD8＋ T細(xì)胞的增殖 圖 8. 在 T2/Tyr與 HLAA2ve PBLs混合培養(yǎng)體系中， Tyr/HLAA2二聚體對(duì) T細(xì)胞的抑制作用具有濃度依賴性，并可被 HLAA2特異性抗體 。 Xiufang Weng, Maohua Zhong, Zhihui Liang, Shengjun Lu, Xueling Chen, Janan Li, Juan Hao, Feili Gong, Xiongwen Wu*. Peptidedependent inhibition of alloreactive Tcell response by soluble divalent HLAA2/IgG molecule in vitro. Transplantation. 2022, 84(10):1298306. pMHC二聚體加載到單核細(xì)胞表面誘導(dǎo) 單一 pMHC特異性的同種 T細(xì)胞 圖 4. 加載 pMHC二聚體的單核細(xì)胞誘導(dǎo)單表位特異性的同種 T細(xì)胞的示意圖 制備腫瘤特異性同種 T細(xì)胞 圖 5. 特異性四聚體檢測(cè)結(jié)果顯示： HLAA2ve PBLs與加載 Tyr/HLAA2表位的自身單核細(xì)胞共培養(yǎng)后 Tyr/HLAA2 特異性 CTL的頻率增高。 圖 6. 分選的 Tyr/HLAA2 特異性同種 T細(xì)胞僅對(duì)含有 Tyr/HLAA2表位的腫瘤細(xì)胞具有特異性殺傷作用。 Tumor rejection effects of allorestricted tumor peptidespecific CD4+ T cells on human cervical cancer cell xenograft in nude mice Preparation of the HLADR15/IgG1Fc fusion protein and its binding to HLADR15ve monocyte Proliferation of CD4+ T cells and induction of CD4+ Th1 cells when coculturing The expanded CD4+ T cells exhibit allorestricted and peptidespecific properties Tumor rejection effects of allorestricted E7specific CD4+T cells on human cervical cancer cell xenografts in nude mice
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