【正文】 ， 或小瓶分裝存放 。 使用時不要暴露于空氣中過久 ， 否則溶液中的 SO2外逸 ， 導致溶液變紅而失效 。 ? 5. 變紅了的 Schiff溶液可通入 SO2氣體 ， 至紅色消失后再用 。 但應注意 ， 溶液中過量的 SO2越少 ， 反應越靈敏 。 ? 6. 某些酮類 （ 如丙酮 ） 、 堿類 、 不飽和化合物或某些能與 SO2作用的物質 ， 均不宜與 Schiff溶液接觸；否則 ，易發(fā)生化學反應 ， 使溶液變?yōu)樘壹t色而失效 。 ? 7. 染色時 ， Schiff反應最好在室溫下進行 。 因為 37℃ 下孵育或水浴時 ， 容易損失 SO2而使 Schiff溶液失效變紅 。 ? 8. PAS染色后的涂片應及時鏡檢觀察結果 ， 放置 1W后 ，陽性反應開始逐漸褪色 。 ? 9. 配制 Schiff溶液時堿性品紅可用副品紅替代 ， 亞硫酸鈉可用亞硫酸氫鈉 、 硫代硫酸鈉 、 偏重亞硫酸鈉替代 。 ? 正常分布 ： ? ：原粒細胞多為陰性反應 ， 早幼粒細胞至分葉粒細胞陽性反應逐漸增強 ， 呈細顆粒狀 。 ? ， 巨噬細胞呈較強的陽性反應 。 ? ， 少數(shù)呈弱陽性反應 。 ? 。 ? 5. 巨核細胞及血小板呈陽性反應 。 ? 6. 對 PAS呈陽性反應的除了糖原外，還有粘多糖、粘蛋白、醣蛋白、醣脂、磷脂及硫酸軟骨素等，對 PAS呈陽性反應的細胞組織很多，應用非常廣泛。肝、腎、心肌、骨骼肌、腎小管上皮細胞等富含糖原。 ? 臨床意義 ： ? ⒈ 急性淋巴細胞白血病的原始及幼稚細胞 常為陽性 ， 陽性物質呈粗大顆粒狀或塊狀 。 ? ⒉ 急性粒細胞白血病的原始細胞多為陰性反應 ， 較分化的原始粒細胞及早幼粒細胞可呈弱陽性 ， 陽性物質為紅色細顆粒狀 ， 均勻分布 。 ? ⒊ 急性單核細胞白血病的原始單核細胞可呈陽性反應 ， 為紅色細顆粒狀 ， 彌散分布 。 ? ⒋ 急性及慢性巨核細胞白血病的原始及幼稚巨核細胞 、 MDS的小巨核細胞可呈較強的陽性反應 。 ? ⒌ 紅白血病及某些 MDS的幼紅細胞可呈較強陽性反應；巨幼細胞性貧血及再生障礙性貧血幼紅細胞為陰性反應 。 ? ⒍ 高 雪氏細胞 、 海藍組織細胞為較強的陽性反應 ， 尼曼 匹克氏細胞為陰性至弱陽性反應 。 ? ， 如精原細胞瘤 、軟骨肉瘤 、 腺癌為強陽性 ， 神經(jīng)母細胞瘤可呈不同程度的陽性 ，等 。 MPO CE ANAE PAS ALL 粗 +/ M0 M1 + +/ 細 +/ M2 + +/ /弱 + 細 + M3 + + + + + + + + 細 + M4 + + + 細 + M5 +/ + 細 + M6 + +/ /+ 細 + M7 + 粗 + 鐵染色 ? ㈠ . 原理 ： ? 正常骨髓中存在一定量的儲存鐵，以含鐵血黃素的形式儲存于組織巨噬細胞中，可供有核紅細胞利用合成血紅蛋白。這種存在于紅細胞以外的儲存鐵稱為細胞外鐵；部分中、晚幼紅細胞及少數(shù)成熟紅細胞也含有鐵顆粒，分別稱為鐵粒幼紅細胞及鐵粒紅細胞，它們屬于細胞內(nèi)鐵。酸性亞鐵氫化鉀能與細胞內(nèi)、外鐵發(fā)生普魯士藍反應，形成藍色的亞鐵氫化鐵沉淀，定位于細胞漿中。 ? 試劑 ? 工作液配制： ? 取濃鹽酸 ， 緩慢滴加 200g/L亞鐵氰化鉀溶液 ， 邊滴邊搖 。 ? 反應過程由開始生成的白色沉淀至沉淀消失 。 ? 染色步驟： ? 干燥涂片 ， 滴加工作液布滿血膜染色 30分鐘 ，流水充分沖洗 5分鐘 ， 待干或濾紙吸干 。 ? 10g/L藏紅花紅溶液或中性紅溶液復染 1分鐘 ， 流水沖洗 ， 干后鏡檢 。 ? 結果判斷 ： ? 陽性反應呈藍黑色顆粒狀或塊狀 ， 定位于細胞漿中 。 ? 1. 細胞 外鐵 判斷標準： ? 低倍鏡下于片尾骨髓小粒觀察細胞外鐵 ， 必要時需油鏡下證實 。 其陽性程度分為 5級 。 ? 0：全片無細胞外鐵的藍色陽性反應及顆粒 。 ? +：見少量鐵顆?；蚺家娚僭S鐵小珠 。 ? ++：見較多鐵顆粒和鐵小珠 。 ? +++：見很多鐵顆粒 、 鐵小珠和少量鐵小塊 。 ? ++++：見極多鐵顆粒、鐵小珠和很多密集成堆的鐵小塊。 ? 2. 細胞 內(nèi)鐵 判斷標準 ： ? 油鏡 計數(shù) 100個中幼紅及晚幼紅細胞內(nèi)鐵陽性程度 。 陽性程度分為 5級： ? 0：細胞漿內(nèi)無鐵顆粒 。 ? +：細胞漿內(nèi)含 1個鐵顆粒 。 ? ++：細胞漿內(nèi)含 2～ 5個鐵顆粒 。 ? +++：細胞漿內(nèi)含 6～ 9個鐵顆粒 。 ? ++++：細胞漿內(nèi)含 10個以上鐵顆粒 。 ? 環(huán)形鐵粒幼紅細胞：含 6個以上鐵顆粒 ， 且 2/3以上的鐵顆粒圍繞細胞核周圍排列成完全或不完全的環(huán)形（ 1/2以上的核周有鐵粒環(huán)繞 ） 。 ? 注意事項： ? 1. 所用玻片及器具應潔凈 、 無鐵污染 。 ? 2. 亞鐵氰化鉀暴露于空氣或見光易變質 ， 應密閉 、 儲存于棕色瓶中 。 ? 3. 所用鹽酸純度要高 ， 不能含鐵質 。 ? 4. 應選擇骨髓小粒較多的骨髓涂片做鐵染色 ， 同一涂片上既觀察細胞外鐵也觀察細胞內(nèi)鐵 。 ? 5. 已做過瑞氏染色 （ 著色好 、 無沉渣 ） 的涂片 ， 也可做鐵染色 ， 且不需復染 。 ? 6. 復染前 ， 涂片應充分沖洗 ， 否則會產(chǎn)生較多針狀結晶體 。 ? ㈠ . 正常分布 （ 參考值 ） ： ? 1. 骨髓細胞外鐵 +～ ++。 ? 2. 骨髓細胞內(nèi)鐵：中晚幼紅細胞陽性率 19%～ 44%，顆粒 10粒以下 ， 無環(huán)形鐵粒幼紅細胞 。 ? 臨床意義 ： ? ⒈ 缺鐵性貧血時 ， 骨髓細胞外鐵明顯減少 ， 甚至消失；鐵粒幼紅細胞的百分率減低 ， 常小于 ， 嚴重時小于， 鐵粒 5粒以下 。 ? ⒉ 鐵粒幼細胞性貧血時 ， 鐵粒幼紅細胞高于 ， 可達 ， 鐵顆粒數(shù)目增多 ， 顆粒粗大 ， 可見環(huán)形鐵粒幼紅細胞 ， 細胞外鐵多為 “ ++” ， 可達 “ +++~++++” 。 ? ⒊ MDSRAS時 ， 鐵粒幼細胞百分率增高 ， 鐵粒數(shù)目增多 ， 環(huán)形鐵粒幼細胞大于 。 ? ⒋ 溶血性貧血及多次輸血的病人細胞外鐵可明顯增多 。 ? ， 用以鑒別含鐵血黃素細胞 ， 對于診斷慢性肺淤血 （ 心衰細胞 ） 、 幼兒特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥具有重要意義 。 ? ， 通常認為出血24h后 ， 即可有含鐵血黃素細胞出現(xiàn) 。