dna的三級(jí)結(jié)構(gòu)ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-05-01 18:05本頁(yè)面
【正文】 ： 轉(zhuǎn)化作用的物質(zhì)稱轉(zhuǎn)化因子 從一種細(xì)菌中得到 DNA通過(guò)一定途徑進(jìn)入另一種細(xì)菌，從而引起后者遺傳特性的改變。 ② 噬菌體感染實(shí)驗(yàn) 1952年美國(guó) Hershey 噬菌體感染實(shí)驗(yàn) ③ 轉(zhuǎn)導(dǎo)作用（ transduction） ④ 人工合成基因的表達(dá) 3. DNA與遺傳性疾病、癌變的關(guān)系 （ 1）鐮刀狀紅細(xì)胞貧血病的 DNA點(diǎn)突變 （ 2）白化病的基因缺失 （ 3）癌變 （二） RNA的生物功能 1． RNA與蛋白質(zhì)的生物合成 （ 1） mRNA與遺傳密碼 遺傳密碼（ geic code） 密碼子（ codon） mRNA的主要功能 （ 2） tRNA的作用 tRNA的作用是多方面的，它接受氨基酸、攜帶氨基酸，把氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體上，然后按照 mRNA上的密碼順序裝配成多肽或蛋白質(zhì)。 tRNA必須識(shí)別相應(yīng)的氨基酸和識(shí)別 mRNA上相應(yīng)的密碼子。 tRNA怎樣識(shí)別相應(yīng)的氨基酸 : 主要靠高度專(zhuān)一的氨 酰 tRNA合成酶。 Ea a + t R N A a a t R N A + EtRNA怎樣識(shí)別 mRNA上相應(yīng)的密碼子 （ 3） rRNA的作用 詳見(jiàn)網(wǎng)上參考材料 九、核酸的分離、純化和核苷酸的制備 （一）核酸的分離、提取通則 為了得到完整的大分子核酸，一般要注意 3點(diǎn) : 1．保持低溫（ 0186。～ 4℃ ）。 2．防止過(guò)酸、過(guò)堿，避免劇烈攪拌。 3．防止核酸酶的作用。 抑制 DNase： 可加檸檬酸鈉、 EDTA等金屬螯合劑；或加去污劑 十二烷基硫酸鈉（ SDS）；或加蛋白變性劑。 抑制 RNase： （ 1）實(shí)驗(yàn)器皿高溫，或高壓滅菌，不能高壓滅菌的用 具用 %二乙基焦碳酸鹽（ diethyl pyrocarbonate, DEPC）處理。 （ 2）加強(qiáng)的蛋白變性劑如硫氰酸胍、異硫氰酸胍等。 （ 3）加核糖核酸酶阻抑蛋白（ RNasin）等 RNase的抑制劑。 （二）大分子 DNA的提取 1．材料的選擇 2．細(xì)胞破碎 3． DNA蛋白質(zhì)（ DNP）的提取 真核細(xì)胞 DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成核蛋白（ DNP）， RNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成 RNP，而且 DNP和RNP常?；煸谝黄稹＠?DNP和RNP在不同濃度 NaCl中溶解度的不同來(lái)分離 DNP和 RNP。 可用 1mol/LNaCl溶液提取 DNP。 012 0 .1 4相 對(duì) 溶 解 度 NaCl（ mol/L） DNP在 NaCl中的溶解度 4．去蛋白質(zhì) （ 1） SDS （ 2）苯酚法 （ 3）氯仿法 （ 4）酚 :氯仿 :異戊醇 ＝ 25:24:1 5．沉淀 DNA 6．去雜質(zhì) （ 1）去 RNA （ 2）去多糖 7．進(jìn)一步純化 生物材料 DNP（ RNP） DNP 纖維狀 DNA 較純 DNA 純 DNA *原核生物的 DNA是裸露的，與蛋白質(zhì)結(jié)合不多，分離純化要簡(jiǎn)單些。 破細(xì)胞 * 去蛋白質(zhì) 酒精沉淀 去 RNA 柱層析，電泳 密度梯度離心 去多糖 （三） RNA的提取 1．不同種類(lèi) RNA的提取 2．大分子 RNA的提取 （ 1）酚提取 （ 2）酚 氯仿 SDS法 3． mRNA的提取 4．工業(yè)上制備 RNA （ 1）稀堿法 （ 2）濃鹽法 清 液 調(diào) p H 至 2 . 5 R N A ↓酵 母稀 堿法1 %N a OH濃 鹽法1 0 %N a Cl破 細(xì) 胞 壁釋 放 R N A中 和 后 離 心除 去 菌 體離 心（四）核酸純度鑒定 （五）核酸含量的測(cè)定 （六）核苷酸的制備 1．堿水解 2．酶水解
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