毛細(xì)管電泳課件(2)-資料下載頁
2025-05-01 02:52本頁面
【正文】 下遷移，分別到達(dá)滿足其等電點 pH的位置時，呈電中性，停止移動，形成窄溶質(zhì)帶而相互分離； ，陰極端裝稀 NaOH溶液； ； CIEF中不利，應(yīng)消除或減小。 1. 將兩種淌度差別很大的緩沖液分別作為前導(dǎo)離子 (充滿毛細(xì)管 )和尾隨離子，試樣離子的淌度全部位于兩者之間，并以同一速度移動。 2. 負(fù)離子分析時，前導(dǎo)電解質(zhì)的淌度大于試樣中所有負(fù)離子的。所有試樣都按前導(dǎo)離子的速度等速向陽極前進(jìn)，逐漸形成各自獨(dú)立的區(qū)帶而分離。陰極進(jìn)樣，陽極檢測。 五、毛細(xì)管等速電泳 Capillary isotachophoresis， CITP 3. 不同離子的淌度不同，所形成區(qū)帶的電場強(qiáng)度不同 (ν=μE )，淌度大的離子區(qū)帶電場強(qiáng)度小。 沿出口到進(jìn)口，將不同區(qū)帶依次排序 4? ? ? ?電場強(qiáng)度依次增大。假設(shè)“ 2” 號中離子擴(kuò)散到“ 3” 號，該區(qū)電場強(qiáng)度大，離子被加速，返回到“ 2” 區(qū)；當(dāng)“ 2” 號中離子跑到“ 1” 號區(qū)，離子被減速使之歸隊； 4. 特點：界面明顯，富集、濃縮作用。 在毛細(xì)管壁上鍵合或涂漬高效液相色譜的固定液，以含有機(jī)物的緩沖液為流動相，以電滲流為驅(qū)動力，試樣組分在兩相間的分配為分離機(jī)理的電動色譜過程； 六、毛細(xì)管電色譜 Capillary electroosmostic chromatography， CEC 一、離子分析 陽離子分析 遷移方向和電滲流方向一致； min內(nèi)分離了 24種金屬離子； 陽極進(jìn)樣，陰極檢測； 具有很高的靈敏度。 第五節(jié) 毛細(xì)管電泳的應(yīng)用與進(jìn)展 陰離子分析 陰離子電泳方向和電滲流方向相反、速度接近，分析時間長、效率低； 質(zhì)量小、電荷密度大的離子如： SO4 Cl、 F等，電泳速率大于電滲流，陽極端流出，在陰極端無法檢測； 加入電滲流改性劑，十六烷基三甲基溴化胺等，使電泳方向和電滲流方向一致，可在 min內(nèi)分離 36種陰離子；陰極進(jìn)樣，陽極檢測； 離子價態(tài)及存在形態(tài)分析； 二、藥物分析 檢測體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析； 尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段； 采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式，在 11 min內(nèi)分離 17種藥物； 采用 MEKC模式，鑒定違禁藥物；效果優(yōu)于 HPLC法 三、手性化合物分析 合成獲得單一手性化合物相當(dāng)困難； 528種手性合成藥物， 61種以單一對映體形式銷售，其他為外消旋體；檢測分析也相當(dāng)困難，研究熱點； R反應(yīng)停是安眠藥， S式致胎兒畸形； CE分離分析手性化合物的方法：加入手性選擇劑； 形成配合物的穩(wěn)定常數(shù)有差異，結(jié)合 CE的高效率； 常用手性選擇劑：環(huán)糊精及其衍生物；手性冠醚；手性表面活性劑（氨基酸衍生物、膽酸鈉、牛磺脫氧膽酸及其鈉鹽、低聚糖等天然手性表面活性劑） 四、氨基酸與蛋白質(zhì)分析 采用 MEKC模式，在 25 min內(nèi)分離了 23種丹?；被?； HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀； 問題：吸附和檢測； 蛋白質(zhì)分析 五、核酸分析及 DNA排序 酶解的雙螺旋 DNA限制性片段的分離； 六、新進(jìn)展 整體化學(xué)分析系統(tǒng)（ TAS）及 TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作為毛細(xì)管 ， 理論塔板數(shù) 105/m； ： CEMS； 應(yīng)用于人類基因 DNA測序； 5～ 10萬個基因， 30億個堿基對，目前最有效的 DNA序列分析儀， 10小時 /次；可同時電泳24個樣品；速度 1200堿基對 /小時，提高速度！ 100支毛細(xì)管陣列電泳；速度 280堿基對 /小時 /支
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