全國(guó)霍亂監(jiān)測(cè)方案(試行)-資料下載頁(yè)
2025-04-30 07:36本頁(yè)面
【正文】 是主動(dòng)檢測(cè)和監(jiān)測(cè)，防止誤診和漏診，從流行病學(xué)上確定可能的播散范圍并按《霍亂防治手冊(cè)》（第五版）中的有關(guān)規(guī)定采取控制措施。對(duì)帶菌者的個(gè)案調(diào)查可使用附表1填寫相關(guān)項(xiàng)目。6．樣品采集、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)應(yīng)與流行病學(xué)調(diào)查密切結(jié)合，從最早懷疑或診斷霍亂病例開始即需要收集病人臨床標(biāo)本，包括糞便、嘔吐物和血清。前兩者用于霍亂病原分離，后者收集臨床急性期和恢復(fù)期雙份血清、在始終沒有獲得病原時(shí)通過殺弧菌抗體的升高可輔助診斷。在工作能力可達(dá)到的范圍內(nèi)，要對(duì)每個(gè)病例收集標(biāo)本分離霍亂弧菌。對(duì)病人接觸的可疑食品及可疑水體，廣泛和規(guī)范地采集標(biāo)本進(jìn)行病原分離。因聚餐引起的暴發(fā)，除采集可疑食品標(biāo)本外，對(duì)食品清洗水的來源也需采集標(biāo)本做病原分離。獲得的病原體按本方案中的相關(guān)規(guī)定作病原特征檢測(cè)，匯總報(bào)告。外環(huán)境和食品中分離的病原，提供給相關(guān)實(shí)驗(yàn)室作進(jìn)一步分析，確定是否相似，以從病原學(xué)上獲得感染來源證據(jù)。在流行病學(xué)調(diào)查的始終、安排相應(yīng)的標(biāo)本采集和檢測(cè)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)，與流行病學(xué)監(jiān)測(cè)相結(jié)合分析感染來源和暴發(fā)流行的擴(kuò)散。7．疫點(diǎn)（疫區(qū)）處理。按照《霍亂防治手冊(cè)》（第五版）以及其他有關(guān)霍亂防治文件的規(guī)定進(jìn)行疫情控制。8．補(bǔ)充調(diào)查。隨調(diào)查的深入、假設(shè)的提出和驗(yàn)證的需求、以及控制和預(yù)防工作的展開，根據(jù)需要及時(shí)開展補(bǔ)充調(diào)查，包括流行病學(xué)調(diào)查和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。9．總結(jié)。對(duì)散發(fā)、暴發(fā)流行的處理，在控制工作完成后進(jìn)行系統(tǒng)全面的工作總結(jié)，并將總結(jié)報(bào)告逐級(jí)報(bào)上一級(jí)疾病控制中心，直至國(guó)家疾病控制中心?？偨Y(jié)報(bào)告中需包括依據(jù)具體數(shù)據(jù)（如采取控制措施前后的二代發(fā)病率、標(biāo)本的病原分離率等，見《霍亂防治手冊(cè)》第五版中第二章第二節(jié)“三、防治措施的效果評(píng)價(jià)”）對(duì)控制工作的評(píng)價(jià)和下一步工作建議。 附件2水系霍亂弧菌監(jiān)測(cè)點(diǎn)監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范一、采樣與送檢技術(shù)規(guī)范1．水體：水體的采樣一般要求用滅菌的500ml水樣瓶采集相對(duì)靜止的表層水（30cm以內(nèi)）500ml，加蓋密封后在室溫（2025℃）下送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。取水點(diǎn)的選擇應(yīng)結(jié)合流行病學(xué)調(diào)查等資料確定，同時(shí)，采樣時(shí)應(yīng)選擇在水流平穩(wěn)或靜止處吸取。非疫情狀態(tài)下的監(jiān)測(cè)采樣時(shí)間一般在清晨時(shí)，此時(shí)水體未受人群活動(dòng)等因素影響。每個(gè)采樣點(diǎn)中采樣位置應(yīng)相距數(shù)米、采集不少于2瓶做為平行檢測(cè)。采樣時(shí)立即測(cè)定采集樣品的溫度、pH，并記錄當(dāng)天的最高溫度和最低溫度，數(shù)據(jù)始終隨每份樣品的檢測(cè)報(bào)告逐級(jí)上報(bào)。2．水產(chǎn)品：水生動(dòng)物的采樣通常選取活的或新鮮的水生動(dòng)物為采集對(duì)象，有時(shí)也應(yīng)考慮冰凍的水生動(dòng)物，以無(wú)菌操作采集合適的部位，如鰓部和/或腸內(nèi)容物等，置采樣瓶（管）或食品采樣袋密封，在常溫下送檢。有條件的采樣點(diǎn)可將水生動(dòng)物整體采回實(shí)驗(yàn)室再進(jìn)行相關(guān)處置。同時(shí)，要求以無(wú)菌棉簽涂抹五只（條）以上的某類水生動(dòng)物體表、鰓及/或肛門，置堿性蛋白胨水送檢，每管堿性蛋白胨水作一份樣品看待。3．樣品的送檢：統(tǒng)一要求在樣品采集后，按生物安全規(guī)范，在室溫條件下3小時(shí)內(nèi)送抵實(shí)驗(yàn)室開展霍亂弧菌的分離培養(yǎng)。在北方地區(qū)冬季采樣時(shí)，應(yīng)注意樣品的保溫，防止結(jié)冰。二、水體和水產(chǎn)品樣本霍亂弧菌分離培養(yǎng)技術(shù)規(guī)范（一）培養(yǎng)基要求：以堿性蛋白胨水（pH ）作為增菌液；強(qiáng)選擇性分離培養(yǎng)基使用慶大霉素培養(yǎng)基或TCBS培養(yǎng)基；弱選擇性培養(yǎng)基統(tǒng)一使用堿性瓊脂。應(yīng)注意不同廠商以及不同批號(hào)培養(yǎng)基的質(zhì)量，每批培養(yǎng)基在使用前必須進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)，無(wú)條件開展質(zhì)量檢測(cè)的監(jiān)測(cè)點(diǎn)應(yīng)由省疾病預(yù)防控制中心協(xié)助解決。（二）水體樣本的增菌：增菌培養(yǎng)方法規(guī)定采用以下兩種之一。1．十倍濃縮堿胨水增菌培養(yǎng)法：詳見《霍亂防治手冊(cè)》（第五版）第75頁(yè)。2．濾膜富集增菌培養(yǎng)法：，使用Millipore真空過濾系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌富集，富集后的濾膜置含有終濃度為1/20萬(wàn)亞碲酸鉀的10ml堿性蛋白胨水三角瓶?jī)?nèi)增菌。3．水產(chǎn)品樣本增菌：使用無(wú)菌棉簽涂抹的樣品，直接接種到堿性蛋白胨水作為增菌液處理。整體或局部采回的樣品，在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)先在無(wú)菌操作的條件下，將其解剖，取鰓部和腸內(nèi)容物剪碎后，置100ml三角瓶?jī)?nèi)，加入510倍體積的堿性蛋白胨水增菌；但小貝殼類動(dòng)物，則用錘子將外殼擊碎，整體放入三角瓶中增菌；甲殼類動(dòng)物除含肉質(zhì)部分外，其余部分（包括鰓、腸、足、表層外殼等）整體放入三角瓶進(jìn)行增菌處理。4．環(huán)境樣品的霍亂弧菌分離培養(yǎng)程序：樣品在37℃經(jīng)812h增菌后，每份樣品分別接種一個(gè)9cm直徑的慶大霉素瓊脂或TCBS瓊脂平板和一個(gè)堿性瓊脂平板進(jìn)行劃線分離培養(yǎng)，同時(shí)，進(jìn)行二次增菌培養(yǎng)后，再如上述步驟進(jìn)行劃線分離培養(yǎng)。特別強(qiáng)調(diào)所有環(huán)境樣品的增菌分離培養(yǎng)步驟必須包括上述二次增菌和強(qiáng)、弱雙平板分離。5．疑似菌落鑒定基本要求：分別從慶大霉素瓊脂或TCBS瓊脂、堿性瓊脂平板上各挑取5個(gè)以上的（少于5個(gè)的全部挑?。┮伤凭浣臃N于營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面置37℃1824h純培養(yǎng)（即每份樣品至少?gòu)?個(gè)分離平板上獲得約20株可疑菌落菌株），取斜面純培養(yǎng)物進(jìn)行O1群及O139群霍亂診斷血清玻片凝集試驗(yàn)，血清凝集陽(yáng)性的菌株繼續(xù)相關(guān)的系統(tǒng)鑒定并報(bào)告結(jié)果。必須注意同一樣品中OO139群霍亂弧菌可能同時(shí)存在，有必要對(duì)所有選出的菌株都進(jìn)行凝集試驗(yàn)，以免遺漏。從環(huán)境中檢出的O1或O139群霍亂弧菌，要求即時(shí)上送省疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行噬菌體生物分型，具備條件的進(jìn)行毒素基因的PCR檢測(cè)、確定是否采取相關(guān)措施。在有條件的單位，對(duì)血清凝集試驗(yàn)陰性的菌株，可進(jìn)行氧化酶和粘絲試驗(yàn)初篩非O1/非O139群霍亂弧菌，并保留菌株按監(jiān)測(cè)方案的要求逐級(jí)上送至省疾病預(yù)防控制中心。22
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