全國霍亂監(jiān)測方案(試行)-資料下載頁
2025-04-30 07:36本頁面
【正文】 是主動檢測和監(jiān)測，防止誤診和漏診，從流行病學上確定可能的播散范圍并按《霍亂防治手冊》（第五版）中的有關(guān)規(guī)定采取控制措施。對帶菌者的個案調(diào)查可使用附表1填寫相關(guān)項目。6．樣品采集、實驗室檢測與實驗室監(jiān)測。實驗室檢測應(yīng)與流行病學調(diào)查密切結(jié)合，從最早懷疑或診斷霍亂病例開始即需要收集病人臨床標本，包括糞便、嘔吐物和血清。前兩者用于霍亂病原分離，后者收集臨床急性期和恢復期雙份血清、在始終沒有獲得病原時通過殺弧菌抗體的升高可輔助診斷。在工作能力可達到的范圍內(nèi)，要對每個病例收集標本分離霍亂弧菌。對病人接觸的可疑食品及可疑水體，廣泛和規(guī)范地采集標本進行病原分離。因聚餐引起的暴發(fā)，除采集可疑食品標本外，對食品清洗水的來源也需采集標本做病原分離。獲得的病原體按本方案中的相關(guān)規(guī)定作病原特征檢測，匯總報告。外環(huán)境和食品中分離的病原，提供給相關(guān)實驗室作進一步分析，確定是否相似，以從病原學上獲得感染來源證據(jù)。在流行病學調(diào)查的始終、安排相應(yīng)的標本采集和檢測，進行實驗室監(jiān)測，與流行病學監(jiān)測相結(jié)合分析感染來源和暴發(fā)流行的擴散。7．疫點（疫區(qū)）處理。按照《霍亂防治手冊》（第五版）以及其他有關(guān)霍亂防治文件的規(guī)定進行疫情控制。8．補充調(diào)查。隨調(diào)查的深入、假設(shè)的提出和驗證的需求、以及控制和預(yù)防工作的展開，根據(jù)需要及時開展補充調(diào)查，包括流行病學調(diào)查和實驗室檢測。9．總結(jié)。對散發(fā)、暴發(fā)流行的處理，在控制工作完成后進行系統(tǒng)全面的工作總結(jié)，并將總結(jié)報告逐級報上一級疾病控制中心，直至國家疾病控制中心?？偨Y(jié)報告中需包括依據(jù)具體數(shù)據(jù)（如采取控制措施前后的二代發(fā)病率、標本的病原分離率等，見《霍亂防治手冊》第五版中第二章第二節(jié)“三、防治措施的效果評價”）對控制工作的評價和下一步工作建議。 附件2水系霍亂弧菌監(jiān)測點監(jiān)測技術(shù)規(guī)范一、采樣與送檢技術(shù)規(guī)范1．水體：水體的采樣一般要求用滅菌的500ml水樣瓶采集相對靜止的表層水（30cm以內(nèi)）500ml，加蓋密封后在室溫（2025℃）下送實驗室檢測。取水點的選擇應(yīng)結(jié)合流行病學調(diào)查等資料確定，同時，采樣時應(yīng)選擇在水流平穩(wěn)或靜止處吸取。非疫情狀態(tài)下的監(jiān)測采樣時間一般在清晨時，此時水體未受人群活動等因素影響。每個采樣點中采樣位置應(yīng)相距數(shù)米、采集不少于2瓶做為平行檢測。采樣時立即測定采集樣品的溫度、pH，并記錄當天的最高溫度和最低溫度，數(shù)據(jù)始終隨每份樣品的檢測報告逐級上報。2．水產(chǎn)品：水生動物的采樣通常選取活的或新鮮的水生動物為采集對象，有時也應(yīng)考慮冰凍的水生動物，以無菌操作采集合適的部位，如鰓部和/或腸內(nèi)容物等，置采樣瓶（管）或食品采樣袋密封，在常溫下送檢。有條件的采樣點可將水生動物整體采回實驗室再進行相關(guān)處置。同時，要求以無菌棉簽涂抹五只（條）以上的某類水生動物體表、鰓及/或肛門，置堿性蛋白胨水送檢，每管堿性蛋白胨水作一份樣品看待。3．樣品的送檢：統(tǒng)一要求在樣品采集后，按生物安全規(guī)范，在室溫條件下3小時內(nèi)送抵實驗室開展霍亂弧菌的分離培養(yǎng)。在北方地區(qū)冬季采樣時，應(yīng)注意樣品的保溫，防止結(jié)冰。二、水體和水產(chǎn)品樣本霍亂弧菌分離培養(yǎng)技術(shù)規(guī)范（一）培養(yǎng)基要求：以堿性蛋白胨水（pH ）作為增菌液；強選擇性分離培養(yǎng)基使用慶大霉素培養(yǎng)基或TCBS培養(yǎng)基；弱選擇性培養(yǎng)基統(tǒng)一使用堿性瓊脂。應(yīng)注意不同廠商以及不同批號培養(yǎng)基的質(zhì)量，每批培養(yǎng)基在使用前必須進行質(zhì)量檢測，無條件開展質(zhì)量檢測的監(jiān)測點應(yīng)由省疾病預(yù)防控制中心協(xié)助解決。（二）水體樣本的增菌：增菌培養(yǎng)方法規(guī)定采用以下兩種之一。1．十倍濃縮堿胨水增菌培養(yǎng)法：詳見《霍亂防治手冊》（第五版）第75頁。2．濾膜富集增菌培養(yǎng)法：，使用Millipore真空過濾系統(tǒng)進行細菌富集，富集后的濾膜置含有終濃度為1/20萬亞碲酸鉀的10ml堿性蛋白胨水三角瓶內(nèi)增菌。3．水產(chǎn)品樣本增菌：使用無菌棉簽涂抹的樣品，直接接種到堿性蛋白胨水作為增菌液處理。整體或局部采回的樣品，在實驗室應(yīng)先在無菌操作的條件下，將其解剖，取鰓部和腸內(nèi)容物剪碎后，置100ml三角瓶內(nèi)，加入510倍體積的堿性蛋白胨水增菌；但小貝殼類動物，則用錘子將外殼擊碎，整體放入三角瓶中增菌；甲殼類動物除含肉質(zhì)部分外，其余部分（包括鰓、腸、足、表層外殼等）整體放入三角瓶進行增菌處理。4．環(huán)境樣品的霍亂弧菌分離培養(yǎng)程序：樣品在37℃經(jīng)812h增菌后，每份樣品分別接種一個9cm直徑的慶大霉素瓊脂或TCBS瓊脂平板和一個堿性瓊脂平板進行劃線分離培養(yǎng)，同時，進行二次增菌培養(yǎng)后，再如上述步驟進行劃線分離培養(yǎng)。特別強調(diào)所有環(huán)境樣品的增菌分離培養(yǎng)步驟必須包括上述二次增菌和強、弱雙平板分離。5．疑似菌落鑒定基本要求：分別從慶大霉素瓊脂或TCBS瓊脂、堿性瓊脂平板上各挑取5個以上的（少于5個的全部挑取）疑似菌落接種于營養(yǎng)瓊脂斜面置37℃1824h純培養(yǎng)（即每份樣品至少從4個分離平板上獲得約20株可疑菌落菌株），取斜面純培養(yǎng)物進行O1群及O139群霍亂診斷血清玻片凝集試驗，血清凝集陽性的菌株繼續(xù)相關(guān)的系統(tǒng)鑒定并報告結(jié)果。必須注意同一樣品中OO139群霍亂弧菌可能同時存在，有必要對所有選出的菌株都進行凝集試驗，以免遺漏。從環(huán)境中檢出的O1或O139群霍亂弧菌，要求即時上送省疾病預(yù)防控制中心進行噬菌體生物分型，具備條件的進行毒素基因的PCR檢測、確定是否采取相關(guān)措施。在有條件的單位，對血清凝集試驗陰性的菌株，可進行氧化酶和粘絲試驗初篩非O1/非O139群霍亂弧菌，并保留菌株按監(jiān)測方案的要求逐級上送至省疾病預(yù)防控制中心。22
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