培養(yǎng)基的組成、配制與滅菌-資料下載頁(yè)
2025-04-29 05:34本頁(yè)面
【正文】 0ml、 5ml、 2ml、 1ml）、試劑瓶若干（ 1000ml、 250ml）、移液器（ 1000ul、 200ul）滴灌、玻璃棒、試管、各種規(guī)格三角瓶（ 150ml、100ml、 50ml）、培養(yǎng)基分裝器，漏斗、稱量紙、標(biāo)簽紙、不同范圍 pH試紙、鉛筆等。 玻璃器皿用前清洗干凈。 藥品及蒸餾水準(zhǔn)備： 藥品采用分析純或化學(xué)純?cè)噭? 水利用蒸餾水或去離子水。 母液配制： （ 1）配制母液原則： 相同類型的試劑混合； 易形成沉淀的藥品分開； 母液濃度要適宜； 用量要認(rèn)真計(jì)算和核對(duì)； 藥品要準(zhǔn)確稱量。 （ 2） MS培養(yǎng)基母液的配制： MS培養(yǎng)基母液根據(jù)試劑特性通常配成四種母液，即大量元素母液（ 10或 20倍）、微量元素母液（ 100或 1000倍）、 Fe鹽（ 100倍）、有機(jī)物（ 100倍）。 配置前先進(jìn)行根據(jù)培養(yǎng)基組成和配制體積計(jì)算母液試劑用量，然后稱取藥品，大量元素可以用百分之一或千分之一天平，微量元素，鐵鹽和有機(jī)物用萬分之一天平稱量。 （ 3）激素母液的配制： 根據(jù)各種激素的使用濃度配制適宜的母液，用萬分之一天平稱取激素，溶劑溶解后加水定容。 生長(zhǎng)素類、赤霉素類及脫落酸等用 95％乙醇溶解；細(xì)胞分裂素類用 1N HCl或 1N NaOH溶解 。 通常激素母液濃度生長(zhǎng)素類為 ~ mg/ml, 細(xì)胞分裂素母液濃度為 ~ mg/ml. 四、培養(yǎng)基的配制： 量取母液：營(yíng)養(yǎng)元素和激素。 稱量蔗糖、瓊脂，放入 600ml左右蒸餾水的鍋內(nèi)，電路上加熱，使瓊脂溶化。 加入母液，混合均勻，調(diào)整 pH值。 分裝入瓶，每瓶 40－ 50ml。 封口：用 4－ 6層稱量紙封口，之后滅菌備用。 五、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）： 加熱 ： 滅菌前檢查滅菌鍋內(nèi)水量是否充足，然后將培養(yǎng)基放于滅菌鍋內(nèi)，改好蓋，關(guān)閉放氣閥，打開電源，加熱升溫。 排氣 ： 當(dāng)溫度升至 ，打開放氣閥徹底排出鍋內(nèi)冷空氣。然后關(guān)閉放氣閥，促使壓力繼續(xù)上升。 溫度控制： 當(dāng)鍋內(nèi)壓力升至 ，計(jì)時(shí) 15－ 20分鐘，計(jì)時(shí)結(jié)束后，關(guān)閉電源。 出鍋： 當(dāng)滅菌鍋?zhàn)匀焕鋮s后，取出培養(yǎng)基，放置于接種室備用。 六、培養(yǎng)基的保存： 防塵： 防治灰塵污染。 避光：吲哚乙酸等易于分解，要注意遮光。 恒溫： 4 oC可保存 3－ 6周，室溫下兩周內(nèi)用完。 4。定期更新：不易長(zhǎng)期保存。 20220913
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