培養(yǎng)基的組成、配制與滅菌(1)-資料下載頁
2025-04-29 04:51本頁面
【正文】 0ml、 5ml、 2ml、 1ml）、試劑瓶若干（ 1000ml、 250ml）、移液器（ 1000ul、 200ul）滴灌、玻璃棒、試管、各種規(guī)格三角瓶（ 150ml、100ml、 50ml）、培養(yǎng)基分裝器，漏斗、稱量紙、標簽紙、不同范圍 pH試紙、鉛筆等。 玻璃器皿用前清洗干凈。 藥品及蒸餾水準備： 藥品采用分析純或化學純試劑。 水利用蒸餾水或去離子水。 母液配制： （ 1）配制母液原則： 相同類型的試劑混合； 易形成沉淀的藥品分開； 母液濃度要適宜； 用量要認真計算和核對； 藥品要準確稱量。 （ 2） MS培養(yǎng)基母液的配制： MS培養(yǎng)基母液根據試劑特性通常配成四種母液，即大量元素母液（ 10或 20倍）、微量元素母液（ 100或 1000倍）、 Fe鹽（ 100倍）、有機物（ 100倍）。 配置前先進行根據培養(yǎng)基組成和配制體積計算母液試劑用量，然后稱取藥品，大量元素可以用百分之一或千分之一天平，微量元素，鐵鹽和有機物用萬分之一天平稱量。 （ 3）激素母液的配制： 根據各種激素的使用濃度配制適宜的母液，用萬分之一天平稱取激素，溶劑溶解后加水定容。 生長素類、赤霉素類及脫落酸等用 95％乙醇溶解；細胞分裂素類用 1N HCl或 1N NaOH溶解 。 通常激素母液濃度生長素類為 ~ mg/ml, 細胞分裂素母液濃度為 ~ mg/ml. 四、培養(yǎng)基的配制： 量取母液：營養(yǎng)元素和激素。 稱量蔗糖、瓊脂，放入 600ml左右蒸餾水的鍋內，電路上加熱，使瓊脂溶化。 加入母液，混合均勻，調整 pH值。 分裝入瓶，每瓶 40－ 50ml。 封口：用 4－ 6層稱量紙封口，之后滅菌備用。 五、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）： 加熱 ： 滅菌前檢查滅菌鍋內水量是否充足，然后將培養(yǎng)基放于滅菌鍋內，改好蓋，關閉放氣閥，打開電源，加熱升溫。 排氣 ： 當溫度升至 ，打開放氣閥徹底排出鍋內冷空氣。然后關閉放氣閥，促使壓力繼續(xù)上升。 溫度控制： 當鍋內壓力升至 ，計時 15－ 20分鐘，計時結束后，關閉電源。 出鍋： 當滅菌鍋自然冷卻后，取出培養(yǎng)基，放置于接種室備用。 六、培養(yǎng)基的保存： 防塵： 防治灰塵污染。 避光：吲哚乙酸等易于分解，要注意遮光。 恒溫： 4 oC可保存 3－ 6周，室溫下兩周內用完。 4。定期更新：不易長期保存。 20220913
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