微生物與免疫學復(fù)習重點-資料下載頁
2025-04-24 22:37本頁面
【正文】 發(fā)酵5次級代謝產(chǎn)物的特點：（1）對微生物自身的生長、繁殖無顯著功能（2）與初級代謝緊密相連（3）在一定條件下能大量合成5抗生素生物合成的調(diào)節(jié)與控制要點：（1）受產(chǎn)生菌生長速率的調(diào)節(jié)（2）受分解代謝物調(diào)節(jié)（3）需要合適的初級代謝基礎(chǔ)抗生素的主要作用機制：抑制細胞壁的合成、影響細胞膜的功能、干擾蛋白質(zhì)的合成、抑制核酸的合成、干擾細胞的能量代謝抗藥性產(chǎn)生的遺傳學機制：（1）自發(fā)突變加藥物選擇（2）抗藥性基因的轉(zhuǎn)移抗藥性產(chǎn)生的生物化學機制：（）產(chǎn)生鈍化酶（2）藥物作用靶位改變（3）細胞對藥物的透性改變60、抗藥性的控制措施：（1）合理用藥（2）新藥開發(fā)（3）抗藥機制研究6抗生素效價的微生物學測定法：管碟法（二劑量法）:計算公式、影響因素6微生物在其他藥物生產(chǎn)中的應(yīng)用：維生素C二步發(fā)酵法、氨基酸發(fā)酵的代謝調(diào)控、酶及酶抑制劑的生產(chǎn)意義、甾體轉(zhuǎn)化的意義、微生態(tài)制劑等6藥物生產(chǎn)中的微生物來源：空氣、水、人體、土壤、原料和包裝、廠房和制藥設(shè)備6GMP：藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范6防止微生物污染藥物的措施：（1）加強藥品生產(chǎn)管理（2）進行微生物學檢驗(3)使用合適的防腐劑6測定藥物MIC、MBC的方法：（1）連續(xù)稀釋法（2）瓊脂擴散法6常用的活菌計數(shù)法：（1）平板計數(shù)法（2）濾膜過濾法6體外抗菌試驗的影響因素：（1）試驗菌（2）培養(yǎng)基（3）抗菌藥物（4）對照試驗6藥物制劑的微生物學檢查：無菌檢查、細菌總數(shù)和霉菌總數(shù)檢查、控制菌檢查等五、微生物學基本技能要點顯微鏡油境鏡頭的使用要點：（1）低倍鏡對光（2）聚光器上調(diào)（3）將油鏡頭降至最低（4）用粗調(diào)緩緩上調(diào)鏡頭至有物像一閃（5）用微調(diào)調(diào)至物象清晰革蘭染色方法和應(yīng)用意義：染色方法：結(jié)晶紫初染1分鐘后細流水沖洗碘液媒染1分鐘后細流水沖洗95%酒精脫色（滴加酒精12次、脫色時間1530秒）沙黃復(fù)染1分鐘后細流水沖洗，甩干。應(yīng)用意義：（1）細菌分類鑒定方面的意義：根據(jù)染色結(jié)果可將細菌分成革蘭陽性細菌和革蘭陰性細菌兩大類。（2）指導(dǎo)臨床用藥方面的意義：革蘭陽性細菌和革蘭陰性細菌對藥物的敏感性不同。標本片的制作過程：涂片（在玻片上將細菌標本均勻涂布成1平方厘米的薄層）干燥（做到涂片上水跡完全消失） 固定（緩緩?fù)ㄟ^火焰3次）染色（采用相應(yīng)染色方法）觀察細菌典型形態(tài)的方法：根據(jù)對細菌的不規(guī)則形態(tài)及其影響因素的理解，選擇對數(shù)生長期的菌體進行觀察。這樣當拿到細菌標本后，通常一方面直接鏡檢，另一方面將標本中的細菌培養(yǎng)至對數(shù)生長狀態(tài)后再鏡檢。細菌接種的無菌操作技術(shù)：接種環(huán)的握持方法、燒灼接種環(huán)的方法、試管的握持方法、火焰保護下接種的注意事項培養(yǎng)基制備過程：稱量溶解過濾調(diào)節(jié)酸堿度分裝高壓蒸汽滅菌細菌的接種培養(yǎng)方法及其主要用途：（1）平板劃線的方法：分區(qū)劃線法。主要用于分離細菌（2）斜面接種法：由下至上涂布。主要用于菌種的擴大培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)。（3）液體接種法：將粘有菌接種環(huán)在培養(yǎng)基內(nèi)的試管壁研磨，以使細菌均勻分布于培養(yǎng)基。主要用于觀察細菌生長現(xiàn)象等研究。（4）半固體穿刺接種法：將粘有細菌的接種針穿刺與培養(yǎng)基中。主要用于觀察細菌有無動力。細菌生長現(xiàn)象的觀察：平板劃線（觀察及描述菌落的形態(tài)）、斜面接種（觀察細菌的菌苔）、液體接種（觀察均勻混濁生長現(xiàn)象、菌膜生長現(xiàn)象）、半固體接種（觀察細菌有無動力）細菌的生化反應(yīng)（糖發(fā)酵、IMViC、硫化氫、尿素酶）的原理、方法以及結(jié)果判斷（理解其在細菌鑒定方面的意義） 高壓滅菌鍋滅菌方法的操作要點：蒸汽要流暢、排盡冷空氣、零磅開蓋1紫外線滅菌的機理和特點：滅菌機理：主要是破壞細菌的核酸。作用特點：穿透力低，主要用于物體表面以及無菌室空氣的消毒。1鏈霉菌菌落觀察：菌落特點：小、致密、表面干躁、灰色孢子1酵母菌菌落觀察：菌落特點：大、厚、表面濕潤、乳白色1乙肝病毒表面抗原檢測（ELISA）：包被抗體加待檢血清加酶標抗體加底物比色法判斷結(jié)果1病毒培養(yǎng)的3種方法：細胞培養(yǎng)、雞胚培養(yǎng)、動物接種1藥物體外抗菌試驗：紙片擴散法（藥物敏感試驗）：（1）菌種：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌37℃1216小時普通肉湯瓊脂斜面培養(yǎng)物（2）培養(yǎng)基：MH（肉湯）、MHA（肉湯瓊脂）（3）方法：斜面培養(yǎng)物接種MH過夜（細菌處于對數(shù)生長期）涂布于MHA加抗生素濾紙片37℃培養(yǎng)24小時測量抑菌圈直徑對照表151判斷藥敏試驗結(jié)果1抗生素效價二劑量測定法計算公式： (UH+UL)(SH+SL) H lgθ= * lg (SH+UH)(SL+UL) L1細菌總數(shù)測定方法：試液稀釋取兩個合適稀釋度試液1ml平板加15ml培養(yǎng)基搖均平板倒置37℃培養(yǎng)48小時計數(shù)菌落報告結(jié)果1霉菌總數(shù)測定、無菌檢查、熱原質(zhì)檢查
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