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正文內(nèi)容

公豬精液規(guī)范化采集與稀釋-資料下載頁

2025-04-12 01:39本頁面
  

【正文】 使判斷出現(xiàn)人為誤差。用100倍或400倍的顯微鏡來檢測精子的活力,即判斷視野中前進(jìn)運(yùn)動精子所占的比例?;盍?級評分方法是:整個視野中有明顯的大的運(yùn)動波 很好 5分出現(xiàn)一些運(yùn)動波和精子成群運(yùn)動 好 4分出現(xiàn)成群運(yùn)動 較好 3分無成群運(yùn)動,部分呈前進(jìn)運(yùn)動 一般 2分只有蠕動差1分無精子活動0分注:運(yùn)動波是指精子成群運(yùn)動時,推動液體運(yùn)動形成的云霧狀翻滾現(xiàn)象。取精液滴在預(yù)溫后的載玻片上蓋上蓋玻片后,觀察精液運(yùn)動狀況精子運(yùn)動活潑可形成運(yùn)動波對稀釋保存的精液,在進(jìn)行精子活力評估時,一般采用十級制評分。即估測視野中前進(jìn)運(yùn)動精子的百分率,因?yàn)?,稀釋后的精液,精子的運(yùn)動較容易看清,可根據(jù)前進(jìn)運(yùn)動精子和非前進(jìn)運(yùn)動精子的大致比例,來進(jìn)行估計。例如,有70%的精子呈前進(jìn)運(yùn)動,以此類推。不論是原精液還是稀釋保存的精液,如果在檢查中精子的活力很差,應(yīng)仔細(xì)檢查每個環(huán)節(jié),進(jìn)行第二次檢查,應(yīng)注意吸咀、載玻片和蓋玻片必須潔凈,對精子無毒害,載玻片溫度適宜。如果第二次檢查仍很差,則精液必須廢棄。(5)精子的濃度(或密度)精子的濃度是指單位體積精液所含的總精子數(shù)(通常為億/ml)。(1)血球計數(shù)板法濃度測定精子的濃度可用血球計數(shù)板法進(jìn)行測定:輕輕搖動精液,用微量移液器(取樣器)取精液100微升,擦去外部精液,加入一次性試管中,用移液管吸取3%(即3900微升)加入精液中,混合均勻,原精液被稀釋了40倍。將血球計數(shù)板放在載物臺上,加蓋蓋玻片,用取樣器吸取25微升稀釋后精液加入計數(shù)板與蓋玻片之間的計算室中使計算室充滿(見圖)。放在顯微鏡下找到計算室,計數(shù)計算室內(nèi)的總精子數(shù),為了減少計數(shù)的工作量,可選擇有代表性的五個中方格,如四角一中心,或斜對角線的五個方格(見圖用紅色框標(biāo)記的中方格)計數(shù)精子。為了避免計數(shù)精子時重復(fù),應(yīng)以精子的頭數(shù)為準(zhǔn),對在格線上的精子,可依照數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右的原則,計數(shù)五個中方格中的總精子數(shù)。為計算室的一個中方格,在計數(shù)量,在右側(cè)線和下端上的精子(為了識別,標(biāo)記為白色)是不應(yīng)進(jìn)行計數(shù)的精子。五個中方格總精子計數(shù)完后得出的結(jié)果,依下列公式進(jìn)行計算原精子密度(此公式已被簡化):精子密度(億個/毫升)=五個中方格總精子數(shù)血球計數(shù)板法是其它光學(xué)測定方法的基礎(chǔ),因?yàn)楣鈱W(xué)的度數(shù)是根據(jù)光學(xué)儀器的原理得出的,與精子密度并沒有直接關(guān)系,必須有已知的密度值才能獲得對照表。計數(shù)室的五個中方格一 個中方格的精子(白色為不計數(shù)精子)(2)分光光度計或精子密度計法這種方法是采用光學(xué)儀器,根據(jù)精子濃度越高,透光率越低的原理進(jìn)行精子濃度測定的。在440納米可見光下,用加檸檬酸鈉溶液的比色杯,按100%透過率作空白對照,然后在另一比色杯中加入等量的檸檬酸鈉溶液,再加定量精液,混合均勻后,放入樣本池,讀出透光率讀數(shù)。最后查精子密度查對表,查出精子濃度讀數(shù)。有時提供的對照表是指稀釋后精液的精子濃度,需根據(jù)稀釋倍數(shù),換算出原精液精子濃度。精子密度查對表是用先用血球計數(shù)板測出諾干個精液標(biāo)準(zhǔn)樣本的精子濃度值,然后將其稀釋成不同濃度梯度的樣本,每個樣本的精子濃度均可計算出,測出其透光率,然后制成透光率和精子濃度查對表。(3)精子密度杯法由鄭州牧業(yè)工程高等??茖W(xué)校張長興老師發(fā)明的精子密度杯,可以很方便地進(jìn)行豬精子密度的測定,而且設(shè)備簡單,價格低廉。將10毫升生理鹽水加入精子密度杯,根據(jù)采集到精液的色澤,初步判斷精子濃度的高低,、1毫升、2毫升任一個添加量,加入生理鹽水中,對初學(xué)者來說,可不必選擇原精液添加量,只需固定地添加1毫升量即可,只是測定值的精確度略低。用拇指壓緊杯口,上下翻轉(zhuǎn)4~5次,然后在自然光或較強(qiáng)的光照下,將密度杯與眼呈水平,從上向下觀察其讀數(shù)值,再根據(jù)實(shí)際添加量,查對照表的相應(yīng)的列,就可以查到原精液的精子濃度值。(6)精子的形態(tài)觀察(畸形率)精子的形態(tài)觀察主要是觀察精子的畸形率,豬的精子畸形率不能超過20%,否則就必須廢棄。左側(cè)為正常精子(點(diǎn)狀物為原生質(zhì)),右側(cè)為各種畸形精子(7)精子的凝集現(xiàn)象與牛羊不同的是,豬的精子很容易發(fā)生凝集。當(dāng)凝集嚴(yán)重時,精液在直觀條件下就可看到精液很不均勻。輕度凝集,可在顯微鏡下觀察到,精子成團(tuán)存在,有些精子盡管在蠕動,但已經(jīng)失去了前進(jìn)運(yùn)動的能力。精子凝集后,凝集的精子失去了活力,使精子活力總體上大幅度下降。因此,凡有輕度凝集的精液,如果活力符合要求,應(yīng)注意作好記錄,并在精液稀釋后12小時進(jìn)行活力檢查,如果活力下降很明顯,應(yīng)考慮將精液廢棄。,有少量凝集,可用一個+號表示,有明顯的成團(tuán)精子凝集可用++表示,有大團(tuán)凝集者為+++。有成團(tuán)凝集的精液應(yīng)廢棄。 精子凝集成團(tuán),分布不均豬精液的運(yùn)輸 最常用的短途運(yùn)輸工具是泡沫塑料箱或疫苗箱。氣候溫和季節(jié)可將精液容器直接放入疫苗箱中運(yùn)輸;如果氣溫較高或較低(尤其是氣溫較低時),應(yīng)用冰袋或熱水袋放在疫苗箱底部,然后蓋上小棉被,再將精液放入箱中,并放一支溫度計,隨時測量箱內(nèi)的溫度,力爭使溫度保存在16~20℃,但如果在短時間內(nèi)輸精,溫度允許達(dá)到25℃,但不可低于16℃。極端寒冷地區(qū)在輸精前可用熱水袋將精液逐步升溫到33℃左右,再用于輸精,以防輸精時,精液溫度進(jìn)一步下降。長途運(yùn)輸情況下,精液受外界溫度影響程度較大,可采用專用車載冰箱存放精液。如果用疫苗箱或泡沫塑料箱存放應(yīng)定時觀察箱內(nèi)溫度。如果能保證車箱內(nèi)合適的溫度,則運(yùn)輸更安全,對存放容器的要求可以低些。精液品質(zhì)檢查本交公豬的精檢原則:(1) 所有在用的公豬每月必須普查精液品質(zhì)一次,夏季每月兩次,若連續(xù)三次精檢不合格或連續(xù)二次精檢不合格且伴有睪丸腫大、萎縮、性欲低下、跛行等疾病時,必須淘汰。(2) 精檢不合格的公豬絕對不可以使用,公豬不夠用采用人工授精(3) 關(guān)于不合格公豬的復(fù)檢工作,請按《五周四次精檢法》進(jìn)行復(fù)檢?!段逯芩拇尉珯z法》(1) 首次精檢不合格的公豬,7天后復(fù)檢(第二次)。(2) 復(fù)檢不合格的公豬,10天后采精,作廢,再隔4天后采精檢查(第三次)。(3) 仍不合格者,10天后再采精,作廢,再隔 4 天后作第四次檢查 。 經(jīng)過連續(xù)五周四次精檢,一直不合格的公豬建議作淘汰處理,若中途檢查合格,視精液品質(zhì)狀況酌情使用。公豬全份精液品質(zhì)檢查暫行標(biāo)準(zhǔn)178。 優(yōu):精液量250ML以上,,畸型率5%以下,感觀正常。178。 良:精液量150ML以上,,畸型率 10%以下,感觀正常。178。 合格:精液量100ML以上,, 畸型率18%以下(夏季訂為20%),感觀正常。178。 不合格:,畸型率18%以上(夏季訂為20%),感觀正常。以上四個條件只要有一個條件符合即評為不合格。 四川安佑技術(shù)服務(wù)部提供 2012091424
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