第十二章配子與胚胎生物技術(shù)-資料下載頁(yè)
2025-04-07 04:00本頁(yè)面
【正文】 物家系，外源DNA才能在后代中穩(wěn)定遺傳。四、哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在的主要問題（P245）效率低，成本高。外源基因的隨機(jī)整合和異常表達(dá)轉(zhuǎn)基因與動(dòng)物保護(hù)的矛盾轉(zhuǎn)基因動(dòng)物釋放及生物安全五、哺乳動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)（P245246）提高效率，降低成本加強(qiáng)基因定點(diǎn)整合技術(shù)的研究轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展將對(duì)人類產(chǎn)生深刻的影響第五節(jié) 性別控制技術(shù)一、性別控制技術(shù)的發(fā)展概況動(dòng)物性別控制技術(shù)定義（P246，記憶）：是通過對(duì)動(dòng)物的正常生殖過程進(jìn)行人為干預(yù)，使成年雌性動(dòng)物產(chǎn)生人們期望性別后代的一種生物技術(shù)。性別控制的意義（P246）可充分發(fā)揮受性別限制的生產(chǎn)性狀（如泌乳性狀）和受性別影響的生產(chǎn)性狀（如肉質(zhì),生長(zhǎng)速度等）的最大的經(jīng)濟(jì)效益； 可增強(qiáng)良種選種強(qiáng)度、加快育種進(jìn)程； 克服牛ET中出現(xiàn)的異性孿生不育現(xiàn)象；排除伴性有害基因的危害。一、性別控制技術(shù)的發(fā)展概況（P246）216。 物理法時(shí)期（19251970）：離心，電泳等 這些方法都是以x和y精子之間存在物理差異為依據(jù)，如密度、重量、形態(tài)、大小、活力和表面電荷。 216。 免疫法時(shí)期（19711989）：HY抗原（雄性特異的組織性相容性抗原）216。 流動(dòng)細(xì)胞儀分離法時(shí)期（1990）：最科學(xué)，最可靠二、哺乳動(dòng)物的性別控制技術(shù)（P246248）（一）X、Y精子的分離 X和Y精子的差異 X精子染色體的含量高于Y精子染色體上特異SRY (Sexdetermining region of Ychromosome）序列。X和Y精子的分離理論基礎(chǔ)：DNA含量：XY，Hoechst 33342染色流動(dòng)細(xì)胞器分類法進(jìn)行X、Y精子分離的程序（記憶，P247）：先用DNA特異性染料對(duì)精子進(jìn)行活體染色；然后精子連同少量稀釋液逐個(gè)通過激光束，探測(cè)器可探測(cè)精子的發(fā)光強(qiáng)度并不把不同強(qiáng)弱的光信號(hào)傳遞給計(jì)算機(jī)；計(jì)算機(jī)指令液滴充電器使發(fā)光強(qiáng)度高的液滴帶正電，弱的帶負(fù)電；然后帶電液滴通過高壓電場(chǎng)，不同電荷的液滴在電場(chǎng)中被分開，進(jìn)入到兩個(gè)不同的收集管，正電荷收集管為X精子，負(fù)電荷收集管為Y精子 。（二）早期胚胎性別鑒定（P247248）核型分析法 從早期胚胎中取出部分細(xì)胞，制備染色體標(biāo)本，觀察性染色體類型。SRY片段基因的PCR擴(kuò)增法從早期胚胎中取出一個(gè)或幾個(gè)卵裂球，用特異性引物擴(kuò)增SRY基因，能夠產(chǎn)生出擴(kuò)增DNA片段的胚胎即為雄性，反之為雌性，再把確定性別的胚胎移植到子宮。免疫學(xué)方法 雄性特異性組織相容性抗原（HY抗原）。 三、性別控制技術(shù)的發(fā)展前景（P248）流動(dòng)細(xì)胞器分類法和SRYPCR擴(kuò)增法是準(zhǔn)確而又發(fā)展前景的性別控制方法；但前者分離速度太慢影響其在生產(chǎn)中的應(yīng)用，目前需要解決準(zhǔn)確率和分離速度，并加強(qiáng)與IVF和顯微受精技術(shù)結(jié)合提高分離精子的利用率；后者是需要提高靈敏度、減少取樣對(duì)胚胎的損傷。另外，需要加緊研制各種家畜的SRYPCR試劑盒。第六節(jié) 動(dòng)物胚胎干細(xì)胞的分離和培養(yǎng)技術(shù)（自學(xué)）v 哺乳動(dòng)物胚胎干細(xì)胞(mammalian embryonic stem cells)又稱ES或EK(evans amp。 kaufman)細(xì)胞， 它是早期胚胎中分離出來的具有發(fā)育全能性的細(xì)胞系。v 一方面具有胚胎細(xì)胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，核大，核質(zhì)比高，核仁突出，培養(yǎng)時(shí)呈克隆狀生長(zhǎng)；在功能上，它具有發(fā)育的全能性，即分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型細(xì)胞的能力；v 另一方面，它又具有細(xì)胞系的特性，可在體外培養(yǎng)繁殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存和遺傳改造。一、ES細(xì)胞研究的意義（P249）ES細(xì)胞可用于研究哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育的發(fā)生發(fā)育規(guī)律；可在體外研究細(xì)胞的分化規(guī)律；可用于研究基因的功能；可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的生產(chǎn)；可治療人類的某些疾病。（四）ES細(xì)胞技術(shù)目前存在的問題和發(fā)展遠(yuǎn)景（P251252）根據(jù)細(xì)胞的分化特點(diǎn)建立更有效的培養(yǎng)體系；加強(qiáng)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化研究；提高家畜ES細(xì)胞的分離水平；加速ES細(xì)胞在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。第七節(jié) 哺乳嵌合體的生產(chǎn)（自學(xué)）嵌合體動(dòng)物：指由基因型不同的細(xì)胞構(gòu)成的復(fù)合個(gè)體。包括種內(nèi)和種間嵌合。如指由2個(gè)以上不同的受精卵或3個(gè)以上的配子相結(jié)合等嵌合體動(dòng)物制作方法：卵裂球聚合法：在卵裂階段使2個(gè)以上的胚胎發(fā)生粘著和結(jié)合。囊胚注入法：在臨近著床的胚泡期，用顯微操作方法將另一個(gè)體的細(xì)胞注入到囊胚腔中。研究現(xiàn)狀： 家畜的嵌合體不但已在個(gè)體間和品種間取得成功（綿羊、牛等），而且在異種間也得到了活的后代，如綿山羊人工嵌合體，該技術(shù)對(duì)遺傳學(xué)研究具有重要意義，塑造特異性狀的新奇物種，從而為動(dòng)物園展示了新的前景，嵌合體也被用來研究免疫學(xué)系統(tǒng)的機(jī)理。96 / 13
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