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第十二章配子與胚胎生物技術(shù)-資料下載頁

2025-04-07 04:00本頁面
  

【正文】 物家系,外源DNA才能在后代中穩(wěn)定遺傳。四、哺乳動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在的主要問題(P245)效率低,成本高。外源基因的隨機整合和異常表達轉(zhuǎn)基因與動物保護的矛盾轉(zhuǎn)基因動物釋放及生物安全五、哺乳動物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展趨勢(P245246)提高效率,降低成本加強基因定點整合技術(shù)的研究轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展將對人類產(chǎn)生深刻的影響第五節(jié) 性別控制技術(shù)一、性別控制技術(shù)的發(fā)展概況動物性別控制技術(shù)定義(P246,記憶):是通過對動物的正常生殖過程進行人為干預(yù),使成年雌性動物產(chǎn)生人們期望性別后代的一種生物技術(shù)。性別控制的意義(P246)可充分發(fā)揮受性別限制的生產(chǎn)性狀(如泌乳性狀)和受性別影響的生產(chǎn)性狀(如肉質(zhì),生長速度等)的最大的經(jīng)濟效益; 可增強良種選種強度、加快育種進程; 克服牛ET中出現(xiàn)的異性孿生不育現(xiàn)象;排除伴性有害基因的危害。一、性別控制技術(shù)的發(fā)展概況(P246)216。 物理法時期(19251970):離心,電泳等 這些方法都是以x和y精子之間存在物理差異為依據(jù),如密度、重量、形態(tài)、大小、活力和表面電荷。 216。 免疫法時期(19711989):HY抗原(雄性特異的組織性相容性抗原)216。 流動細胞儀分離法時期(1990):最科學(xué),最可靠二、哺乳動物的性別控制技術(shù)(P246248)(一)X、Y精子的分離 X和Y精子的差異 X精子染色體的含量高于Y精子染色體上特異SRY (Sexdetermining region of Ychromosome)序列。X和Y精子的分離理論基礎(chǔ):DNA含量:XY,Hoechst 33342染色流動細胞器分類法進行X、Y精子分離的程序(記憶,P247):先用DNA特異性染料對精子進行活體染色;然后精子連同少量稀釋液逐個通過激光束,探測器可探測精子的發(fā)光強度并不把不同強弱的光信號傳遞給計算機;計算機指令液滴充電器使發(fā)光強度高的液滴帶正電,弱的帶負電;然后帶電液滴通過高壓電場,不同電荷的液滴在電場中被分開,進入到兩個不同的收集管,正電荷收集管為X精子,負電荷收集管為Y精子 。(二)早期胚胎性別鑒定(P247248)核型分析法 從早期胚胎中取出部分細胞,制備染色體標本,觀察性染色體類型。SRY片段基因的PCR擴增法從早期胚胎中取出一個或幾個卵裂球,用特異性引物擴增SRY基因,能夠產(chǎn)生出擴增DNA片段的胚胎即為雄性,反之為雌性,再把確定性別的胚胎移植到子宮。免疫學(xué)方法 雄性特異性組織相容性抗原(HY抗原)。 三、性別控制技術(shù)的發(fā)展前景(P248)流動細胞器分類法和SRYPCR擴增法是準確而又發(fā)展前景的性別控制方法;但前者分離速度太慢影響其在生產(chǎn)中的應(yīng)用,目前需要解決準確率和分離速度,并加強與IVF和顯微受精技術(shù)結(jié)合提高分離精子的利用率;后者是需要提高靈敏度、減少取樣對胚胎的損傷。另外,需要加緊研制各種家畜的SRYPCR試劑盒。第六節(jié) 動物胚胎干細胞的分離和培養(yǎng)技術(shù)(自學(xué))v 哺乳動物胚胎干細胞(mammalian embryonic stem cells)又稱ES或EK(evans amp。 kaufman)細胞, 它是早期胚胎中分離出來的具有發(fā)育全能性的細胞系。v 一方面具有胚胎細胞的特性,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,核大,核質(zhì)比高,核仁突出,培養(yǎng)時呈克隆狀生長;在功能上,它具有發(fā)育的全能性,即分化為成年動物體內(nèi)任何一種類型細胞的能力;v 另一方面,它又具有細胞系的特性,可在體外培養(yǎng)繁殖而不發(fā)生分化,可進行冷凍保存和遺傳改造。一、ES細胞研究的意義(P249)ES細胞可用于研究哺乳動物個體發(fā)育的發(fā)生發(fā)育規(guī)律;可在體外研究細胞的分化規(guī)律;可用于研究基因的功能;可用于轉(zhuǎn)基因動物的生產(chǎn);可治療人類的某些疾病。(四)ES細胞技術(shù)目前存在的問題和發(fā)展遠景(P251252)根據(jù)細胞的分化特點建立更有效的培養(yǎng)體系;加強ES細胞體外誘導(dǎo)分化研究;提高家畜ES細胞的分離水平;加速ES細胞在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。第七節(jié) 哺乳嵌合體的生產(chǎn)(自學(xué))嵌合體動物:指由基因型不同的細胞構(gòu)成的復(fù)合個體。包括種內(nèi)和種間嵌合。如指由2個以上不同的受精卵或3個以上的配子相結(jié)合等嵌合體動物制作方法:卵裂球聚合法:在卵裂階段使2個以上的胚胎發(fā)生粘著和結(jié)合。囊胚注入法:在臨近著床的胚泡期,用顯微操作方法將另一個體的細胞注入到囊胚腔中。研究現(xiàn)狀: 家畜的嵌合體不但已在個體間和品種間取得成功(綿羊、牛等),而且在異種間也得到了活的后代,如綿山羊人工嵌合體,該技術(shù)對遺傳學(xué)研究具有重要意義,塑造特異性狀的新奇物種,從而為動物園展示了新的前景,嵌合體也被用來研究免疫學(xué)系統(tǒng)的機理。96 / 13
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