【正文】 ，被萃取組分以一種簡(jiǎn)單分子的形式在兩相間屋里分配。以中型分子存在，不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。中型溶劑絡(luò)合萃?。罕惠腿∥锸侵行头肿樱腿┮彩侵行头肿?，萃取劑與被萃取物結(jié)合成為絡(luò)合物進(jìn)入有機(jī)相。酸性陽(yáng)離子交換萃?。狠腿槿跛嵝杂袡C(jī)酸或酸性鰲合劑。金屬離子在水相中以陽(yáng)離子或能解離為陽(yáng)離子的絡(luò)離子的形式存在，金屬離子與萃取劑反應(yīng)生成中性鰲合物。離子絡(luò)合萃?。孩俳饘匐x子在水相中形成絡(luò)合陰離子，萃取劑與氫離子結(jié)合形成陽(yáng)離子，二者構(gòu)成離子締合體系進(jìn)入有機(jī)相； ②金屬陽(yáng)離子與中性鰲合劑結(jié)合成鰲合陽(yáng)離子，再與水相中的陰離子構(gòu)成離子締合體系而進(jìn)入有機(jī)相。2．試述凝膠色譜的原理？答：將混合原料加在柱上并用流動(dòng)相洗脫，則無(wú)法進(jìn)入孔隙內(nèi)部的大分子直接被洗脫下來(lái)，小分子因?yàn)榭梢赃M(jìn)入孔隙內(nèi)部而受到很大的阻滯，最晚被洗脫下來(lái)，而中等大小的分子，雖然可以進(jìn)入孔隙內(nèi)部但并不深入，受到的阻滯作用不強(qiáng)，因而在兩者之間被洗脫下來(lái)。3．在色譜操作過(guò)程中為什么要進(jìn)行平衡？答：流速平衡：流速是柱層析操作當(dāng)中的主要影響因素，流速的快慢直接影響著分離的效果，流速過(guò)快，混合物得不到完全的分離，流速過(guò)慢，整體分離的時(shí)間要延長(zhǎng)，因此在分離前首先要確定留宿。 液體環(huán)境：為了保持被分離物質(zhì)運(yùn)動(dòng)的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙內(nèi)部和外部液體環(huán)境的一致，所以進(jìn)行液體環(huán)境的平衡。4．以羧酸吸附蛋白質(zhì)為例，簡(jiǎn)要說(shuō)明離子交換樹(shù)脂的洗脫方法及其原理？答：加堿：主要是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)到達(dá)等電點(diǎn)，是蛋白質(zhì)帶電量減少，吸附力下降從而被洗脫下來(lái)。加酸：主要是抑制羧酸的電離，使活性基團(tuán)帶電量下降，吸附力下降從而蛋白質(zhì)被洗脫下來(lái)。加鹽：依照質(zhì)量作用定律，把蛋白質(zhì)洗脫下來(lái)。5．簡(jiǎn)述軟水和無(wú)鹽水的制備方法？答：①軟水的制備：利用鈉型磺酸樹(shù)脂除去水中的鈣離子和鎂離子等堿金屬后即可制得軟水。 ②無(wú)鹽水的制備：將原水通過(guò)氫型強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和羥型強(qiáng)堿或弱堿性陰離子交換樹(shù)脂的組合，經(jīng)過(guò)離子交換反應(yīng)，將水中所有的陰、陽(yáng)離子除去，從而制得純度很高的無(wú)鹽純水。6．在離子交換色譜操作中，怎樣選擇離子交換樹(shù)脂？答：對(duì)陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的選擇：正電荷選擇陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，負(fù)電荷選擇陰離子交換樹(shù)脂。對(duì)離子交換樹(shù)脂強(qiáng)弱的選擇：較強(qiáng)的酸性或堿性，選擇選用弱酸性或弱堿性樹(shù)脂。對(duì)離子交換樹(shù)脂離子型的選擇：根據(jù)分離的目的，弱酸或弱堿性樹(shù)脂不使用H或OH型。7．簡(jiǎn)述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象？答：當(dāng)中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時(shí)可能出現(xiàn)以下兩種情況：（1）“鹽溶”現(xiàn)象—低鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度增大（2）“鹽析”現(xiàn)象—高鹽濃度下，蛋白質(zhì)溶解度隨之下降，原因如下：（a）無(wú)機(jī)離子與蛋白質(zhì)表面電荷中和，形成離子對(duì)，部分中和了蛋白質(zhì)的電性，使蛋白質(zhì)分子之間的排斥力減弱，從而能夠相互靠攏；（b）中性鹽的親水性大，使蛋白質(zhì)脫去水化膜，疏水區(qū)暴露，由于疏水區(qū)的相互作用導(dǎo)致沉淀；？答: 利用溶質(zhì)與吸附劑之間的分子吸附力(范德華力，包括色散力、誘導(dǎo)力、定向力以及氫鍵)的差異而實(shí)現(xiàn)分離，為什么要使用多糖基離子交換劑？答:因?yàn)殡x子交換樹(shù)脂孔徑小,大分子蛋白質(zhì)難以進(jìn)入。同時(shí)，樹(shù)脂內(nèi)部主要為疏水性，對(duì)親水性的蛋白質(zhì)會(huì)產(chǎn)生影響。而多糖基離子交換劑沒(méi)有上述問(wèn)題。 ？答：滲透是由于存在化學(xué)勢(shì)存在梯度而引起的自發(fā)擴(kuò)散現(xiàn)象。因此，通常情況下，其結(jié)果是水從純水一側(cè)透過(guò)半透膜向溶液側(cè)滲透，使后者的液位抬高。如果在溶液一側(cè)施加壓力，外界力做功使溶液中水的化學(xué)勢(shì)升高，則純水通過(guò)膜的滲透就會(huì)逐漸減小，并最終停止（條件？），此時(shí)的壓力差就是溶液的滲透壓。當(dāng)時(shí)，水將從溶液一側(cè)向純水一側(cè)移動(dòng)，此種滲透稱之為反滲透。？答：（1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶）適用于溶解度隨溫度升高而增加的體系；同時(shí)，溶解度隨溫度變化的幅度要適中；（2）部分溶劑蒸發(fā)法（等溫結(jié)晶法）適用于溶解度隨溫度降低變化不大的體系，或隨溫度升高溶解度降低的體系；（3）真空蒸發(fā)冷卻法使溶劑在真空下迅速蒸發(fā)，并結(jié)合絕熱冷卻，是結(jié)合冷卻和部分溶劑蒸發(fā)兩種方法的一種結(jié)晶方法。（4）化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶加入反應(yīng)劑產(chǎn)生新物質(zhì)，當(dāng)該新物質(zhì)的溶解度超過(guò)飽和溶解度時(shí)，即有晶體析出；？答：物理處理：水洗、過(guò)篩，去雜，以獲得粒度均勻的樹(shù)脂顆粒；化學(xué)處理：轉(zhuǎn)型（氫型或鈉型）陽(yáng)離子樹(shù)脂 酸—堿—酸陰離子樹(shù)脂 堿—酸—堿最后以去離子水或緩沖液平衡？答:蛋白質(zhì)再等電點(diǎn)下的溶解度最低，根據(jù)這一性質(zhì)，再溶液中加入一定比例的有機(jī)溶劑，破壞蛋白質(zhì)表面的水化層和雙電層，降低分子間斥力，加強(qiáng)了蛋白質(zhì)分子間的疏水相互作用，使得蛋白質(zhì)分子得以聚集成團(tuán)沉淀下來(lái)。，并簡(jiǎn)述其分離原理？答：超臨界流體萃取是利用超臨界流體具有的類似氣體的擴(kuò)散系數(shù)，以及類似液體的密度（溶解能力強(qiáng)）的特點(diǎn)，利用超臨界流體為萃取劑進(jìn)行的萃取單元操作。其特點(diǎn)是安全、無(wú)毒、產(chǎn)品分離簡(jiǎn)單，但設(shè)備投資較大。？答：結(jié)晶過(guò)程包括過(guò)飽和溶液的形成、晶核的形成及晶體的生長(zhǎng)三個(gè)過(guò)程，其中溶液達(dá)到過(guò)飽和狀態(tài)是結(jié)晶的前提，過(guò)飽和度是結(jié)晶的推動(dòng)力。？答：凝膠排阻色譜的分離介質(zhì)（填料）具有均勻的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)，其分離原理是具有不同分子量的溶質(zhì)分子，在流經(jīng)柱床是，由于大分子難以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，而從凝膠顆粒之間流出，保留時(shí)間短；而小分子溶質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，由于凝膠多孔結(jié)構(gòu)的阻滯作用，流經(jīng)體積變大，保留時(shí)間延長(zhǎng)。這樣，分子量不同的溶質(zhì)分子得以分離。，有那些原因會(huì)造成膜污染，如何處理？答：（1）膜污染主要有兩種情況：一是附著層被濾餅、有機(jī)物凝膠、無(wú)機(jī)物水垢膠體物質(zhì)或微生物等吸附于表面；另一種是料液中溶質(zhì)結(jié)晶或沉淀造成堵塞。（3分）（2）膜污染是可以預(yù)防或減輕的，措施包括料液預(yù)處理、膜性質(zhì)的改善、操作條件改變等方式。（2分）（3）膜污染所引起的通量衰減往往是不可逆的，只能通過(guò)清洗的處理方式消除，包括物理方法沖洗和化學(xué)藥品溶液清洗等。（2分）？答:原理：溶質(zhì)在超臨界流體中的溶解度，與其密度有關(guān)，密度越大，溶解度越大。在臨界點(diǎn)附近，微小的壓力增加或溫度下降，則溶劑的密度大幅度增加，對(duì)溶質(zhì)的溶解度將大幅度增加，有利于溶質(zhì)的萃取。而在臨界點(diǎn)附近，微小的壓力下降或溫度上升，則溶劑的密度大幅度減少，對(duì)溶質(zhì)的溶解度將大幅減少，有利于溶質(zhì)的分離和溶劑的回收。優(yōu)點(diǎn)：無(wú)毒無(wú)腐蝕性，不可燃燒，價(jià)格低廉，傳質(zhì)好萃取快，臨界溫度和臨界壓力較低適合于熱敏生物制品，可獲萃取物或萃余物，簡(jiǎn)述親和免疫層析介質(zhì)的制備過(guò)程?答、免疫親和層析是利用親和技術(shù)和色譜分離集成產(chǎn)生的一種高效色譜分離技術(shù)，其分離原理是通過(guò)抗原抗體之間特異性的相互作用，從而實(shí)現(xiàn)高效的分離。層析介質(zhì)的制備過(guò)程包括：抗體的制備、抗體提取、載體活化，手臂鏈的連接、抗體的連接等步驟。，有何特點(diǎn)？答：親和吸附是吸附單元操作的一種，它是利用親和吸附劑與目標(biāo)物之間的特殊的化學(xué)作用實(shí)現(xiàn)的高效分離手段。親和吸附劑的組成包括：惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。 親和吸附的特點(diǎn)是高效、簡(jiǎn)便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和，但載體制備難度大，通用性差，成本較高。?答: 產(chǎn)品豐富：產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性絕大多數(shù)生物分離方法來(lái)源于化學(xué)分離生物分離一般比化工分離難度大（1）成分復(fù)雜（2）懸液中的目標(biāo)產(chǎn)物濃度低（3）生物活性，條件相對(duì)溫和（4）生物產(chǎn)品要求高質(zhì)量（5）獲得高純度的干燥產(chǎn)品（6）衛(wèi)生？答：凝聚和絮凝——在電介質(zhì)作用下，破壞溶質(zhì)膠體顆粒表面的雙電層，破壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，使膠體粒子聚集的過(guò)程。凝聚：簡(jiǎn)單電解質(zhì)降低膠體間的排斥力。從而范德華引力起主導(dǎo)作用，聚合成較大的膠粒，粒子的密度越大，越易分離。絮凝：指在某些高分子絮凝劑存在下，在懸浮粒子之間發(fā)生架橋作用而使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過(guò)程，反微團(tuán)萃取？其特點(diǎn)有哪些？答：膠束是表面活性劑在非極性有機(jī)溶劑中形成的一種聚集體當(dāng)表面活性劑濃度超過(guò)臨界微團(tuán)濃度時(shí)，表面活性劑會(huì)在水溶液中形成聚集體微團(tuán)和反微團(tuán)微團(tuán)：表面活性劑的極性頭朝外，疏水的尾部朝內(nèi)，中間形成非極性的“核”反微團(tuán)：表面活性劑的極性頭朝內(nèi)，疏水的尾部向外，中間形成極性的“核”反微團(tuán)的優(yōu)點(diǎn)（1）極性“水核”具有較強(qiáng)的溶解能力。（2）生物大分子由于具有較強(qiáng)的極性，可溶解于極性水核中，防止與外界有機(jī)溶劑接觸，減少變性作用。（3）由于“水核”的尺度效應(yīng)，可以穩(wěn)定蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)，增加其結(jié)構(gòu)的剛性，提高其反應(yīng)性能。因此，可作為酶固定化體系，用于水不溶性底物的生物催化？答：概念：在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機(jī)溶劑，降低溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。原理：（1）降低了溶質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)之間的靜電引力增加，從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，導(dǎo)致沉淀。（2）由于有機(jī)溶劑的水合作用，降低了自由水的濃度，降低了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度，降低了親水性，導(dǎo)致脫水凝聚。25. 膜分離技術(shù)的類型和定義？答：膜分離過(guò)程的實(shí)質(zhì)是物質(zhì)透過(guò)或被截留于膜的過(guò)程，近似于篩分過(guò)程，依據(jù)濾膜孔徑大小而達(dá)到物質(zhì)分離的目的，故而可以按分離粒子大小進(jìn)行分類：（1）微濾：以多孔細(xì)小薄膜為過(guò)濾介質(zhì)，壓力為推動(dòng)力，使不溶性物質(zhì)得以分離的操作，~14μm之間；（2）超濾：分離介質(zhì)同上，但孔徑更小，~ μm，分離推動(dòng)力仍為壓力差，適合于分離酶、蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì)；（3）反滲透：是一種以壓力差為推動(dòng)力，從溶液中分離出溶劑的膜分離操作，~ μm之間；（由于分離的溶劑分子往往很小，不能忽略滲透壓的作用，故而成為反滲透）；（4）納濾：以壓力差為推動(dòng)力，從溶液中分離300~1000小分子量的膜分離過(guò)程，孔徑分布在平均2nm；（5）電滲析：以電位差為推動(dòng)力，利用離子交換膜的選擇透過(guò)性，從溶液中脫除或富集電解質(zhì)的膜分離操作；26. 影響液一固分離的因素？（一）微生物種類的影響一般真菌的菌絲比較粗大，液一固分離容易，含真菌菌體及絮凝蛋白質(zhì)的發(fā)酵液，可采用鼓式真空過(guò)濾或板框過(guò)濾。對(duì)于酵母菌體，離心分離的方法具有較好的效果。但是細(xì)菌或細(xì)胞碎片相當(dāng)細(xì)小，液一固分離十分困難，用一般的離心分離或過(guò)濾方法效果很差，因此應(yīng)先用預(yù)處理的各種手段來(lái)增大粒子，才能獲得澄清的濾液。（二）發(fā)酵液的黏度液一固分離的速度通常與黏度成反比。影響發(fā)酵液黏度的因素很多：（1）菌體種類和濃度不同，其黏度有很大差別。（2）不同的培養(yǎng)基組分和用量也會(huì)影響?zhàn)ざ?，如用黃豆餅粉、花生餅粉作氮源，用淀粉作碳源會(huì)使黏度增大。發(fā)酵液中未用完的培養(yǎng)基較多或發(fā)酵后期用油作消沫劑也會(huì)使過(guò)濾困難。27. 影響有機(jī)溶劑萃取分離的因素？影響液一液萃取的因素主要有目的物在兩相的分配比（分配系數(shù)K）和有機(jī)溶劑的用量等。分配系數(shù)K值增大，提取效率也增大，萃取就易于進(jìn)行完全。當(dāng)K值較小時(shí)，可以適當(dāng)增加有機(jī)溶劑用量來(lái)提高萃取率，但有機(jī)溶劑用量增加會(huì)增加后處理的工作量，因此在實(shí)際工作中，常常采取分次加入溶劑，連續(xù)多次提取來(lái)提高萃取率。28. 鹽析的原理及影響因素？親水性大于蛋白質(zhì)破壞水化層帶電離子中和蛋白質(zhì)表面電荷影響因素：（1）鹽離子濃度（2）生物分子種類（3）生物分子濃度（4） pH值（五）溫度29. 影響有機(jī)溶劑沉析的因素？（1）溫度（2）生物樣品的濃度（3）pH（4）離子強(qiáng)度（5）金屬離子30. 等電點(diǎn)沉析注意事項(xiàng)？（1）等電點(diǎn)的改變（2）目的物的穩(wěn)定性（3） 鹽溶作用（4）pH的調(diào)節(jié)31. 微孔膜過(guò)濾技術(shù)的應(yīng)用？（一）在生物化學(xué)中的應(yīng)用絕對(duì)過(guò)濾收集沉淀（1）溶液的澄清（2）酶活力測(cè)定結(jié)合測(cè)定（1）蛋白質(zhì)DNA絡(luò)合物的測(cè)定及純化受體的測(cè)定（2）mRNA的測(cè)定及純化（3）環(huán)狀DNA的純化其它應(yīng)用（1）蛋白質(zhì)含量測(cè)定（2）核酸的測(cè)定（3）放射性標(biāo)記物的超凈（二）在制藥工業(yè)中的應(yīng)用1．藥液中微粒及細(xì)菌的濾除2．抗生素的無(wú)菌檢驗(yàn)32. 何時(shí)應(yīng)用靜態(tài)離子交換分離法？ 一般只是在試探性實(shí)驗(yàn)、測(cè)定交換平衡常數(shù)、某些交換動(dòng)力學(xué)的研究、交換分配系數(shù)的測(cè)定、絡(luò)合物離解常數(shù)的測(cè)定、滴定曲線的研究、某些催化反應(yīng)的試探性研究、除去鹽溶液中過(guò)剩的酸和堿、吸附溶液中所含的高分子量物質(zhì)等方面可能用到。此外還用于不適合用柱進(jìn)行操作的離子交換分離，如溶液粘度太大、含有懸浮固體及在反應(yīng)時(shí)放出氣體會(huì)造成溝流或堵塞管柱；或者是含有碳酸鹽、亞硫酸鹽、硫化物的溶液與氫型陽(yáng)離子柱交換時(shí)；以及某些交換速度較慢、交換要求在一步完成的等條件下，還是可以采用的。33. 交換容量及其影響因素？交換容量是指離子交換劑能提供交換離子的量，它反映離子交換劑與溶液中離子進(jìn)行交換的能力。通常所說(shuō)的離子交換劑的交換容量是指離子交換劑所能提供交換離子的總量，又稱為總交換容量，它只和離子交換劑本身的性質(zhì)有關(guān)。影響交換容量的因素很多，主要可以分為兩個(gè)方面，一方面是離子交換劑顆粒大小、顆粒內(nèi)孔隙大小以及所分離的樣品組分的大小等影響。另一些影響因素如實(shí)驗(yàn)中的離子強(qiáng)度、pH值等主要影響樣品中組分和離子交換劑的帶電性質(zhì)。35. 疏水柱層析分離原理？親水性蛋白質(zhì)（酶）表面均含有一定量的疏水性基團(tuán)。盡管在水溶液中蛋白質(zhì)（酶）具有將疏水性基團(tuán)折疊在分子內(nèi)部而表面顯露極性和荷電基團(tuán)的趨勢(shì)，但總會(huì)有一些疏水性基團(tuán)或極性基團(tuán)的疏水部位暴露在蛋白質(zhì)（酶）表面。這部分疏水基團(tuán)可與親水性固定相表面偶聯(lián)的短鏈烷基、苯基等弱疏水基會(huì)發(fā)生疏水性相互作用，被固定相（疏水性吸附劑）所吸附。36. 氣相色譜的條件選擇？固定相的選擇載氣流速的選擇柱溫的選擇進(jìn)樣量與進(jìn)樣時(shí)間的影響色譜柱形、柱內(nèi)徑及柱長(zhǎng)的選擇37. 影響電泳分離的主要因素？大分子的性質(zhì)電場(chǎng)強(qiáng)度溶液的pH 溶液的離子強(qiáng)度 電滲溫度支持物的影響38. 提高晶體質(zhì)量的方法有哪些？（1）晶體大