【正文】 步化包括：有絲分裂選擇法：M期細(xì)胞與培養(yǎng)皿的附著性低，振蕩脫離器壁收集優(yōu)點(diǎn)：同步化程度高，細(xì)胞不受藥物侵害。缺點(diǎn)：得到的細(xì)胞數(shù)量少。密度梯度離心法：有些種類的細(xì)胞，如裂殖酵母，不同時(shí)期的細(xì)胞在體積和重量上差別顯著，可以采用密度梯度離心方法分離出處于不同時(shí)期的細(xì)胞。優(yōu)點(diǎn):方法簡(jiǎn)單省時(shí)，效率高，成本低。缺點(diǎn):對(duì)大多數(shù)種類的細(xì)胞并不適用。⑵、誘導(dǎo)同步化包括：⑴DNA合成阻斷法：采用低毒或無毒的DNA合成抑制劑特異地抑制DNA合成，而不影響處于其它時(shí)期的細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期運(yùn)轉(zhuǎn)，從而將被抑制的細(xì)胞抑制在DNA合成期的實(shí)驗(yàn)方法。優(yōu)點(diǎn)：同步化效率高，幾乎適合于所有體外培養(yǎng)的細(xì)胞體系。缺點(diǎn)：誘導(dǎo)過程可造成細(xì)胞非均衡生長(zhǎng).⑵中期阻斷法：秋水仙素可抑制微管的聚合, 因而抑制有絲分裂器的形成, 將細(xì)胞阻斷在有絲分裂的中期， 適當(dāng)時(shí)間后解除秋水仙素的作用，即獲得處于中期的同步化的細(xì)胞。這一方法稱為中期阻斷法。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，效率高；缺點(diǎn)：藥物毒性作用較大。細(xì)胞周期中有哪些主要檢驗(yàn)點(diǎn)？細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)的生理作用是什么？答案要點(diǎn)：細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)主要有：R點(diǎn)，G1/S，G2/M，中期/后期，即：G1期中的R點(diǎn)或限制點(diǎn)，S期的DNA損傷檢驗(yàn)點(diǎn)、DNA復(fù)制檢驗(yàn)點(diǎn)，G2/M檢驗(yàn)點(diǎn)，M中期至M后期又稱紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)等。通過細(xì)胞周期檢驗(yàn)點(diǎn)的調(diào)控使細(xì)胞周期能正常動(dòng)轉(zhuǎn)，從而保證了遺傳物質(zhì)能精確地均等分配，產(chǎn)生具有正常遺傳性能和生理功能的子代細(xì)胞，如果上述檢驗(yàn)點(diǎn)調(diào)控作用丟失，就會(huì)導(dǎo)致基因突變、重排，使細(xì)胞遺傳性能紊亂，增殖、分化異常，細(xì)胞癌變甚至死亡。簡(jiǎn)要說明CDK激酶在細(xì)胞周期中是如何執(zhí)行調(diào)節(jié)功能的。答案要點(diǎn)：周期蛋白依賴性激酶（CDK）是與細(xì)胞周期進(jìn)程相對(duì)應(yīng)的一套Ser/Thr激酶系統(tǒng)。各種CDK沿細(xì)胞周期時(shí)相交替活化，磷酸化相應(yīng)底物，使細(xì)胞周期事件有條不紊地進(jìn)行下去。CDK1激酶通過使某些蛋白質(zhì)磷酸化，改變其下游的某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和啟動(dòng)其功能，實(shí)現(xiàn)其調(diào)控細(xì)胞周期的目的。CDK1激酶催化底物磷酸化有一定的位點(diǎn)特異性。它一般選擇底物中某個(gè)特定序列中的某個(gè)絲氨酸或蘇氨酸殘基。CDK1激酶可以使許多蛋白質(zhì)磷酸化，其中包括組蛋白H1，核纖層蛋白A、B、C，核仁蛋白等；組蛋白H1磷酸化，促進(jìn)染色體凝集；核纖層蛋白磷酸化，促使核纖層解聚；核仁蛋白磷酸化，促使核仁解體等。第十三章：怎樣理解動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞的增值、存活和死亡的相互關(guān)系，對(duì)動(dòng)物體的生存有何意義？ 動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞是在相互作用的情況下，進(jìn)行增殖、存活和死亡。細(xì)胞增殖需要有其他細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子的刺激，激活細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳遞途徑，解除細(xì)胞周期的制動(dòng)機(jī)制。但是，所有體細(xì)胞存在著一種機(jī)制不清的最大分裂次數(shù)。另外，細(xì)胞內(nèi)尚存在著一種自殺程序，此程序一旦激活，細(xì)胞就要自殺身亡，這一程序稱為程序性細(xì)胞死亡或細(xì)胞凋亡。程序性細(xì)胞死亡有細(xì)胞外死亡信號(hào)的誘發(fā)，激活了細(xì)胞內(nèi)的自殺程序。程序性細(xì)胞死亡依賴于一個(gè)蛋白質(zhì)水解酶家族，這些蛋白酶通過蛋白質(zhì)水解級(jí)聯(lián)反應(yīng)自我激活或切割激活。其中切冬酶(caspases)家族發(fā)揮了重要作用。在細(xì)胞凋亡過程中，線粒體起著關(guān)鍵性的作用，線粒體釋放出AIF和細(xì)胞色素c，導(dǎo)致死亡程序的下游變化，引起核凋亡。細(xì)胞程序性死亡是動(dòng)物體生長(zhǎng)發(fā)育和存活所必須的反應(yīng)體系，這一體系一旦遭受破壞，動(dòng)物體的生存就要受到威脅。 程序性細(xì)胞死亡是怎樣發(fā)生的？它都涉及到那些變化？ 1) 體內(nèi)健康細(xì)胞在特定的細(xì)胞外信號(hào)的誘導(dǎo)下，其死亡途徑被激活，于是在有關(guān)基因的調(diào)控下發(fā)生死亡，細(xì)胞的這種死亡方式稱為程序化細(xì)胞死亡(programmed cell death)。 2) 細(xì)胞發(fā)出的, 死亡信號(hào)激活了細(xì)胞表面的死亡受體之后，即激活了細(xì)胞內(nèi)與程序性死亡有關(guān)的蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)，從而將細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)變成了細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞。細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞涉及到一個(gè)蛋白酶家族，這些酶以酶原的形式存在，受到信號(hào)作用后，通過自我切割而被激活。激活的自殺性蛋白酶又可激活家族中的其它成員，引起蛋白質(zhì)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致反應(yīng)得以放大（圖17－87）。最后，被激活的蛋白酶切割了細(xì)胞中的具有關(guān)鍵性作用的蛋白質(zhì)，從而快速利落地引起細(xì)胞死亡。 細(xì)胞凋亡的主要特征: (1) 細(xì)胞質(zhì)凝縮，細(xì)胞萎縮，細(xì)胞骨架解體，核纖層分解，核被膜破裂； (2) 核DNA分解成片段，出現(xiàn)梯形電泳圖； (3) 通過出芽的方式分解成一些小泡，即凋亡小體(apoptotic bodies)；簡(jiǎn)述細(xì)胞衰老的基本特征。答案要點(diǎn)：⑴細(xì)胞膜的變化：衰老細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，使膜的流動(dòng)性減弱。細(xì)胞膜選擇透過性能力降低，細(xì)胞膜上的受體分子減少，細(xì)胞質(zhì)膜受損傷后不易修復(fù)。⑵線粒體的變化線粒體的變化在細(xì)胞衰老過程中是很重要的，細(xì)胞衰老時(shí)，一方面線粒體數(shù)目減少，另一方面線粒體的結(jié)構(gòu)也發(fā)生變化，其內(nèi)膜形成的嵴呈萎縮狀。在低氧或缺氧的條件下，衰老細(xì)胞的線粒體更早地出現(xiàn)腫脹，接著出現(xiàn)空泡，最終線粒體破裂崩解。⑶內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的變化細(xì)胞衰老過程中，糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的量減少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜電子密度增高，膜結(jié)構(gòu)變厚；此外內(nèi)質(zhì)網(wǎng)排列不規(guī)則，或出現(xiàn)腫脹和空泡。⑷細(xì)胞核的變化核增大；核膜內(nèi)折；染色質(zhì)固縮化。細(xì)胞核結(jié)構(gòu)的衰老變化中最明顯的是核膜的內(nèi)折凹陷，而且細(xì)胞衰老程度越高內(nèi)折越明顯，核的整個(gè)體積變大，核中染色質(zhì)凝聚、破碎，甚至出現(xiàn)異常多倍體。⑸致密體的生成致密體是衰老細(xì)胞中常見的一種結(jié)構(gòu)，絕大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在衰老時(shí)都會(huì)有致密體的積累。此外，細(xì)胞衰老時(shí)，細(xì)胞間間隙連接及膜內(nèi)顆粒的分布也發(fā)生變化。間隙連接在細(xì)胞間離子和小分子代謝物的交換上起著重要的作用。衰老時(shí)間隙連接的減少，使細(xì)胞間代謝協(xié)作減少了。十四章：簡(jiǎn)述細(xì)胞分化的基本機(jī)制。答案要點(diǎn)：通過組合調(diào)控的方式啟動(dòng)組織特異性基因的表達(dá)是細(xì)胞分化的基本機(jī)制。細(xì)胞分化的機(jī)制極其復(fù)雜，細(xì)胞的分化命運(yùn)取決于兩個(gè)方面：一是細(xì)胞的內(nèi)部特性；二是細(xì)胞的外部環(huán)境。前者與細(xì)胞的不對(duì)稱分裂以及隨機(jī)狀態(tài)有關(guān)，尤其是不對(duì)稱分裂使細(xì)胞內(nèi)部得到不同的基因調(diào)控成分，表現(xiàn)出一種不同于其他細(xì)胞的核質(zhì)關(guān)系和應(yīng)答信號(hào)的能力；后者表現(xiàn)為細(xì)胞應(yīng)答不同的環(huán)境信號(hào)，啟動(dòng)特殊的基因表達(dá)，產(chǎn)生不同的細(xì)胞的行為，如分裂、生長(zhǎng)、遷移、粘附、凋亡等，這些行為在形態(tài)發(fā)生中具有極其重要的作用。簡(jiǎn)述癌細(xì)胞的基本特征。答案要點(diǎn)：㈠基本生物學(xué)特征細(xì)胞生長(zhǎng)與分裂失去控制，具有無限增殖能力，成為“永生”的細(xì)胞。具有浸潤性和擴(kuò)散性。細(xì)胞間相互作用改變。蛋白表達(dá)譜系或蛋白活性改變。mRNA轉(zhuǎn)錄譜系的改變。染色體的非整倍性變化。㈡體外培養(yǎng)的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞的特征具有無限增殖的能力；貼壁性下降；失去接觸抑制；對(duì)生長(zhǎng)因子的需求降低；致瘤性。說明癌癥的發(fā)生與癌基因和抑癌基因的關(guān)系。癌癥是由攜帶遺傳信息的DNA的病理變化而引起的疾病。癌基因是控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的正常基因的一種突變形式，能引起正常細(xì)胞癌變。抑癌基因?qū)嶋H上是正常細(xì)胞增殖過程中的負(fù)調(diào)控因子，它編碼的蛋白質(zhì)往往在細(xì)胞周期的檢驗(yàn)點(diǎn)上起周期過程的作用。如果抑癌基因突變，更新喪失其細(xì)胞增殖的負(fù)調(diào)控作用，則導(dǎo)致細(xì)胞周期失控而過度增殖，當(dāng)抑癌基因的一個(gè)拷貝的原癌基因突變成癌基因，就會(huì)致癌。因此，癌癥的發(fā)生是細(xì)胞周期增殖失控而導(dǎo)致，癌基因與抑癌基因協(xié)同作用，保證細(xì)胞增殖正常進(jìn)行，正常基因突變成癌基因，或抑癌基因突變都能引起正常細(xì)胞癌變。何謂細(xì)胞的分化？為什么說細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果？細(xì)胞分化是胚胎細(xì)胞分裂后，未定形的細(xì)胞，在形態(tài)和生化組成上向?qū)Ｒ恍曰蛱禺愋苑较虬l(fā)展，或由原來較簡(jiǎn)單具有可塑性的狀態(tài)向異樣化穩(wěn)定發(fā)展的過程。也就是說細(xì)胞分化是指同一來源的細(xì)胞逐漸產(chǎn)生各自特有的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理功能和生化特征的過程。其結(jié)果是在空間上，細(xì)胞之間出現(xiàn)差異，在時(shí)間上同一細(xì)胞和它以前的狀態(tài)有所不同，從本質(zhì)上講，細(xì)胞分化是從化學(xué)分化到形態(tài)、功能分化的過程。細(xì)胞分化問題實(shí)質(zhì)上就是發(fā)育過程中特異蛋白質(zhì)的合成問題，而一種新的特異蛋白質(zhì)的合成都需要與它的氨基酸序列相符合的遺傳密碼，而遺傳密碼需要基因提供，即需要特定的基因。不同類型的細(xì)胞在發(fā)育過程中表達(dá)一套特異的基因。因此細(xì)胞分化歸根結(jié)底在于特定基因的表達(dá)，所以說細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。細(xì)胞凋亡的概念、形態(tài)特征及其與壞死的區(qū)別是什么細(xì)胞凋亡是細(xì)胞內(nèi)死亡程序活化而致的細(xì)胞自殺，大多發(fā)生在生理情況下，某些病理性刺激也可誘發(fā)。形態(tài)特征：細(xì)胞變圓，與鄰近的細(xì)胞脫離，細(xì)胞核及胞質(zhì)濃縮，DNA在核小體連接區(qū)被降解為180－200bp的片段，核膜破裂，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，胞膜內(nèi)陷將細(xì)胞內(nèi)容物包被成一些囊狀小泡后，形成凋亡小體被周圍細(xì)胞吞噬，無細(xì)胞內(nèi)容物外泄，不引起炎癥反應(yīng)。與壞死的區(qū)別：壞死通常指各種致病因子干擾和中斷了細(xì)胞正常代謝活動(dòng)而造成的細(xì)胞意外死亡，壞死細(xì)胞細(xì)胞器功能下降，膜通航性升高，核最后溶解、消失，膜完整性遭破壞，細(xì)胞內(nèi)容物舉出，引起炎癥反應(yīng)，壞死細(xì)胞多不能單個(gè)存在，而是成片形成壞死組織，并常被瘢痕組織修復(fù)，填充，而凋亡的形態(tài)改變主要在細(xì)胞核，染色質(zhì)密集，核小體間連接區(qū)被酶切造成DNA鏈斷裂。形成碎片，染色質(zhì)片段，細(xì)胞器和胞質(zhì)成分細(xì)胞膜包裹而成凋亡小體。十五章：細(xì)胞連接都有哪些類型？各有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？ 細(xì)胞連接按其功能分為：緊密連接，錨定連接，通訊連接。1) 緊密連接（封閉連接），細(xì)胞質(zhì)膜上，緊密連接蛋白(門蛋白)形成分支的鏈索條，與相鄰的細(xì)胞質(zhì)膜上的鏈索條對(duì)應(yīng)結(jié)合，將細(xì)胞間隙封閉。 2) 錨定連接：通過中間纖維（橋粒、半橋粒）或微絲（粘著帶和粘著斑）將相鄰細(xì)胞或細(xì)胞與基質(zhì)連接在一起，以形成堅(jiān)挺有序的細(xì)胞群體、組織與器官。3) 通訊連接：包括間隙連接和化學(xué)突觸，是通過在細(xì)胞之間的代謝偶聯(lián)、信號(hào)傳導(dǎo)等過程中起重要作用的連接方式。4) 胞間連絲連接：是高等植物細(xì)胞之間通過胞間連絲來進(jìn)行物質(zhì)交換與互相聯(lián)系的連接方式。動(dòng)物細(xì)胞連接主要有哪幾種類型，各有何功能？答案要點(diǎn)：細(xì)胞連接的類型：㈠封閉連接或閉鎖連接：緊密連接；㈡錨定連接：與中間纖維相關(guān)的錨定連接：橋粒和半橋粒；與肌動(dòng)蛋白纖維相關(guān)的錨定連接：粘合帶和粘合斑；㈢通訊連接：間隙連接。緊密連接是封閉連接的主要形式，普遍存在于脊椎動(dòng)物體表及體內(nèi)各種腔道和腺體上皮細(xì)胞之間。是指相鄰細(xì)胞質(zhì)膜直接緊密地連接在一起，能阻止溶液中的分子特別是大分子沿著細(xì)胞間的縫隙滲入體內(nèi)，維持細(xì)胞一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。緊密連接具有：形成滲漏屏障，起重要的封閉作用；隔離作用，使游離端與基底面質(zhì)膜上的膜蛋白行使各自不同的膜功能；支持功能。橋粒：又稱點(diǎn)狀橋粒，位于粘合帶下方。是細(xì)胞間形成的鈕扣式的連接結(jié)構(gòu)，跨膜蛋白（鈣粘素）通過附著蛋白（致密斑）與中間纖維相聯(lián)系，提供細(xì)胞內(nèi)中間纖維的錨定位點(diǎn)。中間纖維橫貫細(xì)胞，形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，同時(shí)還通過橋粒與相鄰細(xì)胞連成一體，形成整體網(wǎng)絡(luò)，起支持和抵抗外界壓力與張力的作用。半橋粒相當(dāng)于半個(gè)橋粒，但其功能和化學(xué)組成與橋粒不同。它通過細(xì)胞質(zhì)膜上的膜蛋白整合素將上皮細(xì)胞錨定在基底膜上, 在半橋粒中，中間纖維不是穿過而是終止于半橋粒的致密斑內(nèi)。存在于上皮組織基底層細(xì)胞靠近基底膜處，防止機(jī)械力造成細(xì)胞與基膜脫離。粘合帶：又稱帶狀橋粒，位于緊密連接下方，相鄰細(xì)胞間形成一個(gè)連續(xù)的帶狀連接結(jié)構(gòu)，跨膜蛋白通過微絲束間接將組織連接在一起，提高組織的機(jī)械張力。粘合斑：細(xì)胞通過肌動(dòng)蛋白纖維和整聯(lián)蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)之間的連接方式，微絲束通過附著蛋白錨定在連接部位的跨膜蛋白上。存在于某些細(xì)胞的基底，呈局限性斑狀。其形成對(duì)細(xì)胞遷移是不可缺少的。體外培養(yǎng)的細(xì)胞常通過粘著斑粘附于培養(yǎng)皿上。間隙連接：是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接，是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的連接結(jié)構(gòu)，允許無機(jī)離子及水溶性小分子物質(zhì)從中通過，從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。間隙連接在代謝偶聯(lián)中的作用：使代謝物（如氨基酸、葡萄糖、核苷酸、維生素等）及第二信使（cAMP、Ca2+等）直接在細(xì)胞之間流通。間隙連接在神經(jīng)沖動(dòng)信息傳遞過程中的作用：在由具有電興奮性的細(xì)胞構(gòu)成的組織中，通過間隙連接建立的電偶聯(lián)對(duì)其功能的協(xié)調(diào)一致具有重要作用。間隙連接在早期胚胎發(fā)育和細(xì)胞分化過程中具有重要；間隙連接對(duì)細(xì)胞增殖的控制也有一定作用。20 / 20