【正文】 步化包括：有絲分裂選擇法：M期細胞與培養(yǎng)皿的附著性低，振蕩脫離器壁收集優(yōu)點：同步化程度高，細胞不受藥物侵害。缺點：得到的細胞數(shù)量少。密度梯度離心法：有些種類的細胞，如裂殖酵母，不同時期的細胞在體積和重量上差別顯著，可以采用密度梯度離心方法分離出處于不同時期的細胞。優(yōu)點:方法簡單省時，效率高，成本低。缺點:對大多數(shù)種類的細胞并不適用。⑵、誘導同步化包括：⑴DNA合成阻斷法：采用低毒或無毒的DNA合成抑制劑特異地抑制DNA合成，而不影響處于其它時期的細胞進行細胞周期運轉，從而將被抑制的細胞抑制在DNA合成期的實驗方法。優(yōu)點：同步化效率高，幾乎適合于所有體外培養(yǎng)的細胞體系。缺點：誘導過程可造成細胞非均衡生長.⑵中期阻斷法：秋水仙素可抑制微管的聚合, 因而抑制有絲分裂器的形成, 將細胞阻斷在有絲分裂的中期， 適當時間后解除秋水仙素的作用，即獲得處于中期的同步化的細胞。這一方法稱為中期阻斷法。優(yōu)點：操作簡便，效率高；缺點：藥物毒性作用較大。細胞周期中有哪些主要檢驗點？細胞周期檢驗點的生理作用是什么？答案要點：細胞周期檢驗點主要有：R點，G1/S，G2/M，中期/后期，即：G1期中的R點或限制點，S期的DNA損傷檢驗點、DNA復制檢驗點，G2/M檢驗點，M中期至M后期又稱紡錘體組裝檢驗點等。通過細胞周期檢驗點的調(diào)控使細胞周期能正常動轉，從而保證了遺傳物質能精確地均等分配，產(chǎn)生具有正常遺傳性能和生理功能的子代細胞，如果上述檢驗點調(diào)控作用丟失，就會導致基因突變、重排，使細胞遺傳性能紊亂，增殖、分化異常，細胞癌變甚至死亡。簡要說明CDK激酶在細胞周期中是如何執(zhí)行調(diào)節(jié)功能的。答案要點：周期蛋白依賴性激酶（CDK）是與細胞周期進程相對應的一套Ser/Thr激酶系統(tǒng)。各種CDK沿細胞周期時相交替活化，磷酸化相應底物，使細胞周期事件有條不紊地進行下去。CDK1激酶通過使某些蛋白質磷酸化，改變其下游的某些蛋白質的結構和啟動其功能，實現(xiàn)其調(diào)控細胞周期的目的。CDK1激酶催化底物磷酸化有一定的位點特異性。它一般選擇底物中某個特定序列中的某個絲氨酸或蘇氨酸殘基。CDK1激酶可以使許多蛋白質磷酸化，其中包括組蛋白H1，核纖層蛋白A、B、C，核仁蛋白等；組蛋白H1磷酸化，促進染色體凝集；核纖層蛋白磷酸化，促使核纖層解聚；核仁蛋白磷酸化，促使核仁解體等。第十三章：怎樣理解動物體內(nèi)細胞的增值、存活和死亡的相互關系，對動物體的生存有何意義？ 動物體內(nèi)細胞是在相互作用的情況下，進行增殖、存活和死亡。細胞增殖需要有其他細胞分泌的生長因子的刺激，激活細胞內(nèi)的信號傳遞途徑，解除細胞周期的制動機制。但是，所有體細胞存在著一種機制不清的最大分裂次數(shù)。另外，細胞內(nèi)尚存在著一種自殺程序，此程序一旦激活，細胞就要自殺身亡，這一程序稱為程序性細胞死亡或細胞凋亡。程序性細胞死亡有細胞外死亡信號的誘發(fā)，激活了細胞內(nèi)的自殺程序。程序性細胞死亡依賴于一個蛋白質水解酶家族，這些蛋白酶通過蛋白質水解級聯(lián)反應自我激活或切割激活。其中切冬酶(caspases)家族發(fā)揮了重要作用。在細胞凋亡過程中，線粒體起著關鍵性的作用，線粒體釋放出AIF和細胞色素c，導致死亡程序的下游變化，引起核凋亡。細胞程序性死亡是動物體生長發(fā)育和存活所必須的反應體系，這一體系一旦遭受破壞，動物體的生存就要受到威脅。 程序性細胞死亡是怎樣發(fā)生的？它都涉及到那些變化？ 1) 體內(nèi)健康細胞在特定的細胞外信號的誘導下，其死亡途徑被激活，于是在有關基因的調(diào)控下發(fā)生死亡，細胞的這種死亡方式稱為程序化細胞死亡(programmed cell death)。 2) 細胞發(fā)出的, 死亡信號激活了細胞表面的死亡受體之后，即激活了細胞內(nèi)與程序性死亡有關的蛋白酶級聯(lián)反應系統(tǒng)，從而將細胞外信號轉變成了細胞內(nèi)信號傳遞。細胞內(nèi)信號傳遞涉及到一個蛋白酶家族，這些酶以酶原的形式存在，受到信號作用后，通過自我切割而被激活。激活的自殺性蛋白酶又可激活家族中的其它成員，引起蛋白質級聯(lián)反應，導致反應得以放大（圖17－87）。最后，被激活的蛋白酶切割了細胞中的具有關鍵性作用的蛋白質，從而快速利落地引起細胞死亡。 細胞凋亡的主要特征: (1) 細胞質凝縮，細胞萎縮，細胞骨架解體，核纖層分解，核被膜破裂； (2) 核DNA分解成片段，出現(xiàn)梯形電泳圖； (3) 通過出芽的方式分解成一些小泡，即凋亡小體(apoptotic bodies)；簡述細胞衰老的基本特征。答案要點：⑴細胞膜的變化：衰老細胞的細胞膜結構發(fā)生變化，使膜的流動性減弱。細胞膜選擇透過性能力降低，細胞膜上的受體分子減少，細胞質膜受損傷后不易修復。⑵線粒體的變化線粒體的變化在細胞衰老過程中是很重要的，細胞衰老時，一方面線粒體數(shù)目減少，另一方面線粒體的結構也發(fā)生變化，其內(nèi)膜形成的嵴呈萎縮狀。在低氧或缺氧的條件下，衰老細胞的線粒體更早地出現(xiàn)腫脹，接著出現(xiàn)空泡，最終線粒體破裂崩解。⑶內(nèi)質網(wǎng)的變化細胞衰老過程中，糙面內(nèi)質網(wǎng)的量減少，內(nèi)質網(wǎng)膜電子密度增高，膜結構變厚；此外內(nèi)質網(wǎng)排列不規(guī)則，或出現(xiàn)腫脹和空泡。⑷細胞核的變化核增大；核膜內(nèi)折；染色質固縮化。細胞核結構的衰老變化中最明顯的是核膜的內(nèi)折凹陷，而且細胞衰老程度越高內(nèi)折越明顯，核的整個體積變大，核中染色質凝聚、破碎，甚至出現(xiàn)異常多倍體。⑸致密體的生成致密體是衰老細胞中常見的一種結構，絕大多數(shù)動物細胞在衰老時都會有致密體的積累。此外，細胞衰老時，細胞間間隙連接及膜內(nèi)顆粒的分布也發(fā)生變化。間隙連接在細胞間離子和小分子代謝物的交換上起著重要的作用。衰老時間隙連接的減少，使細胞間代謝協(xié)作減少了。十四章：簡述細胞分化的基本機制。答案要點：通過組合調(diào)控的方式啟動組織特異性基因的表達是細胞分化的基本機制。細胞分化的機制極其復雜，細胞的分化命運取決于兩個方面：一是細胞的內(nèi)部特性；二是細胞的外部環(huán)境。前者與細胞的不對稱分裂以及隨機狀態(tài)有關，尤其是不對稱分裂使細胞內(nèi)部得到不同的基因調(diào)控成分，表現(xiàn)出一種不同于其他細胞的核質關系和應答信號的能力；后者表現(xiàn)為細胞應答不同的環(huán)境信號，啟動特殊的基因表達，產(chǎn)生不同的細胞的行為，如分裂、生長、遷移、粘附、凋亡等，這些行為在形態(tài)發(fā)生中具有極其重要的作用。簡述癌細胞的基本特征。答案要點：㈠基本生物學特征細胞生長與分裂失去控制，具有無限增殖能力，成為“永生”的細胞。具有浸潤性和擴散性。細胞間相互作用改變。蛋白表達譜系或蛋白活性改變。mRNA轉錄譜系的改變。染色體的非整倍性變化。㈡體外培養(yǎng)的惡性轉化細胞的特征具有無限增殖的能力；貼壁性下降；失去接觸抑制；對生長因子的需求降低；致瘤性。說明癌癥的發(fā)生與癌基因和抑癌基因的關系。癌癥是由攜帶遺傳信息的DNA的病理變化而引起的疾病。癌基因是控制細胞生長和分裂的正常基因的一種突變形式，能引起正常細胞癌變。抑癌基因實際上是正常細胞增殖過程中的負調(diào)控因子，它編碼的蛋白質往往在細胞周期的檢驗點上起周期過程的作用。如果抑癌基因突變，更新喪失其細胞增殖的負調(diào)控作用，則導致細胞周期失控而過度增殖，當抑癌基因的一個拷貝的原癌基因突變成癌基因，就會致癌。因此，癌癥的發(fā)生是細胞周期增殖失控而導致，癌基因與抑癌基因協(xié)同作用，保證細胞增殖正常進行，正?；蛲蛔兂砂┗?，或抑癌基因突變都能引起正常細胞癌變。何謂細胞的分化？為什么說細胞分化是基因選擇性表達的結果？細胞分化是胚胎細胞分裂后，未定形的細胞，在形態(tài)和生化組成上向專一性或特異性方向發(fā)展，或由原來較簡單具有可塑性的狀態(tài)向異樣化穩(wěn)定發(fā)展的過程。也就是說細胞分化是指同一來源的細胞逐漸產(chǎn)生各自特有的形態(tài)結構、生理功能和生化特征的過程。其結果是在空間上，細胞之間出現(xiàn)差異，在時間上同一細胞和它以前的狀態(tài)有所不同，從本質上講，細胞分化是從化學分化到形態(tài)、功能分化的過程。細胞分化問題實質上就是發(fā)育過程中特異蛋白質的合成問題，而一種新的特異蛋白質的合成都需要與它的氨基酸序列相符合的遺傳密碼，而遺傳密碼需要基因提供，即需要特定的基因。不同類型的細胞在發(fā)育過程中表達一套特異的基因。因此細胞分化歸根結底在于特定基因的表達，所以說細胞分化是基因選擇性表達的結果。細胞凋亡的概念、形態(tài)特征及其與壞死的區(qū)別是什么細胞凋亡是細胞內(nèi)死亡程序活化而致的細胞自殺，大多發(fā)生在生理情況下，某些病理性刺激也可誘發(fā)。形態(tài)特征：細胞變圓，與鄰近的細胞脫離，細胞核及胞質濃縮，DNA在核小體連接區(qū)被降解為180－200bp的片段，核膜破裂，內(nèi)質網(wǎng)擴張，胞膜內(nèi)陷將細胞內(nèi)容物包被成一些囊狀小泡后，形成凋亡小體被周圍細胞吞噬，無細胞內(nèi)容物外泄，不引起炎癥反應。與壞死的區(qū)別：壞死通常指各種致病因子干擾和中斷了細胞正常代謝活動而造成的細胞意外死亡，壞死細胞細胞器功能下降，膜通航性升高，核最后溶解、消失，膜完整性遭破壞，細胞內(nèi)容物舉出，引起炎癥反應，壞死細胞多不能單個存在，而是成片形成壞死組織，并常被瘢痕組織修復，填充，而凋亡的形態(tài)改變主要在細胞核，染色質密集，核小體間連接區(qū)被酶切造成DNA鏈斷裂。形成碎片，染色質片段，細胞器和胞質成分細胞膜包裹而成凋亡小體。十五章：細胞連接都有哪些類型？各有何結構特點？ 細胞連接按其功能分為：緊密連接，錨定連接，通訊連接。1) 緊密連接（封閉連接），細胞質膜上，緊密連接蛋白(門蛋白)形成分支的鏈索條，與相鄰的細胞質膜上的鏈索條對應結合，將細胞間隙封閉。 2) 錨定連接：通過中間纖維（橋粒、半橋粒）或微絲（粘著帶和粘著斑）將相鄰細胞或細胞與基質連接在一起，以形成堅挺有序的細胞群體、組織與器官。3) 通訊連接：包括間隙連接和化學突觸，是通過在細胞之間的代謝偶聯(lián)、信號傳導等過程中起重要作用的連接方式。4) 胞間連絲連接：是高等植物細胞之間通過胞間連絲來進行物質交換與互相聯(lián)系的連接方式。動物細胞連接主要有哪幾種類型，各有何功能？答案要點：細胞連接的類型：㈠封閉連接或閉鎖連接：緊密連接；㈡錨定連接：與中間纖維相關的錨定連接：橋粒和半橋粒；與肌動蛋白纖維相關的錨定連接：粘合帶和粘合斑；㈢通訊連接：間隙連接。緊密連接是封閉連接的主要形式，普遍存在于脊椎動物體表及體內(nèi)各種腔道和腺體上皮細胞之間。是指相鄰細胞質膜直接緊密地連接在一起，能阻止溶液中的分子特別是大分子沿著細胞間的縫隙滲入體內(nèi)，維持細胞一個穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。緊密連接具有：形成滲漏屏障，起重要的封閉作用；隔離作用，使游離端與基底面質膜上的膜蛋白行使各自不同的膜功能；支持功能。橋粒：又稱點狀橋粒，位于粘合帶下方。是細胞間形成的鈕扣式的連接結構，跨膜蛋白（鈣粘素）通過附著蛋白（致密斑）與中間纖維相聯(lián)系，提供細胞內(nèi)中間纖維的錨定位點。中間纖維橫貫細胞，形成網(wǎng)狀結構，同時還通過橋粒與相鄰細胞連成一體，形成整體網(wǎng)絡，起支持和抵抗外界壓力與張力的作用。半橋粒相當于半個橋粒，但其功能和化學組成與橋粒不同。它通過細胞質膜上的膜蛋白整合素將上皮細胞錨定在基底膜上, 在半橋粒中，中間纖維不是穿過而是終止于半橋粒的致密斑內(nèi)。存在于上皮組織基底層細胞靠近基底膜處，防止機械力造成細胞與基膜脫離。粘合帶：又稱帶狀橋粒，位于緊密連接下方，相鄰細胞間形成一個連續(xù)的帶狀連接結構，跨膜蛋白通過微絲束間接將組織連接在一起，提高組織的機械張力。粘合斑：細胞通過肌動蛋白纖維和整聯(lián)蛋白與細胞外基質之間的連接方式，微絲束通過附著蛋白錨定在連接部位的跨膜蛋白上。存在于某些細胞的基底，呈局限性斑狀。其形成對細胞遷移是不可缺少的。體外培養(yǎng)的細胞常通過粘著斑粘附于培養(yǎng)皿上。間隙連接：是動物細胞間最普遍的細胞連接，是在相互接觸的細胞之間建立的有孔道的連接結構，允許無機離子及水溶性小分子物質從中通過，從而溝通細胞達到代謝與功能的統(tǒng)一。間隙連接在代謝偶聯(lián)中的作用：使代謝物（如氨基酸、葡萄糖、核苷酸、維生素等）及第二信使（cAMP、Ca2+等）直接在細胞之間流通。間隙連接在神經(jīng)沖動信息傳遞過程中的作用：在由具有電興奮性的細胞構成的組織中，通過間隙連接建立的電偶聯(lián)對其功能的協(xié)調(diào)一致具有重要作用。間隙連接在早期胚胎發(fā)育和細胞分化過程中具有重要；間隙連接對細胞增殖的控制也有一定作用。20 / 20