微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)經(jīng)典練習(xí)-資料下載頁
2025-04-04 23:24本頁面
【正文】 考查考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。15．（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶 淀粉 進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌（2）稀釋涂布平板法 涂布不均勻 AC（3）AC（4）酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO2需要排出，否則壓力過大【解析】（1）圖甲過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過程先要用同種限制性核酸內(nèi)切酶切割含有目的基因的外源DNA分子和質(zhì)粒，再用DNA連接酶將目的基因和載體連接起來形成重組質(zhì)粒．普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，而工程酵母菌可以高效利用淀粉，所以用以淀粉為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以選出工程酵母菌．②、③過程重復(fù)幾次的目的是純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌。（2）由圖乙可知，該同學(xué)采用的是稀釋涂布平板法，但菌落比較集中，沒有很好的分散開來，可能是涂布不均勻?qū)е碌摹２ＡЧ午P和培養(yǎng)基要嚴(yán)格滅菌，否則會有雜菌。（3）培養(yǎng)基中添加碘液進(jìn)行染色，先用顏色反應(yīng)，后面淀粉被分解后，會出現(xiàn)菌落周圍會出現(xiàn)透明圈，顏色較淺。在密閉和不密閉的情況下培養(yǎng)，酵母菌進(jìn)行的呼吸方式不同，數(shù)量也不同，淀粉分解的程度不同，酵母菌出現(xiàn)的透明圈大小也不同。（4）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，而工程酵母菌可以高效利用淀粉，即將淀粉分解產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng)，導(dǎo)致酒精發(fā)酵速率快，產(chǎn)生二氧化碳的速率更快，所以接種工程酵母菌的發(fā)酵罐要先排氣?！究键c(diǎn)定位】因工程的原理及技術(shù)；微生物的分離和培養(yǎng)16．（1）選擇培養(yǎng) 增加石油分解菌濃度（2）無菌操作（防止雜菌污染） 酒精燈火焰 倒置（3）保存的時間不長 菌種易被污染或產(chǎn)生變異（4）滅菌（5）EACBDG【解析】（1）在實(shí)驗(yàn)室篩選所要的特定菌種一般步驟為海水取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到培養(yǎng)基上→挑選菌落，其中選擇培養(yǎng)就是利用制成的富含石油選擇培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)菌，以增加石油分解菌濃度。（2）要從海水中篩選出石油分解菌，需要配置選擇培養(yǎng)基，并且這種選擇培養(yǎng)基只能是以石油為唯一碳源，使得其他微生物因?yàn)闊o法利用石油，而缺少碳源無法生存，在這個過程中必須嚴(yán)格按照微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的原則，在接種細(xì)菌前，培養(yǎng)基要用高壓蒸汽進(jìn)行滅菌，分離和純化石油分解菌時最常用的接種方法是稀釋涂布平板法。（3）菌種保存的時候，一般長期保存使用甘油管藏，在零下20℃。（4）做完實(shí)驗(yàn)將培養(yǎng)基倒掉之前，一定要進(jìn)行滅菌處理，防止環(huán)境污染。（5）由于題中給出G是必需的物質(zhì)，在5種突變菌株中只要加入G，都可以活下來，則G必然是最后的產(chǎn)物；凡是只加了E的都沒能存活，則E就是最開頭的產(chǎn)物，加A物質(zhì)，4均沒有存活，說明A物質(zhì)處于第二位；其他類推，C物質(zhì)處于第三位，B物質(zhì)處于第四位，D物質(zhì)處于第五位，因此這幾種物質(zhì)的合成順序應(yīng)是E→A→C→B→D→G?！究键c(diǎn)定位】微生物培養(yǎng)和分離17．（1）壓榨、萃?。?）唯一碳源 高壓蒸汽滅菌（3）普微鏡直接計(jì)數(shù) 酶活性 因定化酶（4）PCR【解析】（1）因?yàn)橹参镉筒粨]發(fā)，所以不適合采用蒸餾法提取，應(yīng)采用壓榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含有礦質(zhì)元素，只為微生物提供碳源；培養(yǎng)基適合用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。（3）測定微生物的數(shù)量，可以用顯微鏡直接計(jì)數(shù)；分離出的脂肪酶要對其活性進(jìn)行檢測，以確定其實(shí)用價值；可以利用酶固定技術(shù)重復(fù)使用脂肪酶。（4）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增基因?！究键c(diǎn)定位】提取芳香油；培養(yǎng)基對微生物的選擇作用；制備和應(yīng)用固相化酶；PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用18．（每空1分，10分）（1）含鹽高（或高鹽度） 缺氧（或厭氧、無氧）（2）缺氮（或無氮） 含有淀粉 高溫（3）蛋白質(zhì)、DNA 變性（或結(jié)構(gòu)改變） 高壓蒸汽（4）涂布分離法 劃線分離法【解析】（1）噬鹽菌的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境采集，如高鹽海灘等。（2）目的微生物能夠產(chǎn)生淀粉酶說明其碳源是淀粉，篩選菌株時應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高溫條件下培養(yǎng)。（3）配制培養(yǎng)基時各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)整pH，接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，在實(shí)驗(yàn)中要注意在無菌條件下進(jìn)行。（4）圖A菌落分布較均勻，接種方法是稀釋涂布平板，圖B菌落集中呈線狀，接種方法是平板劃線法?！究键c(diǎn)定位】微生物實(shí)驗(yàn)答案第7頁，總7頁
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