熒光分光光度計課件-資料下載頁
2025-03-20 12:41本頁面
【正文】 如果分析物質(zhì)本身不發(fā)熒光，然而又具有使某種熒光化合物的淬滅能力，可通過測量熒光化合物熒光強度的下降，間接地測量該物質(zhì)。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 60 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項 ： 、溶劑和化學試劑 溶劑的選擇要考慮兩個問題：一是溶劑的選擇要適宜，二是溶劑應達到足夠的純度。如果溶劑在一定波段范圍內(nèi)有光吸收，就不宜在此波段用作熒光溶劑；同一種熒光在不同溶劑中，其熒光光譜的形狀和強度都可能會有顯著的不同。因此，要選擇合適的溶劑，達到所要求的目的。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 61 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項 ： 、熒光污染 熒光污染的來源有多個方面，如活塞的潤滑油、去污劑、微生物和濾紙等。要根據(jù)具體情況加以消除，提高測定結(jié)果的準確度 。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 62 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項 ： 、溫度對熒光的影響 溫度對溶液的熒光強度有著明顯的影響。一般來說，熒光隨溫度降低而增強，其原因在于溶液溫度下降過程中，介質(zhì)的粘度逐漸增大，熒光物質(zhì)分子與溶劑分子的碰撞也隨之而減小的緣故。溶劑中如有淬滅劑存在，溫度對熒光強度的影響將會變得更雜。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 63 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項 ： 、熒光的猝滅現(xiàn)象 在熒光的定量分析中說的猝滅主要是指熒光熄滅中的自吸收和自熄滅所引起的 ,既當熒光物質(zhì)濃度較大時 ,常會發(fā)生自熄滅現(xiàn)象使熒光強度降低。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 64 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項 ： 、熒光的猝滅現(xiàn)象 這可能是由于激發(fā)態(tài)分子之間的碰撞引起的能量損失 ,當熒光物質(zhì)的熒光光譜曲線與吸收光譜曲線重疊時 ,熒光被溶液中處于基態(tài)的分子吸收 ,使發(fā)出的熒光強度降低。出現(xiàn)了當熒光物質(zhì)濃度達到一定值時隨著濃度的增加熒光強度反而降低的現(xiàn)象。在分析工作中我們一定要注意。以免影響分析結(jié)果。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 65 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項 ： 、光散射 光散射常常關(guān)系到一個實驗操作的靈敏度和再現(xiàn)性。在熒光分析中，可能遇到的光散射主要有三種，即丁鐸爾散射、瑞利散射和拉曼散射。 在實際測定工作中，對于不同的樣品，各種因素的影響程度是不一樣的，所以要分清主次并找出最適條件來克服其影響，才能得到滿意的結(jié)果。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 66 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 樣品的保鮮、實驗方法和計算公式的理解問題 這對生物樣品分析所產(chǎn)生的結(jié)果的準確度尤為重要 2022/4/16 光學分析儀器培訓 67 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計操作規(guī)程： 接通電源，打開穩(wěn)壓器。 待穩(wěn)壓器輸出電壓穩(wěn)定在 220V時，打開熒光分光光度計的總開關(guān)，（即打開 MATN開關(guān)）。 3 、約等 30秒后，按壓氙燈啟動按鈕（ Xe LAMP START按鈕），向氙燈加高壓、點亮氙燈。此時波長顯示屏下的 Xe LAMP指示燈亮。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 68 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計操作規(guī)程： 打開儀器上的計算機開關(guān)（ COMPUTER開關(guān)），波長顯示屏下的“ CPU” 指標燈亮，儀器將開始自動校正。注意：一定要先點亮氙燈，燈后再開計算機。 約等 5分鐘左右，儀器自動校正結(jié)束，計算機屏幕的左方將顯示出激發(fā)波長、發(fā)射波長，機屏上顯示常用的幾個參數(shù)（狹縫、響應、光電管增益等）。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 69 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計操作規(guī)程： 根據(jù)被測樣液成分，輸入所要的激發(fā)波長、發(fā)射波長及激發(fā)光路、發(fā)射光路的狹縫寬度。 將盛有待測液的樣品杯，放入樣品室的樣品架上，蓋上樣品室蓋，計算機屏幕的上方即顯示出測定樣品的熒光強度。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 70 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計操作規(guī)程： 測定完畢從樣品架上取出樣品的杯，將樣品杯洗凈存放好。關(guān)掉熒光分光光度計的計算機開關(guān)、總電源開關(guān)、穩(wěn)壓器開關(guān)。 整理工作臺面，蓋上儀器罩。 2022/4/16 光學分析儀器培訓 71 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計： 2022/4/16 光學分析儀器培訓 72 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計開關(guān)面： 2022/4/16 光學分析儀器培訓 73 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計控制面板： 2022/4/16 光學分析儀器培訓 74 熒光分光光度法 熒光分光光度計操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計記錄儀：
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