熒光分光光度計(jì)課件-資料下載頁(yè)
2025-03-20 12:41本頁(yè)面
【正文】 如果分析物質(zhì)本身不發(fā)熒光，然而又具有使某種熒光化合物的淬滅能力，可通過(guò)測(cè)量熒光化合物熒光強(qiáng)度的下降，間接地測(cè)量該物質(zhì)。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 60 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項(xiàng) ： 、溶劑和化學(xué)試劑 溶劑的選擇要考慮兩個(gè)問(wèn)題：一是溶劑的選擇要適宜，二是溶劑應(yīng)達(dá)到足夠的純度。如果溶劑在一定波段范圍內(nèi)有光吸收，就不宜在此波段用作熒光溶劑；同一種熒光在不同溶劑中，其熒光光譜的形狀和強(qiáng)度都可能會(huì)有顯著的不同。因此，要選擇合適的溶劑，達(dá)到所要求的目的。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 61 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項(xiàng) ： 、熒光污染 熒光污染的來(lái)源有多個(gè)方面，如活塞的潤(rùn)滑油、去污劑、微生物和濾紙等。要根據(jù)具體情況加以消除，提高測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度 。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 62 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項(xiàng) ： 、溫度對(duì)熒光的影響 溫度對(duì)溶液的熒光強(qiáng)度有著明顯的影響。一般來(lái)說(shuō)，熒光隨溫度降低而增強(qiáng)，其原因在于溶液溫度下降過(guò)程中，介質(zhì)的粘度逐漸增大，熒光物質(zhì)分子與溶劑分子的碰撞也隨之而減小的緣故。溶劑中如有淬滅劑存在，溫度對(duì)熒光強(qiáng)度的影響將會(huì)變得更雜。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 63 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項(xiàng) ： 、熒光的猝滅現(xiàn)象 在熒光的定量分析中說(shuō)的猝滅主要是指熒光熄滅中的自吸收和自熄滅所引起的 ,既當(dāng)熒光物質(zhì)濃度較大時(shí) ,常會(huì)發(fā)生自熄滅現(xiàn)象使熒光強(qiáng)度降低。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 64 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項(xiàng) ： 、熒光的猝滅現(xiàn)象 這可能是由于激發(fā)態(tài)分子之間的碰撞引起的能量損失 ,當(dāng)熒光物質(zhì)的熒光光譜曲線與吸收光譜曲線重疊時(shí) ,熒光被溶液中處于基態(tài)的分子吸收 ,使發(fā)出的熒光強(qiáng)度降低。出現(xiàn)了當(dāng)熒光物質(zhì)濃度達(dá)到一定值時(shí)隨著濃度的增加熒光強(qiáng)度反而降低的現(xiàn)象。在分析工作中我們一定要注意。以免影響分析結(jié)果。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 65 熒光分光光度法 熒光分析中注意事項(xiàng) ： 、光散射 光散射常常關(guān)系到一個(gè)實(shí)驗(yàn)操作的靈敏度和再現(xiàn)性。在熒光分析中，可能遇到的光散射主要有三種，即丁鐸爾散射、瑞利散射和拉曼散射。 在實(shí)際測(cè)定工作中，對(duì)于不同的樣品，各種因素的影響程度是不一樣的，所以要分清主次并找出最適條件來(lái)克服其影響，才能得到滿意的結(jié)果。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 66 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 樣品的保鮮、實(shí)驗(yàn)方法和計(jì)算公式的理解問(wèn)題 這對(duì)生物樣品分析所產(chǎn)生的結(jié)果的準(zhǔn)確度尤為重要 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 67 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)操作規(guī)程： 接通電源，打開(kāi)穩(wěn)壓器。 待穩(wěn)壓器輸出電壓穩(wěn)定在 220V時(shí)，打開(kāi)熒光分光光度計(jì)的總開(kāi)關(guān)，（即打開(kāi) MATN開(kāi)關(guān)）。 3 、約等 30秒后，按壓氙燈啟動(dòng)按鈕（ Xe LAMP START按鈕），向氙燈加高壓、點(diǎn)亮氙燈。此時(shí)波長(zhǎng)顯示屏下的 Xe LAMP指示燈亮。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 68 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)操作規(guī)程： 打開(kāi)儀器上的計(jì)算機(jī)開(kāi)關(guān)（ COMPUTER開(kāi)關(guān)），波長(zhǎng)顯示屏下的“ CPU” 指標(biāo)燈亮，儀器將開(kāi)始自動(dòng)校正。注意：一定要先點(diǎn)亮氙燈，燈后再開(kāi)計(jì)算機(jī)。 約等 5分鐘左右，儀器自動(dòng)校正結(jié)束，計(jì)算機(jī)屏幕的左方將顯示出激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)，機(jī)屏上顯示常用的幾個(gè)參數(shù)（狹縫、響應(yīng)、光電管增益等）。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 69 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)操作規(guī)程： 根據(jù)被測(cè)樣液成分，輸入所要的激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)及激發(fā)光路、發(fā)射光路的狹縫寬度。 將盛有待測(cè)液的樣品杯，放入樣品室的樣品架上，蓋上樣品室蓋，計(jì)算機(jī)屏幕的上方即顯示出測(cè)定樣品的熒光強(qiáng)度。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 70 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)操作規(guī)程： 測(cè)定完畢從樣品架上取出樣品的杯，將樣品杯洗凈存放好。關(guān)掉熒光分光光度計(jì)的計(jì)算機(jī)開(kāi)關(guān)、總電源開(kāi)關(guān)、穩(wěn)壓器開(kāi)關(guān)。 整理工作臺(tái)面，蓋上儀器罩。 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 71 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)： 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 72 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)開(kāi)關(guān)面： 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 73 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)控制面板： 2022/4/16 光學(xué)分析儀器培訓(xùn) 74 熒光分光光度法 熒光分光光度計(jì)操作 ： 、 日立 850型熒光分光度計(jì)記錄儀：
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