【正文】 + + + + his2 + + + + tyr1 + + + + 數(shù)目 11940 3660 685 107 2600 418 1180 轉(zhuǎn)化子類型 基因座位 ? 轉(zhuǎn)化在遺傳分析中的應(yīng)用 11940 685 13805 1180 2600+418 6785 3660+107 11940 418 12465 107 2600+1180 8125 3660+685 11940 2600 18200 3660 107+1180 2390 418+685 107 525 418 親本類型 重組類型 重組值 trp2 his2 trp2 tyr1 his2 tyr1 11940 +3660+ 2600+ 1180+ 685 % %+2 % % % 雙交換型 + + + trp2 his2 tyr1 33 連鎖遺傳圖 trp2 33 his2 tyr1 ?F?因子 ： Hfr菌株在切除 F因子時(shí)發(fā)生錯(cuò)誤切除，分離出一個(gè)攜帶 F因子和部分宿主染色體基因的遺傳因子，這種帶有宿主染色體基因的 F因子稱為 F?因子 。 ?性導(dǎo) (sexduction)：帶有 F?因子 的細(xì)菌在接合時(shí)， 由 F?因子 所攜帶的外 源 DNA便轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)菌的染色體上，這一過(guò)程稱為 性導(dǎo) 。 性導(dǎo) F’因子的轉(zhuǎn)移（性導(dǎo)） ?F?因子 使細(xì)菌 重組的特點(diǎn) ?F?因子 以極高的比率轉(zhuǎn)移 它攜帶的基因；如同 F+高效轉(zhuǎn)移 F因子一樣。 ?F?因子 有極高的自然整合率， 而且整合在一定的基因座位上，因有與細(xì)菌同源的染色體區(qū)段，不同于 F因子具有多個(gè)整合為點(diǎn)插入。 ?F?因子 的用途 不同的 F?因子 帶有不同的細(xì)菌 DNA片段，可覆蓋全部染色體基因，可用于構(gòu)建部分二倍體菌株，用來(lái)研究基因的相互作用，確定顯隱性關(guān)系，構(gòu)建遺傳圖譜，進(jìn)行互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)以鑒定兩個(gè)突變是屬于一個(gè)基因還是兩個(gè)基因等。 ? F＋ ， Hfr， F?的接合對(duì)照 ? F+細(xì)胞： F因子自身可以高效轉(zhuǎn)移，但對(duì)供體細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移的很少。 ? Hfr細(xì)胞： 對(duì)完整 F因子的轉(zhuǎn)移頻率很低，而對(duì)供體細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移的效率很高，但能在受體細(xì)胞里發(fā)生重組的頻率要低些，因?yàn)榫€性的供體染色體要經(jīng)過(guò)偶數(shù)次交換才能重組進(jìn)受體的染色體中形成穩(wěn)定的環(huán)狀 DNA。 ? F?細(xì)胞： 對(duì)含有少量供體細(xì)菌基因的 F?因子轉(zhuǎn)移頻率很高，因?yàn)榭梢孕纬煞€(wěn)定的環(huán)狀部分二倍體。但對(duì)供體中其他的基因轉(zhuǎn)移的很少。 轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction) ? 轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction) ： 噬菌體介導(dǎo)的細(xì)菌遺傳物質(zhì)重組的過(guò)程，稱為 轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 ? 轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn) Lederbery及其研究生 Zinder（ 1951） 首先在鼠傷寒沙門氏菌（ Salmenella typhimurium） 中發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。 原因 ? 是否為接合或轉(zhuǎn)化引起的？ 單獨(dú)培養(yǎng) 單獨(dú)培養(yǎng) 混合培養(yǎng) LA22 LA2 phetrpmet+his+ phe+trp+methis 基本培養(yǎng)基培養(yǎng)是否形成原養(yǎng)型菌落 否 是 否 ? U型管實(shí)驗(yàn) ，仍得到重組體，排除了接合的可能。并說(shuō)明它是一種可通過(guò)濾膜的過(guò)濾性因子（ FA）。 ? 利用 DNA酶 處理， FA不受 DNA酶影響，仍得到重組體，排除了轉(zhuǎn)化作用的可能。 ? FA與從溶源性菌分離得到的噬菌體 P22的質(zhì)量大小相同。 ? 用抗 P22的血清或加熱處理， P22的感染性和過(guò)濾性因子 FA功能失活的速率相同。 ? 抗噬菌體 P22的沙門氏菌菌株對(duì)過(guò)濾性因子也表現(xiàn)為抗性。 ? 這些結(jié)果表明： FA就是溫和噬菌體 P22。 尋找原因的實(shí)驗(yàn) ?轉(zhuǎn)導(dǎo)的類型 ? 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) ：在噬菌體感染的末期，細(xì)菌染色體被斷裂成許多小片段，在形成噬菌體顆粒時(shí)，少數(shù)噬菌體將細(xì)菌的 DNA誤認(rèn)為是它們自己的 DNA，并包裹進(jìn)其蛋白質(zhì)衣殼內(nèi)，從而形成轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體，該噬菌體再去感染其他宿主時(shí)，就將所攜帶的細(xì)菌染色體片段帶入受體菌中，通過(guò)偶數(shù)次交換，進(jìn)而重組整合。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)類型稱為 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) 。（如 P P22噬菌體介導(dǎo)） 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) ? 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo) ：指轉(zhuǎn)導(dǎo) DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后，既不與受體基因組發(fā)生交換，又不隨宿主 DNA復(fù)制而復(fù)制，而是很穩(wěn)定地存在于細(xì)胞之中，由于細(xì)菌不斷增殖，故該轉(zhuǎn)導(dǎo)類型的細(xì)菌所占比例越來(lái)越少，以至最終消失，故稱為 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo) ?局限轉(zhuǎn)導(dǎo)（特殊性轉(zhuǎn)導(dǎo)） ：由溫和噬菌體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)導(dǎo)類型。原噬菌體離開細(xì)菌染色體時(shí)，偶爾可將噬菌體插入位點(diǎn)兩邊的細(xì)菌基因一起環(huán)落下來(lái)而形成混雜的 DNA片段，該 DNA片段由噬菌體蛋白質(zhì)衣殼包裹，再去侵染其他宿主細(xì)菌，可將特定的細(xì)菌基因帶入新的受體菌，進(jìn)而重組整合，這種轉(zhuǎn)導(dǎo)稱為 局限轉(zhuǎn)導(dǎo) 。（ 如 λ噬菌體介導(dǎo) ） ?分為 低頻轉(zhuǎn)導(dǎo) 和 高頻轉(zhuǎn)導(dǎo) 局限轉(zhuǎn)導(dǎo) 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別 比較項(xiàng)目 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因 供體染色體或染色體外的任何基因 供體染色體上與原噬菌體緊密連鎖的少數(shù)幾個(gè)個(gè)別基因 噬菌體寄生的位置 不結(jié)合在寄主染色體特定位置上 結(jié)合在寄主染色體特定位置上 獲得轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的方法 通過(guò)敏感菌的裂解或溶源菌的誘導(dǎo) 紫外線誘導(dǎo)溶源菌 轉(zhuǎn)導(dǎo)子的區(qū)別 一般較穩(wěn)定，非溶原性 一般不穩(wěn)定，呈缺陷溶原性 重組方式 偶數(shù)次交換 部分二倍體 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)和局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)的比較 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與細(xì)菌遺傳作圖 ? 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) ? 隨機(jī)轉(zhuǎn)移細(xì)菌染色體片段 ? 實(shí)質(zhì)與轉(zhuǎn)化相似 ? 共 /雙轉(zhuǎn)導(dǎo)(cotransduction) ? 兩個(gè)基因同時(shí)轉(zhuǎn)導(dǎo) ? 可以進(jìn)行細(xì)菌遺傳作圖 ? 與雙轉(zhuǎn)化作圖類似 局限轉(zhuǎn)導(dǎo)與細(xì)菌遺傳作圖 ? 局限轉(zhuǎn)導(dǎo) ? 轉(zhuǎn)移 λ噬菌體插入位點(diǎn)兩側(cè)的細(xì)菌基因 ? λ噬菌體的不正確切離 ? 實(shí)質(zhì)與性導(dǎo)相似 ? 構(gòu)建部分二倍體 ? 插入位點(diǎn)不穩(wěn)定 ? 只能用于轉(zhuǎn)移少量基因 ? 對(duì)個(gè)別基因進(jìn)行研究