[理化生]22動物細胞工程-資料下載頁
2025-02-18 14:41本頁面
【正文】 ② 過程 小鼠注射抗原 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 B淋巴細胞 骨髓瘤細胞 誘導融合 3種兩兩融合細胞 HAT選擇培養(yǎng)基篩選 多種雜交瘤細胞 專一性抗體檢驗 能產(chǎn)生某一種特定抗體的雜交瘤細胞 單克隆抗體 單克隆雜交瘤細胞 四、單克隆抗體的制備 單克隆抗體的制備 ③ 單克隆抗體的特點： 特異性強、靈敏度高、可大量生產(chǎn) ④ 單克隆抗體的原理： 免疫原理 細胞融合原理 動物細胞培養(yǎng)原理 四、單克隆抗體的制備 單克隆抗體的制備 ⑤ 應用 作為診斷試劑 用于治療疾病和運載藥物 四、單克隆抗體的制備 單克隆抗體的制備 ⑥雜交瘤細胞的特點： 既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體； HAT選擇性培養(yǎng)基 在普通的動物細胞培養(yǎng)液中加入次黃嘌呤（ H）、氨基喋呤（ A）和胸腺嘧啶核苷酸（ T）。 DNA分子復制的兩條途徑 D途徑 ： 即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，為 DNA分子的合成提供原料。在此合成過程中，葉酸作為重要的輔酶參與這一過程，而 hat培養(yǎng)液中氨基喋呤是一種葉酸的拮抗物，可以阻斷 dna合成的 “ d途徑 ” ； S途徑： 是應急途徑或補救途徑（ “ s途徑 ” ），它是利用次黃嘌呤 — 鳥嘌呤磷酸核苷轉移酶（ hgprt）和胸腺嘧啶核苷激酶（ tk）催化次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相應的核苷酸，兩種酶缺一不可。 不同細胞的 DNA合成途徑 效應 b細胞和兩個效應 b細胞融合細胞 ：具有 D和 S途徑， “ D途徑 ” 被氨基喋呤阻斷，雖 “ s途徑 ” 正常，但因缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力，一般 10d左右會死亡。 對于骨髓瘤細胞以及自身融合細胞 ：只有 D途徑，無 S途徑。 “ D途徑 ” 又被氨基喋呤阻斷，所以在 hat培養(yǎng)液中也不能增殖而很快死亡。 雜交瘤細胞 ：既具有效應 B細胞的 “ s途徑 ” ，又具有骨髓瘤細胞在體外培養(yǎng)液中長期增殖的特性，因此能在 hat培養(yǎng)液中選擇性存活下來，并不斷增殖。
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1