【正文】 術是________________。 (3)如圖是單克隆抗體制備過程示意圖，請據(jù)圖回答： ① 圖中 A過程，從小鼠的脾臟中取得的 “ 小鼠細胞” 是 ________細胞，該細胞能夠產(chǎn)生 ________。從小鼠體內(nèi)提取分離該細胞之前，給小鼠注射的特定的物質是 __________________________。 ② 圖中 B過程是細胞融合，該過程需要用滅活的________、聚乙二醇或電激等誘導 。 ③ 特異性抗體的獲取方法也可以采用向動物體內(nèi)反復注射某種抗原 ， 使動物產(chǎn)生抗體 ， 然后從動物血清中分離所需抗體 。 與這種方法制備的抗體相比 ，單克隆抗體具有 __________________________________等 特點 。 (4) 動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足的環(huán)境條件有________________________________________。 (5)單克隆抗體技術還有哪些用途？________________________________________。 答案： (1)活細胞 (2)動物細胞融合技術 (3)① B淋巴 抗體 抗原 (或狂犬病病毒 ) ②病毒 (或仙臺病毒 ) ③ 特異性強、靈敏度高，并可以大量制備 (4)無菌、無毒，溫度和 pH，氣體，營養(yǎng)物質 (5)作為診斷試劑；開發(fā)治療惡性腫瘤的抗體等 2022 山東理綜 ,35人類在預防與診療傳染性疾病過 程中 ,經(jīng)常使用疫苗和抗體 。 已知某傳染性疾病的病原 體為 RNA病毒 ,該病毒表面的 A蛋白為主要抗原 ,其疫苗生 產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖： 請回答： (1)過程①代表的是 。 (2)過程②構建 A基因表達載體時 ,必須使用 和 兩種工具酶。 (3)過程③采用的實驗技術是 ,獲得的 X 是 。 (4)對健康人進行該傳染病免疫預防時 ,可選用圖 中基因工程生產(chǎn)的 所制備的疫苗 。 對該傳染病疑似患者確診時 ,可從疑似患者體內(nèi)分 離病毒 ,與已知病毒進行 比較 ?；蛴脠D 中的 進行特異性結合檢測 。 答案 (1)逆 (反 )轉錄 (2)限制性核酸內(nèi)切酶 (限制酶 ) DNA連接酶 (兩空 可以互換 ) (3)細胞融合 雜交瘤細胞 (4)A蛋白 核酸 (基因 )序列 抗 A蛋白的單克隆 抗體 2022年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎分別授予美國人馬里奧 卡佩基、奧利弗 史密斯和英國人馬 丁 埃文斯。 3位科學家的獲獎原因是其研究為 “基因靶向”技術的發(fā)展奠定了基 礎。所謂“基 因靶向”技術 (人們大都稱之為基因“敲除”技術 ) 是指利用細胞脫氧核糖核酸 (DNA)可與外源性 DNA 同源序列發(fā)生同源重組的性質 ,定向改造生物某一 基因的技術 。 借助這一從上世紀 80年代發(fā)展起來 的技術 ,人們得以按照預先設計的方式對生物遺傳 信息進行精細改造 。 有了 “ 基因靶向 ” 這一高精 度瞄準鏡 ,科學家就可以精確瞄準任何一個基因 , 使其失去活性 ,進而研究該基因的功能。請回答下 列問題： (1)“ 敲除 ” 一種基因需要分兩步來完成：第一步 是利用化學 “ 剪刀 ” ,例如用某種酶切除哺乳動物 染色體中有某種功能的基因 。 第二步是用修改過 的基因取代原有基因 。 這里的 “ 某種酶 ” 應該是 酶 。 用修改過的基因取代原有基 因時還需要 酶。 (2)假如要 “ 敲除 ” 小鼠的胰島素基因 ,請設計出 實驗步驟 。 給出一種檢驗胰島素基因是否被 “ 敲除 ” 的方法 。 (3)利用細胞工程也可獲得可供老鼠移植之用的 “ 敲 除排斥基因”的老鼠 ,其過程大致如下圖所示： ①促進卵細胞融合最常用的試劑是 。 ② 重組細胞培養(yǎng)成胚胎的過程所用的培養(yǎng)基 ,從物 理性質上看屬于 ,培養(yǎng)基中 至少要加入水 、 無機鹽 、 葡萄糖 、 氨基酸 、 維生 素 、 促生長因子 、 微量元素和 等 物質 ,同時要創(chuàng)造適宜溫度 、 pH和無菌條件 ,其中 需要無菌環(huán)境的原因是 。 答案 (1)限制性核酸內(nèi)切 DNA連接 (2)用限制性核酸內(nèi)切酶切除小鼠胚胎干細胞中的 胰島素基因 ,用修改過的基因取代胰島素基因 用 胰島素基因探針檢驗胰島素基因是否被 “ 敲除 ” (3)① 滅活的病毒或聚乙二醇 ② 液體培養(yǎng)基 動 物血清 細菌等微生物生長繁殖快 ,消耗營養(yǎng)物質 多 ,同時產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物 ,毒害動物細胞 解析 (1)限制性核酸內(nèi)切酶是基因 “ 剪刀 ” ,DNA 連接酶是基因 “ 針線 ” 。 (2)“ 敲除 ” 一種基因需 要分兩步來完成：第一步是利用限制性核酸內(nèi)切 酶切除哺乳動物染色體中有某種功能的基因 。 第 二步是用修改過的基因取代原有基因 。 基因探針 可檢驗目的基因 。 (3)滅活的病毒或聚乙二醇是動 物細胞融合最常用的試劑 。 動物細胞培養(yǎng)基的成 分有水 、 無機鹽 、 葡萄糖 、 氨基酸 、 維生素 、 動 物血清等 ,需在無菌條件下進行。