my動(dòng)物細(xì)胞工程ppt課件(已修改)
2025-09-23 18:18 本頁面
【正文】 第三節(jié) 動(dòng)物細(xì)胞工程 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合 單克隆抗體制備 體細(xì)胞克隆 細(xì)胞核移植 動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù) 動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ) ? 動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng) 從 病人 關(guān)節(jié)軟骨 中未受力的部分，取出一片 約為 葡萄干 大小的健康 軟 骨 組織； 分 離軟 骨 細(xì)胞并經(jīng) 三星期的 體 外培養(yǎng) ，使 細(xì)胞數(shù) 增加 約 10～ 20倍 ；清理 軟 骨受 損 的部分， 從 下方骨 頭 部位取出一片 約與傷 口 大小相同的骨膜， 縫 在 傷 口上方，再 將軟 骨 細(xì)胞 注射到骨膜下方 ；經(jīng)過 復(fù)健 一年 后 即可 恢復(fù) 正常的 生活 。 動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng) 是指在體外模擬動(dòng)物體內(nèi)環(huán)境，將動(dòng)物細(xì)胞或組織在 無菌 、溫度 適宜 和營(yíng)養(yǎng)充足的條件下培養(yǎng)，使其繼續(xù)生長(zhǎng)、繁殖并維持原有結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù)過程。 ? 動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng) ? 大規(guī)模地生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品： 如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 ? 為基因工程技術(shù)提供受體細(xì)胞： 如培養(yǎng)健康細(xì)胞用于燒傷病人皮膚移植等。 ? 對(duì)有毒物質(zhì)的檢測(cè)： 許多致畸、致癌物質(zhì)加入培養(yǎng)液后，培養(yǎng)細(xì)胞會(huì)發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異。根據(jù)變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，可以判斷某種物質(zhì)的毒性。現(xiàn)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)成為檢測(cè)有毒物質(zhì)的快速而靈敏的有效手段。 ? 細(xì)胞的生理、藥理和病理研究方面： 如抗癌藥物的篩選，治療和預(yù)防癌癥及其他疾病等。 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 ? : 適宜的溫度：人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞最適溫度為〒 ℃ 。適宜 的酸堿度： PH： 。 液體 合成培養(yǎng)基： （糖、氨基酸）、促生長(zhǎng)因子、（水、無機(jī)鹽、微量元素）等；通常還需加入 血漿、血清 等天然成分。 1）無菌、無毒 的環(huán)境： 4）氣體環(huán)境 ： 2）營(yíng)養(yǎng)： 3）溫度和 pH： “ 95％空氣 +5％ CO2” 的混合氣體 培養(yǎng)箱。 氧氣是細(xì)胞代謝必須的； CO2維持培養(yǎng)液 的 PH。 對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具 無菌處理； 培養(yǎng)液中 添加抗生素 防止培養(yǎng)過程中污染； 定期更換培養(yǎng)液 以清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。 2． 培養(yǎng) 過程 幼齡動(dòng)物組織或早期胚胎 ―― →剪碎胰蛋白酶單個(gè)細(xì)胞 ― → 細(xì)胞懸浮液 ―― →原代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)―― →胰蛋白酶細(xì)胞懸浮液 ―― →傳代培養(yǎng)細(xì)胞株或細(xì)胞系。 (1)原代培養(yǎng) ① 材料：動(dòng)物 早期胚胎 或出生不久的 幼齡動(dòng)物的器官或組織 ， 因?yàn)檫@些組織或器官中的細(xì)胞生命力旺盛 ，分裂能力強(qiáng) 。 ② 過程：直接從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊 ， 用 胰蛋白酶 使其分散成單個(gè)細(xì)胞 ， 然后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)的過程 。 (2)傳代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)到一定程度，空間會(huì)變小，營(yíng)養(yǎng)會(huì)減少，而且細(xì)胞會(huì)出現(xiàn) 接觸抑制 ，如果還需要繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，就要用 胰蛋白酶 使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，重新形成懸浮細(xì)胞，分裝到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。 細(xì)胞株： 原代細(xì)胞一般傳至 10代左右 細(xì)胞生長(zhǎng)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到 40~50代 ，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系： 細(xì)胞株傳代至 50代后 又出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。 （ 1）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面 時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。此時(shí)，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是 。 相互接觸 接觸抑制 單層（或一層） 胰蛋白酶 ： （ 2） 胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎 ？ 將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞要注意什么問題呢？ 注意時(shí)間的控制 （ 3） 隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn) 的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì) 胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 細(xì)胞，該種細(xì)胞的黏著性降低 ,細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)（糖蛋白）的量 。 衰老甚至死亡 不死性 減少 【 小結(jié) 】 動(dòng)物 細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較 植物組織培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 理論基礎(chǔ) (原理 ) 細(xì)胞的全能性 細(xì)胞增殖 培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基，需一定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、 激素、光照等條件 液體培養(yǎng)基，其中包括營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、 維生素、動(dòng)物血清等 過程 結(jié)果 獲得新個(gè)體或細(xì)胞產(chǎn)品 大量產(chǎn)生細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物 用途 ① 快速繁殖名貴花卉和果樹。② 培養(yǎng)無病毒植物、轉(zhuǎn)基因植物。 ③ 大規(guī)模生產(chǎn)藥物、食品添加劑、香精、色素等 ① 生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。 ② 檢測(cè)有毒物質(zhì)。 ③ 研究藥理、病理。④ 移植治療 思考與探究 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要經(jīng)過脫分化的過程嗎？為什么？ 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不需經(jīng)過脫分化過程。因 高度分化的動(dòng)物細(xì)胞 發(fā)育潛能變窄， 失去了發(fā)育成完整個(gè)體的能力 ，所以，動(dòng)物細(xì)胞也就沒有類似植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的脫分化過程了。要想使培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞定向分化，通常采用 定向誘導(dǎo)動(dòng)物干細(xì)胞 ，使其分化成所需要的組織或器官。 (2022年高考江蘇卷 )動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)于研究器官的生理 、 病理過程及其機(jī)制意義重大 。 下圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖 。 請(qǐng)回答下列問題： (1) 肝 臟 切 成 小 薄 片 ， 這 有 利 于 肝 臟 細(xì) 胞________________________________________。 (2) 氣室中充入 5%CO2 氣 體 的 主 要 作 用 是_____
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