【正文】 劑型的開發(fā)及其對棉花應用性能的研究基于種子包衣或滴灌的應用方式，確定12種解鹽促生菌肥的液體劑型并獲得菌肥的成分配方；通過盆栽和小區(qū)實驗研究解鹽促生菌肥對棉花種植的種子發(fā)芽、出芽率、成苗率以及對棉花不同時期的生長指標和產(chǎn)量指標影響，如干重、鮮重、株高、棉鈴數(shù)、單鈴數(shù)及產(chǎn)量等，進而確定菌肥的施入量及施入周期等應用參數(shù)。4. 解鹽促生菌肥對棉花應用的解鹽促生作用機理的研究 在不同程度鹽漬化條件下，通過盆栽和小區(qū)試驗研究解鹽促生菌肥對棉花中Na、K、Ca、Mg等營養(yǎng)元素的吸收和分配規(guī)律的影響；以及對棉花生長過程中的內(nèi)源激素調(diào)節(jié)效應，如植物生長素（IAA）、赤落酸（ABA）及乙烯的調(diào)節(jié)影響，研究對棉苗的一些關鍵酶苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）、過氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）等酶活性影響，以及對鹽脅迫危害的指標脯氨酸、丙二醛、可溶性蛋白及光和色素含量等影響，最終闡明解鹽促生菌肥對棉花的解鹽促生機理。（四）技術路線解鹽促生菌應用參數(shù)及應用性能的研究解鹽促生菌株 Rs198農(nóng)副產(chǎn)品為主的廉價培養(yǎng)基原料解鹽促生菌高密度培養(yǎng)工藝研究確定高密度培養(yǎng)工藝與關鍵技術參數(shù)解鹽促生菌肥盆栽和小區(qū)試驗篩選菌肥的營養(yǎng)載體系統(tǒng)及助劑系統(tǒng)確定菌肥的活菌數(shù)及存活性和穩(wěn)定性解鹽促生菌對棉花的生理指標研究菌肥對棉花的解鹽促生機理的研究（五）本課題的特色與創(chuàng)新之處1. 采用高密度發(fā)酵與營養(yǎng)馴化相結合的方式進行產(chǎn)品生產(chǎn)，發(fā)酵原料采用以廉價的農(nóng)副產(chǎn)品為主的玉米粉、豆粕等，降低其生產(chǎn)成本。2. 采用合適有機營養(yǎng)載體配方篩選技術針對菌株篩選出最佳配方，實現(xiàn)了產(chǎn)品中的功能菌含量穩(wěn)定，易于定殖，效果保證的技術突破和創(chuàng)新，基本解決了以往微生物肥料使用效果不穩(wěn)定的現(xiàn)象。3. 通過闡明解鹽促生菌肥對棉花的解鹽促生作用機理，進而解決應用性能等基礎性問題，以便更好地指導產(chǎn)品的實際應用。(六) 預期進展（1）獲得解鹽促生菌高密度培養(yǎng)的最佳工藝及關鍵技術，廉價培養(yǎng)基原料組成配方。（2）獲得對解鹽促生菌體具有較高的存活期與穩(wěn)定性的營養(yǎng)載體及助劑系統(tǒng)。（3）確定解鹽促生菌肥的最優(yōu)配方和劑型，獲得性能良好的12個解鹽促生菌肥劑型產(chǎn)品。（4）闡明解鹽促生菌肥對棉花緩解鹽脅迫及促進其生長的作用機理。三、研究基礎（包括與本論文有關的工作積累、已取得的工作成績、研究條件、課題研究計劃進度安排）（一）工作積累及已取得的工作成績近年來，課題組在微生物篩選、鑒定及特殊功能的研究與應用等方面做了大量基礎性和應用性工作，具有較強的科研優(yōu)勢和研究實力。課題組前期已從新疆各主要棉區(qū)鹽漬化嚴重的棉花根際土壤中篩選獲得能緩解鹽脅迫促進作物生長的多株解鹽促生細菌。經(jīng)過鑒定分屬惡臭假單胞菌（Pseudomonas Putida Rs198）、產(chǎn)酸克雷伯氏菌（Klebsiella Oxytoca Rs5）和植生克雷伯氏菌（Klebsiella planticola Rs2）等，并已在Genbank中注冊。主要進行了解鹽促生菌的篩選和鑒定、菌株的生理生化特性研究，以及探討了這些菌株具有較強的溶磷、解鉀、產(chǎn)生植物生長激素等性能。另外采用了盆栽和小區(qū)試驗研究了解鹽促生菌對棉花及番茄作物具有緩解鹽脅迫并促進生長的功效。近期取得的研究成果：實驗條件優(yōu)化：當接種量為4%、搖床轉速為150rpm、培養(yǎng)溫度為34℃、培養(yǎng)時間為33h的時候600nm處的吸光值最高，菌體生長最好。廉價培養(yǎng)基的篩選：當培養(yǎng)基中玉米粉的含量為1%、%的時候菌體生長最好，菌數(shù)均能達到1010cfu/ml。接下來用響應面法進一步優(yōu)化。營養(yǎng)載體系統(tǒng)和助劑系統(tǒng)的篩選：營養(yǎng)載體系統(tǒng)有腐殖酸、谷氨酸、玉米粉、尿素，其中1%的谷氨酸、2%的尿素、8%和10%的玉米粉與菌株的相容性是比較好的；助劑系統(tǒng)有膨潤土、聚乙烯醇、海藻酸鈉、羧甲基纖維素鈉，%和1%的膨潤土、5%的聚乙烯醇、2%的海藻酸鈉與菌株的相容性是比較好的。篩選出來的營養(yǎng)載體和助劑按12︰1的比例混合，分別接種60%和80%的新鮮菌液，在第3天、7天、10天、14天、21天、28天、35天、60天、90天、120天、150天、180天時，用稀釋平板法觀察菌體生長情況，確定最優(yōu)的解鹽促生菌肥的配方。這些工作的開展已積累了大量的研究經(jīng)驗，為本項目研究內(nèi)容的深入開展奠定了良好基礎。（二）研究條件本人所在的實驗室是石河子大學生物化工實驗室，是具有較好的生物學、微生物學研究條件的實驗室，課題組在前期菌種分離篩選和鑒定方面做了大量的工作。實驗室有可供查閱資料的電腦、網(wǎng)絡及試驗需要的儀器設備。實驗室擁有全自動發(fā)酵罐系統(tǒng)、冷凍干燥系統(tǒng)、蛋白質(zhì)核酸電泳分析系統(tǒng)和制備系統(tǒng)、高速冷凍離心機、掃描電子顯微鏡、PCR擴增儀、凝膠層析系統(tǒng)、細胞轉化系統(tǒng)、高效液相色譜儀、恒溫水浴鍋、超聲波清洗器、標準型pH計、電子天平、紫外可見分光光度計、恒溫調(diào)速搖床、高壓滅菌鍋、智能人工氣候箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱等儀器。 以上工作條件可滿足進行微生物及產(chǎn)物研究、生物菌肥的制備及性能等研究的需要。（三）課題研究計劃進度安排 時間安排2012年3月2012年4月解鹽促生菌高密度培養(yǎng)關鍵技術的研究2012年5月2012年6月篩選合適的營養(yǎng)載體系統(tǒng)和助劑系統(tǒng)2012年7月2012年8月確定解鹽促生菌肥的最優(yōu)配方和劑型2012年9月2012年11月盆栽實驗2012年12月2013年2月解鹽促生作用機理的研究2013年2月2013年5月整理數(shù)據(jù)、畢業(yè)論文撰寫四、導師意見課題選題正確，研究目的明確，方案設計合理，實驗方法可行。針對新疆特殊的土壤環(huán)境研究解鹽促生菌肥產(chǎn)品最優(yōu)配方和劑型，通過盆栽或小區(qū)實驗進行確定菌肥的施入量及施入周期等應用參數(shù)，進而闡明解鹽促生菌肥對棉花解鹽促生機制具有很重要的意義，并為更合理的將該菌肥應用于實際生產(chǎn)提供理論參數(shù)，對適應鹽堿土壤滴灌技術，提高棉花產(chǎn)量具有積極地理論和實踐意義。該研究生善于思考問題，學習主動，通過查閱大量文獻，形成清晰的研究思路、實驗方案，并已開展部分實驗研究工作。鑒于此，準予開題！ 導師簽字： 年 月 日五、論文選題評議（就選題的意義、實驗設計方案、預期進展和成果、學生分析、綜合問題的能力表達等方面做出評議，并提出是否通過的建議） 審核小組負責人簽字： 年 月 日考核小組成員姓名研究方向職稱、職務工作單位代斌多相催化教授石河子大學楊紅兵天然產(chǎn)物化學教授石河子大學魏忠高分子化學副教授石河子大學曹紅生物技術與酶工程副教授石河子大學武占省生物肥料副教授石河子大學