巴戟天對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、成骨分化及cbfal基因表達(dá)影響的研究開題報告-資料下載頁
2025-01-21 15:56本頁面
【正文】 取 血制備含巴戟天水提物血清、巴戟天醇提物血清、生理鹽水組血清I型膠原免疫組化倒置相差顯微鏡5%含藥血清ALP染色功能鑒定形態(tài)學(xué)鑒定10%含藥血清20%含藥血清BMSCs的分離、培養(yǎng)、鑒定透射電鏡FCMMTT礦化結(jié)節(jié)染色 I型膠原染色建立含巴戟天血清培養(yǎng)BMSCs的模型，評價巴戟天對BMSCs增殖的影響。(二、巴戟天對骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化及Cbfal mRNA的表達(dá)的影響)SD大鼠120只（生理鹽水組、水提物組、醇提物組各40只），制備血清）誘導(dǎo)成骨劑 組含巴戟天醇提物血清＋誘導(dǎo)成骨劑組含巴戟天水提物血清＋誘導(dǎo)成骨劑組含巴戟天醇提物血清組含巴戟天水提物血清組生理鹽水組取最佳時效與量效制備血清、培養(yǎng)BMSCs 各組按時間點檢測HE染色、倒置相差顯微鏡、透射電鏡等形態(tài)學(xué)觀察。6D9D15D12D3D檢測指標(biāo)形態(tài)學(xué)觀察Cbfal mRNA的測定定量分析HE染色透射電鏡BGP含量的測定ALP活性的測定倒置相差顯微鏡Cbfal mRNA的表達(dá)Cbfal mRNA的相對表達(dá)量結(jié)論研究進(jìn)度及具體安排總進(jìn)度：2003年9月－－2005年5月具體進(jìn)度：2003年9月――2003年12月文獻(xiàn)檢索，實驗設(shè)計；2004年1月――2004年12月購買試劑，細(xì)胞培養(yǎng)，完成各項檢測，收集數(shù)據(jù)；2005年1月――2005年5月再次文獻(xiàn)檢索，實驗資料整理，撰寫論文，準(zhǔn)備答辯。預(yù)期結(jié)果以論文形式發(fā)表通過巴戟天對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、成骨分化及Cbfal基因表達(dá)影響的實驗研究，確立含藥血清體外培養(yǎng)大鼠BMSCs的模型，揭示巴戟天水提物或巴戟天醇提物可能通過促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、向成骨細(xì)胞分化及使此過程中的Cbfal基因表達(dá)加強(qiáng)，從而促進(jìn)成骨，有利于骨愈合、骨修復(fù), 為中藥促進(jìn)骨折愈合，治療骨折遲緩愈合、不愈合以及中醫(yī)藥在骨組織修復(fù)工程中的應(yīng)用等提供科學(xué)依據(jù)，也為新藥開發(fā)、中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究提供科學(xué)的理論依據(jù)。完成課題的條件協(xié)助導(dǎo)師具體指導(dǎo)的人員配備李楠 博士主要儀器設(shè)備情況AGl04電子分析天平(德國MTTLER—TCLEDO)。Φ690酸度計(德國BECKMAN)。SZ93自動雙重純水蒸餾器(上海亞榮生化儀器廠)。851l恒溫磁力攪拌器 （常州國華電器有限公司）；LDZX40H全自動壓力滅菌消毒器（上海申安醫(yī)療器械廠）；TGL16C水平離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；HH4數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)。1000ml反復(fù)用過濾裝置、手動真空泵(美國NalGene)。GBB16二氧化碳培養(yǎng)箱(德國Heraeus)。SWCJ2FD凈化工作臺(蘇州安泰空氣技術(shù)公司)。ZWA微型振蕩器(常州國華電器有限公司)。ELX808酶聯(lián)免疫檢測儀(美國BIOTEK)。MDFU4086S4086S超低溫冰箱(日本SANYO)。FJ2008Ps γ免疫計數(shù)儀 (西安262廠)。DU650 紫外分光光度計(美國BECKMAN)。9600 基因擴(kuò)增儀(美國PE生物系統(tǒng)公司)。DYCP32 瓊脂糖漿水平電泳槽(北京六一儀器廠)。GEL DOC 2000凝膠成像系統(tǒng)(美國BIORAD)。MILLIQ Biocel 超純水裝置(美國MILLIPORE)。IX70 倒置式系統(tǒng)相差顯微鏡(日本OLYMPUS)。FACSCAN 流式細(xì)胞儀(美國BECTON DICKISON)。64R 低溫高速離心機(jī)(美國BECKMAN),等等。實驗動物情況通過福建中醫(yī)學(xué)院動物實驗中心向上海斯萊特動物有限公司購買SD大鼠100只。藥物試劑等來源情況 αMEM（HyClone）、新生牛血清（NCS, HyClone）、青－鏈霉素溶液（HyClone）、HEPES(上海生工)、胰蛋白酶（1：250，AMRESCO）、噻唑藍(lán)（MTT, AMRESCO）、ALP測定試劑盒（南京建成生物工程研究所）、BGP放免分析試劑盒（中國原子能科學(xué)研究院）、Ttizol Reagent(Invitrogen)、β甘油磷酸鈉（β－GP,SIGMA）、硝酸鈷、碳酸氫鈉（上海化學(xué)試劑公司），等等。協(xié)作單位及協(xié)作內(nèi)容落實情況 透射電鏡觀察在福建醫(yī)大電鏡室進(jìn)行（已落實）。臨床工作情況本課題暫不涉及臨床部分。文獻(xiàn)資料福建中醫(yī)學(xué)院圖書館建有較完備的網(wǎng)上信息資源、文獻(xiàn)檢索數(shù)據(jù)庫和藏書、期刊資源等滿足課題需要.其他 導(dǎo)師審查意見 導(dǎo)師簽名 年 月 日 開題小組評議意見（課題的先進(jìn)性、科學(xué)性、可行性評價）參加開題成員簽名 年 月 日 系（院、部）批準(zhǔn)意見系（院、部）蓋章 年 月 日備考檢查及變動情況記錄第一次檢查及變動記錄導(dǎo)師簽名 年 月 日 第一次檢查及變動記錄導(dǎo)師簽名 年 月 日 課題完成日期 年 月 日備注16
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