[工作計(jì)劃]大學(xué)生創(chuàng)新課題-資料下載頁
2025-01-19 04:44本頁面
【正文】 h,加 IPTG使其終濃度為 1 mmoL。誘導(dǎo) 2h后收集菌液行 SDS PAGE蛋白質(zhì)電泳檢測。 圖7：黃河裸裂尻魚生長激素基因SDS –PAGE 圖譜，其中4號出現(xiàn)特異條帶SDS PAGE檢測表明 (見圖7) ,含重組 GH Schizopygopsis pylzovi 基因的 4號菌株經(jīng) IPTG誘導(dǎo)后 ,出現(xiàn)特異蛋白表達(dá)條帶 ,蛋白分子量約為 14 . 4 kDa。3 討論本研究用RTPCR法和基因克隆活的黃河裸裂尻魚GH的cDNA,其長度為508bp，比較分析得知，所有的的GH基因具有相同的結(jié)構(gòu)，與其他魚類進(jìn)行核苷酸序列比對發(fā)現(xiàn)，其親緣關(guān)系比較近，并且可以看出GH基因比較保守，通過其氨基酸序列的比對發(fā)現(xiàn)黃河裸裂尻與青海湖裸鯉、鯉魚、斑馬魚的親緣關(guān)系較近，其氨基酸序列相似性分別為100%、98%、94%，另外，盡管黃河裸裂尻與青海湖裸鯉所編碼的氨基酸相似性為100%，但其編碼氨基酸的基因序列中也有1個(gè)核苷酸位點(diǎn)不同，可能是不同種群間歧異性的具體表現(xiàn)。課題只是擴(kuò)增出了黃河裸裂尻魚生長激素基因的一個(gè)片段508bp，并沒有拿到其全長序列，這對于黃河裸裂尻與其他魚種的同源性比對產(chǎn)生了一定的差異，如：系統(tǒng)進(jìn)化樹。本研究采用生物信息學(xué)方法對黃河裸裂尻魚GH基因序列、編碼蛋白的理化性質(zhì)等進(jìn)行分析，這為今后的GH蛋白的分離純化及對該蛋白生物活性分析提供了可靠的技術(shù)保障，也對我省開展的高原特有魚種的人工馴化和養(yǎng)殖計(jì)劃的有力技術(shù)保障。參考文獻(xiàn)[1]謝保勝，藤原滋樹，斑馬魚總RNA提取和純化[J].生物學(xué)雜志，2007,24（6）：6769[2]謝保勝，段瑞君，藤原滋樹，斑馬魚促性腺激素釋放激素基因的克隆與表達(dá)[J].青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，30（1）：913[3]謝保勝，段瑞君，斑馬魚促性腺激素釋放激素及相關(guān)肽基因的克隆與序列分析[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2009,18（3）263267[4]劉濱，臧曉南，劉順梅，張學(xué)成，雷霽霖大菱鲆生長激素基因cDNA的克隆、序列分析及分子系統(tǒng)研究[J].中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2008,38（5）：726732[5]江世貴，張殿昌，鯪生長激素基因cDNA的分子克隆和序列分析[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2003，
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