植物組織培養(yǎng)與器官培養(yǎng)-資料下載頁
2025-01-19 00:48本頁面
【正文】 培養(yǎng) 花藥及花粉培養(yǎng) ?把發(fā)育到一定階段的花藥接種在人工培養(yǎng)基上，使其發(fā)育和分化成植株的過程 ?從花藥中分離出花粉粒使之成為分散或游離的狀態(tài)，通過培養(yǎng)使其脫分化并發(fā)育成植株的過程 2022/2/15 55 ? 獲得單倍體植株 ? 花藥培養(yǎng)的基本程序： Flash – 選處于生殖生長高峰期的花藥，需低溫預處理（ 3～ 10℃ ， 2～ 10天），光照先弱后強。 花藥培養(yǎng) 目的及程序 2022/2/15 56 花粉或小孢子的分離 花粉或小孢子培養(yǎng)目的及方法 目的：獲得單倍體植株 2022/2/15 57 ? 花藥看護培養(yǎng) ? 花粉懸浮培養(yǎng) ? 固液雙層培養(yǎng) 花粉培養(yǎng)方法 2022/2/15 58 花粉囊 花粉囊花藥培養(yǎng)花粉粒培養(yǎng)多核的花粉花粉粒胚胎發(fā)生胚胎原胚圖 1 9 . 4 花粉粒培養(yǎng)可以使配偶體的生長恢復為孢子體的生長 ,生長出單倍體植株花蕾2022/2/15 59 毛狀根培養(yǎng) ? 定義：毛狀根 (hairy roots)是（雙子葉）植株或組織、器官經發(fā)根農桿菌（ Agrobacterium rhizogenes）感染后，形成的類似頭發(fā)一樣的根組織。又稱發(fā)狀根。 1934年， Hildebrand 報道了發(fā)根農桿菌感染蘋果樹產生發(fā)根 。 2022/2/15 60 毛狀根的特性 ? 特性： – 毛狀根可以不依賴激素快速生長，根多叢生，多分枝，多根毛，無向地性。 – 生理生化和遺傳穩(wěn)定。 ? 為什么可以不依賴激素？ – 發(fā)根農桿菌的 Ri質粒上的 TDNA片斷整合進植物細胞核基因組中。 – TDNA上有生長素合成基因 tms 1 和 tms 2能夠指導 IAA的合成。 Ri p l a s m i d2022/2/15 61 毛狀根的誘導 外植體接種法 共培養(yǎng) 莖稈接種法 原生質體 農桿菌共培養(yǎng)法 2022/2/15 62 生物反應器培養(yǎng)青蒿毛狀根生產青蒿素 ? 青蒿：為雙子葉植物藥菊科植物 ? 青蒿素： ?倍半萜內酯類化合物 ?功效：治療瘧疾 2022/2/15 63 , draught cylinder, stell mesh, outlet, , nozzle, , inlet, filter, , 11. Holes on draught cylinder, valve, storage tank, device, 15. 40W fluorescent lamp 2022/2/15 64 2022/2/15 65 生物反應器培養(yǎng)青蒿毛狀根生產青蒿素 2022/2/15 66 Growth feature of Artemisia annua adventitious shoot in the mist bioreactor (a) 0 d 。 (b) 10 d 。 10cm 30cm 2022/2/15 67 生物反應器培養(yǎng)青蒿毛狀根生產青蒿素 ? 實驗材料 – 青蒿毛狀根： 由發(fā)根農桿菌 R1601誘導青蒿葉片產生 ? 培養(yǎng)方法及條件 1. 固體培養(yǎng) – 20～ 30 mm青蒿毛狀根根尖 – MS固體培養(yǎng)基 (添加 30 L蔗糖 ) – 繼代時同為 15d 2022/2/15 68 生物反應器培養(yǎng)青蒿毛狀根生產青蒿素 ? 培養(yǎng)方法及條件 2. 液體振蕩培養(yǎng)（三角瓶） – 接種量：每 L培養(yǎng)液（ MS） 5 g 毛狀根培養(yǎng)物（分支多且細長的毛狀根） – 120130 rpm， 25177。 1 ℃ ， 12 h／ d光照 – 液體培養(yǎng)的繼代時間為 10 d。 3. 反應器培養(yǎng) – 反應器中的培養(yǎng)液 (MS)為 400mL，接種量為 – 12 h／ d培養(yǎng)， 25177。 I℃ 。 – 霧化間隔 30 min，霧化 2min。 – 通氣量為 L／ min，通氣時間為 15 mln。 2022/2/15 69 ? 最大生物量 ，青蒿素產量達到 ，青蒿素的含量為％。 2022/2/15 70 2022/2/15 71 小結 ? 外植體選擇是植物組織培養(yǎng)的基本環(huán)節(jié)，應根據(jù)不同培養(yǎng)目的確定取材原則。 ? 通過離體培養(yǎng)獲得單倍體的途徑有哪些？
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