深圳大學(xué)理科選修遺傳學(xué)發(fā)現(xiàn)課件7重組dna-資料下載頁
2025-01-18 02:02本頁面
【正文】 開始向 F － 轉(zhuǎn)移（ 5’端首先進(jìn)入受體 ） 。 (3) 單鏈轉(zhuǎn)移，滾環(huán)復(fù)制 。 F纖毛與接合管 F＋ F－ Hfr 是 F因子整合到 染色體上的結(jié)果 (1) 20個(gè)以上的整合位點(diǎn)； (2) 整合通過 IS等同源重組或轉(zhuǎn)座實(shí)現(xiàn)； (3) F因子有多個(gè)整合位點(diǎn)，主要在 IS3處。 分子克隆 pUC18 pUC19 含四個(gè)部分： （ 1）來自 pBR322的質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn)（ ori）； （ 2） ampr 。 （ 3）大腸桿菌 β 半乳糖苷酶基因（ lacZ’）的啟動(dòng)子及其編碼 α 肽鏈的 DNA序列； （ 4）多克隆位點(diǎn)（ MCS） lacZ` Ori Ampr MCS 藍(lán)白斑篩選重組子的原理： lacZ’ 編碼 β半乳糖苷酶的 α肽，在異丙基硫代 βD半乳糖苷（ IPTG）的誘導(dǎo)下，使呈色底物 5溴 4氯 3吲哚 βD半乳糖苷（ Xgal）被分解產(chǎn)生藍(lán)色。因此攜帶空載體的大腸桿菌呈藍(lán)色菌落。 外源基因的插入使 α肽失活，因而攜帶外源基因的重組子菌落呈白色。 AprAprApr轉(zhuǎn)化篩選重組子 白色菌落2 ) D N A 重組無D N A 插入有D N A 插入外源D N A重組D N A提取D N A 電泳AprAprApr1) 限制酶切利用菌落顏色篩選重組子 PUC質(zhì)粒載體的優(yōu)點(diǎn)： 基因組小，拷貝數(shù)高， DNA產(chǎn)量高； 有 LacZ篩選標(biāo)記， LacZ基因插入失活，可用藍(lán)白斑篩選陽性克??； 有 MCS，其中有 13個(gè)以上的單一限制位點(diǎn)，可用于外源基因克隆。 意義與應(yīng)用 重組 DNA技術(shù)的出現(xiàn)和應(yīng)用開辟了分子遺傳學(xué)研究的新領(lǐng)域，打開了人類了解、識(shí)別、分離和改造基因，創(chuàng)造新物種的大門。它的成就對(duì)于工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)和醫(yī)學(xué)產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響，并將為解決世界面臨的能源、食品和環(huán)保三大危機(jī)開拓一條新的出路。 《 Frankenstein》 （譯作“科學(xué)怪人”或“弗蘭肯斯坦”）是英國詩人 雪萊 的妻子 瑪麗 雪萊 在1818年創(chuàng)作的小說，被認(rèn)為是世界第一部真正意義上的科幻小說?！案ヌm肯斯坦”是小說中那個(gè)瘋狂科學(xué)家的名字，他用許多碎尸塊拼接成一個(gè)“人”，并用電將其激活。 《 Frankenstein》 已經(jīng)成為科幻史上的經(jīng)典，現(xiàn)在很多幻想類影視作品中經(jīng)常出現(xiàn)這個(gè)怪物的翻版。
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