羧酸循環(huán)ppt課件(2)-資料下載頁
2025-01-15 08:38本頁面
【正文】 氨基酸 目 錄 乙酰 CoA 2. TCA循環(huán)中間產(chǎn)物可為脂酸合成提供原料 合成脂酸 檸檬酸 丙酮酸循環(huán) 目 錄 α酮戊二酸 + NH4+ 3. TCA循環(huán)中間產(chǎn)物可為非必需氨基酸合成提供碳架 谷氨酸 谷氨酸脫氫酶 NADH + H+ NAD+ 目 錄 目 錄 （三）添補反應補充 TCA循環(huán)中間產(chǎn)物 ? 參與其他代謝途徑而消耗的 TCA循環(huán)中間產(chǎn)物必須及時補充，才能保持 TCA循環(huán)順利進行。這類反應被稱為 添補反應（ anaplerotic reaction） 。 ? 最重要的添補反應是由丙酮酸羧化酶催化的，從丙酮酸生成草酰乙酸的反應。 丙酮酸 + CO2 草酰乙酸 丙酮酸羧化酶 ATP ADP + Pi 目 錄 ? 乙酰 CoA是丙酮酸羧化酶的激活劑； ? TCA循環(huán)中的酶促反應可以將草酰乙酸轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌虚g產(chǎn)物； ? 此外，可由別的途徑生成一些中間產(chǎn)物，如： 奇數(shù)碳鏈脂肪酸 琥珀酰 CoA 某些氨基酸 α酮戊二酸、草酰乙酸 目 錄 二、 TCA循環(huán)在三大營養(yǎng)物質(zhì)代謝中具有重要生理意義 （一） TCA循環(huán)是三大營養(yǎng)物質(zhì)的最終代謝通路 （二） TCA循環(huán)是糖、脂肪和氨基酸代謝聯(lián)系的樞紐 目 錄 第五節(jié) 三羧酸循環(huán)關(guān)鍵反應的分析原理 Analytical Principles of Key Reactions of Tricarboxylic Acid Cycle 目 錄 一、采用分光光度法測定硫氫輔酶 A生成量分析檸檬酸合酶活性 反應生成的輔酶 A和 5,539。二硫代雙 （ 2硝基苯甲酸 ）（ DNTB） 在 pH 、 M 三乙醇胺和 M 乙二胺四乙酸鈣鈉 （ EDTA ） 溶液中反應生成硫氫輔酶 A， 其在 412 nm時有吸收峰 ， 通過分光光度計測定吸光度 ， 測定硫氫輔酶 A的生成量 。 以此反映檸檬酸合酶酶活性 。 目 錄 二、采用分光光度法檢測 NADH生成量分析異檸檬酸脫氫酶活性 反應中異檸檬酸脫氫酶酶活性的檢測主要通過測定生成的 NADH在 340 nm吸光度 。 檢測體系包括 120 mM 的 D， L異檸檬酸三鈉 ， 30 mM 的硫酸錳 , 20 mM 的 NAD+ 及異檸檬酸脫氫酶 。 目 錄 三、采用分光光度法測定 NADH生成量分析 α酮戊二酸脫氫酶活性 通過測定 NADH在 340 nm時吸光度的變化反映 α酮戊二酸脫氫酶復合體酶活性 。 檢測體系包括 ml的磷酸鹽； ml 的輔酶 A； ml 的半胱氨酸 。 ml NAD+； 的酶 。 目 錄 四、采用分光光度法測定順烏頭酸生成量分析順烏頭酸酶活性 檢測體系包括 100 mmol/L 的氯化鈉 ， 30 mmol/L檸檬酸鈉 , 20 mmol/L Tris/HCl 和酶 ， 在 ml反應終體積 ， pH 的溶液中 ， 反應在 25℃ 進行 ， 通過檢測順烏頭酸在 240nm的吸光度反映順烏頭酸酶的酶活性 。
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