xy色譜分離ppt課件-資料下載頁
2025-01-14 05:01本頁面
【正文】 劑，使樣品分離并收集目的產(chǎn)物，叫展開。 ? 下面介紹幾種方式： A、洗脫展開法 ? 應(yīng)用最廣的一種方法。 ? 先將樣品輸入柱，加入一種或幾種溶劑的混合物作流動相洗。 物質(zhì)濃度 流出液體積 又分三種 ? 恒定洗脫法：不改變洗脫液的組成 ? 逐次洗脫法：洗脫液的組成至少改變一次 ? 梯度洗脫法：逐漸改變洗脫劑的組成 梯度洗脫裝置 洗脫時梯度曲線的形狀 ? 洗脫液濃度與洗脫液體積或洗脫時間的關(guān)系曲線稱為梯度曲線。 ? 通常先使用線性，然后改變?yōu)榘夹位蛲剐巍? 體積或時間 洗脫劑濃度 B、前沿分析法 ? 樣品本身起流動相的作用。 ? 不能將樣品中每個組分都分離回收，而只能得到其中作用力最弱的純物質(zhì)。 A A+B A+B+C C、置換展開法 ? 又名頂替法或取代法。與洗脫展開法差別不大，主要不同是樣品輸入色譜柱后，用一種與固定相作用力極強(qiáng)的置換劑作為流動相。 ? 最先流出的是作用力最弱的。 ? 優(yōu)點(diǎn) ? 缺點(diǎn) A B 取代劑 徑向色譜 ? 色譜柱的放大： ? （ 1）直徑不變，增加柱長（有限的） ? （ 2）柱長不變，加大直徑（目前常用，但分離效率會隨直徑的增加而下降） ? 為解決這些問題，發(fā)展了徑向色譜。 ? 據(jù)報道，從實(shí)驗規(guī)模到大規(guī)模的多柱并聯(lián)可放大240倍。 原理圖 操作圖 第六節(jié) 親和色譜 ? 基于固定相的配基與生物分子間的特殊生物親和能力的不同來進(jìn)行分離的，是專門用于純化生物大分子的色譜分離技術(shù)。 ? 目前已成為純化生物物質(zhì)的一種主要方法。 ? 優(yōu)、缺點(diǎn) 過程原理圖 親和層析劑 ? 最大的問題是商品種類太少，幾乎每種生物大分子都需要合成其特殊的親和層析劑。 ? 制備過程： ? （ 1）載體的選擇； ? （ 2）載體的活化 ? （ 3）配基的連接 “手臂”原理 ? 配基常是小分子化合物。但由于載體的空間位阻關(guān)系，使大分子化合物不能直接接觸到配基。 ? 怎么辦呢？ ? 在載體和配基之間引入適當(dāng)長度的“手臂”（間隔基），以減少載體的空間位阻，增加配基的活動度。 原理圖 洗脫方法 ——一般采用柱色譜法 ? 兩種： ? 普通洗脫法和專一性洗脫法。
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