【正文】 18份，其中 3名廚師12名患者肛拭便樣（抗炎治療中）， 菜 板、棉拭子 1份，涼拌豆腐卷原料豆腐卷 1份，存放豆腐卷冰箱物體表面棉拭涂抹 1份 。 ? 2． 2 培養(yǎng)基： SC,GN,SS,EMB,。 營養(yǎng)瓊脂， MYP瓊脂，三糖鐵瓊脂，微量生化管均為杭州天和微生物試劑有限公司產(chǎn)品；沙門氏菌 、志賀氏菌、致病大腸桿菌診斷血清為蘭州生物制品研究所產(chǎn)品，均在有效期內(nèi)使用。 ? 2． 3 檢驗方法：參照 GB478994[1],WS/T1996[2] ,文獻 [3]方法進行蠟樣芽胞桿菌、變形桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、致病大腸桿菌檢驗。 3結(jié)果 ? 3． 1 直接染色結(jié)果： 樣品經(jīng) 過稀釋后涂片革藍氏染色，在豆腐卷、冰箱涂抹， 3份患者便樣中均可見革藍氏陽性芽胞桿菌，所有樣品均可見革藍氏陰性桿菌，長短不一。 ? 3． 2培養(yǎng)結(jié)果：豆腐卷經(jīng)稀釋后用 MYP 瓊脂做蠟樣芽胞桿菌計數(shù)，取典型菌落鑒定 蠟樣芽胞桿菌計數(shù)為： 106個 /g ，冰箱表面棉拭涂抹后放在生理鹽水中，直接涂 MYP瓊脂、營養(yǎng)瓊脂分離蠟樣芽胞桿菌典型菌落；肛拭便樣采取后放在生理鹽水中，稀釋至能在MYP瓊脂或營養(yǎng)瓊脂上分離出單個菌落，其中 3份便樣品分離到蠟樣芽胞桿菌典型菌落。所有樣品經(jīng)腸桿菌科常規(guī)檢驗后，發(fā)現(xiàn) 3份糞便來源的三糖鐵管反應(yīng)一致：產(chǎn) H2S、斜面產(chǎn)堿、底層產(chǎn)酸。 ? 3． 3 生化反應(yīng)結(jié)果：由豆腐卷、冰箱物體表面、 3名患者分離到的蠟樣芽胞桿菌反應(yīng)一致 ，見表 2。另外 3名患者三糖鐵管反應(yīng)一致，見表3，用腸桿菌科編碼鑒定管 15e鑒定系統(tǒng)，編碼為 73721，鑒定為奇異變形桿菌。 表 2 5株蠟樣芽孢桿菌生化反應(yīng) ? 表 2 5株蠟樣芽孢桿菌生化反應(yīng) ? 項目 菌株來源 ? 豆腐卷 冰箱 患者便 1 患者便 2 患者便 3 ? 洛蛋白酶 + + + + + ? 卵黃反應(yīng) + + + + + ? 葡萄糖利用（厭氧） + + + + + ? 過氧化氫酶 + + + + + ? 甘露醇 — — — — — ? 木糖 — — — — — ? 檸檬酸鹽利用 — — — — — ? 硝酸鹽利用 + + + + + ? 淀粉水解 + + + + + ? V— P反應(yīng) — — — — — ? 溶血 + + + + + 表 3 3株奇異變形桿菌生化反應(yīng) ? 表 3 3株奇異變形桿菌生化反應(yīng) ? 菌株來源 ? 項目 患者便 4 患者便 5 患者便 6 H2S + + + ? 苯丙氨酸 + + + ? 葡萄糖酸鹽 + + + ? 靛基質(zhì) — — — ? M— R + + + ? 枸櫞酸鹽 + + + ? 尿素酶 + + + ? 動力 + + + ? 產(chǎn)氣 + + + ? 賴氨酸 — — — ? 鳥氨酸 + + + ? 棉子糖 — — — ? 山梨醇 — — — ? 側(cè)金盞花醇 — — — 4討論 ? 4． 1目前，對于細菌性食物中毒的實驗室檢驗，大多數(shù)基層單位沒有全自動分析儀器，又由于受到許多因素（如：中毒報告時間、剩余食品有無、用藥情況等等）的影響，加之細菌鑒定本身的復(fù)雜性，造成了致病因子檢驗的難度。以往根據(jù)潛伏期、特殊的臨床指征，判定檢驗方向，但是大多數(shù)細菌性食物中毒的潛伏期區(qū)別不明顯，臨床癥狀也比較相似，由兩個致病因子引起的混合型就更為復(fù)雜，因此細菌性食物中毒的檢驗沒有統(tǒng)一確定的模式，要具體問題具體分析，充分利用已有資料信息，找到入手點和檢驗方向，避免盲目性的同時還要避免漏檢。 ? 4． 2本次檢驗綜合分析流調(diào)資料，就餐，食譜情況，確定了中毒餐次，根據(jù)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)患者 100%早餐食用涼拌豆腐卷，廚師自述豆腐卷未經(jīng)加熱直接涼拌，冰箱內(nèi)生熟不分，確定了可疑食品，通過對可疑食品的重點分析，尋找其他樣品與之 相同的共性，檢出了蠟樣芽胞桿菌；由于潛伏期及臨床癥狀與單一蠟樣芽胞桿菌感染亦有異點：蠟樣芽孢桿菌食物中毒分嘔吐型和腹瀉型，嘔吐型潛伏期較短（ ~5小時），以嘔吐為主，本次中毒潛伏期 5~22小時，平均潛伏期 13小時；腹瀉型以腹瀉為主，潛伏期 8~16小時，本次中毒腹瀉癥狀 %,嘔吐癥狀 %。因此， 還要考慮其他的病原菌，經(jīng)檢驗在 3名患者檢便樣中檢出奇異變形桿菌，說明本次食物中毒是混合型 的。但是，由于早餐中其他食物沒有剩余，未能在食物中檢出奇異變形桿菌，未采到嘔吐物，采集到便樣的患者均在輸液治療中，影響了檢出率。 ? 4． 2本次檢驗綜合分析流調(diào)資料，就餐，食譜情況，確定了中毒餐次，根據(jù)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)患者 100%早餐食用涼拌豆腐卷，廚師自述豆腐卷未經(jīng)加熱直接涼拌，冰箱內(nèi)生熟不分，確定了可疑食品，通過對可疑食品的重點分析，尋找其他樣品與之 相同的共性，檢出了蠟樣芽胞桿菌；由于潛伏期及臨床癥狀與單一蠟樣芽胞桿菌感染亦有異點：蠟樣芽孢桿菌食物中毒分嘔吐型和腹瀉型，嘔吐型潛伏期較短（ ~5小時），以嘔吐為主，本次中毒潛伏期 5~22小時，平均潛伏期13小時；腹瀉型以腹瀉為主，潛伏期 8~16小時，本次中毒腹瀉癥狀 %,嘔吐癥狀 %。因此， 還要考慮其他的病原菌，經(jīng)檢驗在 3名患者檢便樣中檢出奇異變形桿菌，說明本次食物中毒是混合型 的。但是，由于早餐中其他食物沒有剩余，未能在食物中檢出奇異變形桿菌，未采到嘔吐物，采集到便樣的患者均在輸液治療中，影響了檢出率。