基因的定點突變ppt課件-資料下載頁
2025-01-08 00:31本頁面
【正文】 DNA作用元件，引入新的酶切位點，提高蛋白的抗原性或者是穩(wěn)定性、活性、研究蛋白的晶體結(jié)構，以及藥物研發(fā)、基因治療等等方面。 七 、應用前景 ?不同于定點突變的是基于 PCR的隨機突變，通過改變 PCR條件提高 PCR過程中的隨機出錯，這種方法適用于未知的蛋白質(zhì)，作全局性分析，所以有人稱為飽和突變（ saturation mutagenesis）。不過這種方法由于沒有目的性，分析操作相當繁瑣，并且不會出現(xiàn)一個位點 2個以上堿基突變，因而應用上有局限性。定點突變適用于蛋白結(jié)構已有初步了解的基因，比 PCR隨機突變更有目的性，也更為精確，簡單，同時改造基因更加 “ 隨心所欲 ” 。由于定點突變技術在蛋白質(zhì)組學中有這非常廣泛的應用前景，相信這個技術在不遠的將來還會有更大的改進和發(fā)展，也必將為更多人熟悉應用。 在分子生物學和基因工程中的應用 ?探明未知序列的結(jié)構和功能的關系，如啟動子誘變篩選，真 核的 TATA盒保守序列確定。 ?載體構建：調(diào)控元件，強啟動子，多接頭。 ?研究基因調(diào)控序列，如 AUG前加入 ACC序列最佳。 在蛋白質(zhì)工程中的應用 ?降低毒性，如 TNF ?改變亞型和種的特異性，如 IFN的 23位 AAG（賴氨酸）， AGG（精氨酸），使 IFN2a變成 IFN2b。 123位 Try（酪）變甘 /絲，使 IFN種屬特異性明顯改變，對人抗病毒活性小于牛。 ?提高活性和穩(wěn)定性，如 IFN βser17（ cys變 ser） ?提高蛋白質(zhì)作用的專一性，如 IFNβ的 956位被 IFNa的 754位取代后，活性提高 40倍。 謝謝觀看！
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