dna復(fù)制ppt課件(2)-資料下載頁(yè)
2025-01-06 14:02本頁(yè)面
【正文】 半保留復(fù)制合成兩條新的 DNA鏈 (2)半保留復(fù)制實(shí)驗(yàn)證據(jù)（ MeselsonStahl) 1958年 Meselson amp。 stahl用同位素（ 15N） 示蹤標(biāo)記加密度梯度離心技術(shù) 實(shí)驗(yàn) ,該實(shí)驗(yàn)跟蹤了生長(zhǎng)了三代的大腸桿菌， 證明了DNA是采取半保留的方式進(jìn)行復(fù)制 。 [15N] [15N14N] [14N] [15N14N] [15N14N] DNA的合成是半不連續(xù)的 （ semidiscontinuous replication) ? DNA 復(fù)制在合成先導(dǎo)鏈（ leading strand) 時(shí)是連續(xù)的；而在合成后隨鏈 (lagging strand)時(shí)是先形成小片段（ Okazaki fragment ） ，隨后再將它們連接而成大片段。因后隨鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)合成的而先導(dǎo)鏈?zhǔn)沁B續(xù)合成的，所以我們稱(chēng)之為半不連續(xù)復(fù)制（ semidiscontinuous replication)。 兩條新鏈具有不同的特征 The two new DNA strands have different features Okazaki fragment 連接酶（ Ligase)將 Okazaki fragment連接在一起 前導(dǎo)鏈 (Leading strand))和后隨鏈 (lagging strand)的協(xié)調(diào)合成 DNA聚合酶控制復(fù)制的忠實(shí)性 ?DNA聚合酶造成的復(fù)制錯(cuò)誤可分為兩類(lèi)： 移碼（ frameshift): 指一個(gè)核苷酸的插入或缺失。 替換（ substitution): 指摻入錯(cuò)誤核苷酸（不正確配對(duì)） ?Note: DNA聚合酶通常具有 3`5`核酸外切酶活性，可以切除錯(cuò)配堿基；通過(guò)校正機(jī)制，復(fù)制忠實(shí)性還可提高 100倍。 (103→10 81010) 細(xì)菌的 DNA聚合酶仔細(xì)檢查延長(zhǎng)鏈末端的堿基對(duì)，如果是錯(cuò)誤的會(huì)予以切除。 DNA polymerases have exonuclease activity 修復(fù)會(huì)把含損傷堿基的一小段 DNA替換掉 DNA復(fù)制的終止 一般說(shuō)來(lái)，鏈的終止不需要特定的信號(hào)，也不需要特殊的蛋白質(zhì)來(lái)參與，到達(dá)終止位點(diǎn)后， DNA聚合酶離開(kāi) DNA雙鏈，終止發(fā)生。 6 真核生物 DNA復(fù)制 P4748 7 DNA復(fù)制的調(diào)控 P4850 8 小 結(jié) ? 復(fù)制子、復(fù)制眼、復(fù)制叉的概念 ? 線(xiàn)狀 DNA分子復(fù)制時(shí)末端問(wèn)題的解決 ? DNA通過(guò)半保留半不連續(xù)方式合成 ? 細(xì)菌和真核生物都有一種以上的 DNA聚合酶。 DNA合成包括：起始、延伸和終止三個(gè)階段 ? 起始 (initiation)：涉及一種蛋白質(zhì)復(fù)合物，它識(shí)別復(fù)制起始點(diǎn) (origin)。在 DNA合成之前，母鏈必須分開(kāi)，并（短暫地）保持單鏈狀態(tài)，然后在復(fù)制叉處起始子鏈的合成； ? 延伸 (elongation)：由另一個(gè)蛋白質(zhì)復(fù)合體完成。只有當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)復(fù)合體和 DNA在復(fù)制處的特殊結(jié)構(gòu)結(jié)合時(shí)，復(fù)制體 (replisome)才存在，在復(fù)制體延 DNA移動(dòng)時(shí)，母鏈分開(kāi)而子鏈合成； ? 終止（ termination)： 在復(fù)制子末端，終止反應(yīng)是必需的。終止后，加倍的染色體必須分開(kāi)。
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