dna復(fù)制ppt課件(2)(已改無錯(cuò)字)
2023-02-06 14:02:11 本頁面
【正文】 NA and is important in processivity, an exonuclease domain with its own active site, and an Nterminal domain. 5 原核生物 DNA復(fù)制的基本過程 DNA復(fù)制的起始 DNA合成鏈的延伸 DNA復(fù)制的終止 單鏈 DNA的產(chǎn)生 3`OH引發(fā)末端的產(chǎn)生 復(fù)制復(fù)合體的形成 DNA復(fù)制的起始 單鏈 DNA的產(chǎn)生 解旋酶 (helicase): 使 DNA的兩條鏈分開，它通常利用 ATP水解來提供必需的能量； 拓?fù)洚悩?gòu)酶 （ DNA Topisomerase ） ? 拓?fù)洚悩?gòu)酶的種類分為 Ⅰ 型和 Ⅱ 型。 ? 原核拓?fù)錁?gòu)酶 Ⅰ ： MW=100kD，單肽鏈，含 3~4個(gè) Zn。 作用是暫時(shí)切斷一條 DNA鏈，形成酶 DNA共價(jià)中間物而使超螺旋 DNA松弛，然后再將切斷的單鏈 DNA連接起來。每次改變一個(gè)連環(huán)數(shù)。 原核拓?fù)錁?gòu)酶 Ⅰ 作用機(jī)制： ①酶與 DNA結(jié)合使雙鏈解旋； ②使一條鏈切開，但酶與切口的兩端結(jié)合阻止了螺旋的旋轉(zhuǎn)； ③酶使另一條鏈經(jīng)過缺口，然后再將兩斷端連接起來； ④酶從 DNA上脫落，兩條鏈復(fù)原，得到的 DNA比原來少一個(gè)負(fù)超螺旋。 ? 拓?fù)洚悩?gòu)酶 Ⅱ 拓?fù)洚悩?gòu)酶 Ⅱ 也稱旋轉(zhuǎn)酶。廣泛存在于各種生物中。 使正超螺旋轉(zhuǎn)化為負(fù)超螺旋，每次改變兩個(gè)連接數(shù)。 Replication machinery replication Positive supercoil Break DNA Topoisomerase II pass DNA through the break negative supercoil 單鏈結(jié)合蛋白（ singlestrand binding protein):單鏈 DNA結(jié)合，阻止其再形成雙鏈體狀態(tài) φX174 噬菌體的 DNA在三種功能蛋白先后作用下分開成為單鏈： 在復(fù)制起始點(diǎn)， 噬菌體 A蛋白 使病毒（ +）鏈產(chǎn)生缺口。 Rep蛋白 提供解旋酶活性，它使兩鏈分離。SSB包繞單鏈形成穩(wěn)定的單鏈形式。 Three proteins unwind φX174 DNA 3`OH引發(fā)末端的產(chǎn)生 多種方法可以產(chǎn)生 3`OH末端 1) 3) 2) 起始需要解旋酶、單鏈結(jié)合蛋白和引發(fā)酶 復(fù)制復(fù)合體的形成 DNA合成鏈的延伸 半保留復(fù)制合成兩條新的 DNA鏈 DNA的合成是半不連續(xù)的 連接酶將岡崎片段連接在一起 前導(dǎo)鏈和后隨鏈的協(xié)調(diào)合成 DNA復(fù)制忠實(shí)性的控制 (1) 半保留復(fù)制的概念 DNA在復(fù)制時(shí)，兩條鏈解開分別作為模板，在 DNA聚合酶的催化下按堿基互補(bǔ)的原則合成兩條與模板鏈互補(bǔ)的新鏈，以組成新的 DNA分子。這樣新形成的兩個(gè) DNA分子與親代 DNA分子的堿基順序完全一樣。由于子代 DNA分子中一條鏈來自親代，另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?，這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制 (semiconsertive replication)。
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