醫(yī)學(xué)碩士答辯歐琴答辯-資料下載頁
2025-01-06 01:32本頁面
【正文】 * * 結(jié) 果 ， ELISA檢測 3種表位融合 蛋白免疫小鼠制備的鼠血清抗體效價。 B 9 5 . 8 細胞包被 E L I S A 檢測鼠免疫血清抗體效價00 . 20 . 40 . 6o z l f 6 7 o z l f 6 9 o z l f 7 1 H i s 蛋白 P B S組別抗體ELISA A490 讀數(shù)圖 15 ELISA檢測鼠免疫血清抗體效價 * ：與 His蛋白免疫組比較 * * * 結(jié) 果 選用 Ozlf67融合蛋白為診斷抗原， ELISA檢測 NPC組、 CA疾病對照組及健康對照組血清特異性 IgG抗體。 圖 16 ozlf67蛋白包被 ELISA檢測病人血清抗體效價 * ：與正常組比較 Ozlf67蛋 白包被ELISA檢 測病人血清抗體效價NPC組 CA組 正常組組別抗體ELISA A490讀數(shù)* 結(jié) 果 分組 份數(shù) A值 陽性 陰性 陽性率 NPC組 48 177。 34 13 ％ CA組 68 177。 4 64 ％ 正常組 68 177。 0 68 0 表 5 ozlf67蛋白包被 ELISA檢測病人血清抗體陽性率 * *與正常組比較 * 分 析 與 討 論 預(yù)測的 B 細胞表位是線性 B 細胞表位，主要 的參數(shù)有二級結(jié)構(gòu)、跨膜區(qū)、親水性、表面可及 性、抗原性以及柔韌性等，抗原性和親水性是形 成表位的首要條件，因而優(yōu)勢表位的形成是多種 因素綜合作用的結(jié)果。 分 析 與 討 論 采用分子生物學(xué)方法分別得到了包含預(yù)測 表位片段的重組質(zhì)粒，并得到了融合蛋白，為 進一步表位融合蛋白的免疫學(xué)檢測奠定基礎(chǔ)。 分 析 與 討 論 ? 3種表位融合蛋白均具有良好的免疫原性 ? B細胞表位多肽均能誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗體 ? 以 ， B細胞表位 融合蛋白誘導(dǎo)的小鼠免疫血清與 EBV抗原特異 性結(jié)合，但抗體效價較低，可能是由于單個表位 肽的結(jié)合能力較弱。 分 析 與 討 論 選用 Ozlf67融合蛋白為診斷抗原，ELISA檢測 NPC患者血清特異性抗體，用于 NPC的血清學(xué)診斷試劑的研制具有臨床應(yīng)用價值。 結(jié) 論 EBV LMP2的 B細胞表位可能位于其 N端 199～ 20318～ 322和 381～ 391區(qū)段； 2. 分別成功構(gòu)建了含 B細胞表位的重組質(zhì)粒pET32a(+)/ozlf6 pET32a(+)/ozlf69和 pET32a(+)/ozlf71；在原核表達系統(tǒng)內(nèi)分別高效表達了表位融合蛋白 ozlf6 ozlf6ozlf71；通過親和層析法得到了純化的表位融合蛋白。 3. 表位融合蛋白免疫小鼠血清學(xué)檢測，表明 3個 B細胞表位融合蛋白均能刺激機體產(chǎn)生抗體，具有較強的免疫原性，抗體效價隨免疫次數(shù)增加而升高；表位融合蛋白誘導(dǎo)所產(chǎn)生的抗體均能與 EBV抗原結(jié)合。 ，具有較強的抗原性，用于NPC的血清學(xué)診斷試劑的研制具有臨床應(yīng)用價值。 首先我要衷心感謝我的導(dǎo)師張麗芳教授、夏克棟教 授三年來對我的悉心指教和無私關(guān)懷。本文是在導(dǎo)師的 悉心指導(dǎo)和嚴格要求下得以完成。在此向?qū)熤乱宰钫\ 摯的敬意和感謝！ 感謝基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微免教研室和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗平臺 全體老師給予的幫助和支持！感謝附一和附二檢驗科老 師給予實驗的幫助！感謝師姐、師弟、師妹及我的同學(xué) 等對我實驗的幫助及生活的關(guān)心！ 我要衷心感謝我的家人，他們的關(guān)心和鼓勵給予我 強大的精神動力。他們?yōu)槲宜龅臒o私奉獻將使我終生 感激！ 最后感謝評審委員和參與本人論文答辯的各位專家 教授在百忙之中對本文的指導(dǎo)！ 致 謝
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