食品毒理學(xué)第六章ppt課件-資料下載頁
2025-01-05 21:25本頁面
【正文】 A 替換 谷氨酸 → 纈氨酸 T A U A 四、 機(jī)體對(duì)致突變作用的影響 常用的致突變?cè)囼?yàn) 注意事項(xiàng) 第三節(jié) 研究化學(xué)毒物致突變作用的方法 染色體分析 （ 1）染色體畸變分析 主要觀察染色體的結(jié)構(gòu)畸變和數(shù)目畸變 （ 2) 微核試驗(yàn) 能檢察出斷裂劑和有絲分裂毒物 （ 3）姐妹染色體交換試驗(yàn) 現(xiàn)在以廣泛用于篩選食品中化學(xué)物致突變 顯性致死試驗(yàn) 顯性致死試驗(yàn)：使雄性大鼠或小鼠接著受試物，然后使之與未接著該物質(zhì)的雌性大鼠或小鼠交配，觀察胚胎死亡情況。 精子畸形試驗(yàn) 已知精子畸形是決定精子形成的基因發(fā)生突變的結(jié)果。常染色體和 Y性連鎖基因突變及某些染色體重排，如性 常染色體易位，也可使精子發(fā)生畸形。小鼠精子畸形試驗(yàn)?zāi)茉u(píng)價(jià)受試物對(duì)精子生成、發(fā)育的影響，可檢測(cè)受試物在體內(nèi)對(duì)生殖細(xì)胞的遺傳毒性作用。 非程序性 DNA合成試驗(yàn) 正常情況下，于細(xì)胞有絲分裂周期中，僅 S期是 DNA合成期。當(dāng) DNA受損傷時(shí)，損傷修復(fù)的 DNA合成主要在其他細(xì)胞周期，稱程序外 DNA合成，即 UDS，因此發(fā)現(xiàn) UDS增高，即表明 DNA發(fā)生過損傷。 小鼠特異基因座試驗(yàn) 特異基因座試驗(yàn) (SLT)是利用兩種品系的小鼠，一種為 T型，其有幾個(gè)與毛色、眼色和耳型有關(guān)的隱性突變基因的純合子；另一種為 3H1或 C57BL系，不具有這些基因的野生型，使后一種小鼠接觸受試物，使之與 T系交配。如果受試物未能使相應(yīng)位點(diǎn)發(fā)生突變，則雜交一代為雜合子， T系的隱性基因不能表達(dá)，如果發(fā)生了突變，則相應(yīng)的隱性基因可于出生時(shí)或斷乳時(shí)表達(dá)。 致突變?cè)囼?yàn)中的一些問題 、陽性對(duì)照組的設(shè)立 ①陰性對(duì)照：即未處理對(duì)照或溶劑對(duì)照。 目的：獲得試驗(yàn)的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。 ②陽性對(duì)照：是用某種已知能產(chǎn)生陽性反應(yīng)的物質(zhì)作對(duì)照。 目的： *通過對(duì)陽性物質(zhì)的試驗(yàn)證明實(shí)驗(yàn)方法的可靠； *驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)者在本實(shí)驗(yàn)條件下，完成技術(shù)和鑒定致突 變物的能力； *證實(shí)經(jīng)一定時(shí)間后，本實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。 2. 體外試驗(yàn)的活化系統(tǒng) 前致突變物：本身不具致突變性，經(jīng)哺乳動(dòng)物代謝才轉(zhuǎn)化成致突變物的化學(xué)物質(zhì)。 ①哺乳動(dòng)物細(xì)胞介導(dǎo) 使用完整的細(xì)胞，特別是大鼠肝原代細(xì)胞，與測(cè)試細(xì)菌或細(xì)胞一起培養(yǎng)。 ② S9 經(jīng)酶誘導(dǎo)劑處理后制備的肝勻漿，再經(jīng) 9000g離心分離所得上清液，加上適當(dāng)?shù)木彌_液和輔助因子。 ③純化酶和基因工程 純化酶：純化的細(xì)胞色素 P450、谷光苷肽轉(zhuǎn)移酶、過氧化物酶。 基因工程：將人的細(xì)胞色素 P450基因插入組合細(xì)胞內(nèi)，再進(jìn)行致突變?cè)囼?yàn)，使細(xì)胞具有代謝活化系統(tǒng)。
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