研究生分子醫(yī)學(xué)技能實驗四-資料下載頁
2024-10-16 19:51本頁面
【正文】 啟動和延伸時核苷酸錯誤摻入，高濃度 dNTPs易產(chǎn)生錯誤摻入，而濃度太低，勢必降低反應(yīng)物的產(chǎn)量。四種 dNTP的濃度應(yīng)相同，其中任何一種濃度偏高或偏低，都會誘導(dǎo)聚合酶的錯誤摻入，降低合成速度，過早終止反應(yīng)。 ? 10 PCR反應(yīng) buffer： 已作成商品化的產(chǎn)品 ， 它包括： 250~500mmol/L KCl； 100~500mmol/LTrisHAC （ ） ；15~20mmol/L MgCl2（ 對 Taq酶的活性影響很大 ，一般濃度為 ~， 實際應(yīng)用時根據(jù)反應(yīng)體系的情況進(jìn)行調(diào)整 。 ） ； %明膠或牛血清白蛋白 ? dd H2O 調(diào)節(jié)反應(yīng)體積 ? 液體石蠟油 影響 PCR的主要因素 ① PCR反應(yīng)體系的各個組分 ② PCR循環(huán)的溫度 （ 預(yù)變性 、 變性 、 退火 、 延伸 ） ③ PCR循環(huán)的次數(shù)和平臺效應(yīng) ④ 操作環(huán)境 平臺效應(yīng)及其原因 三、結(jié)果分析與問題討論
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