【正文】 靜置 6 min； 在 實驗 最大吸收波長 510 nm處測定吸光度，得酶解溫度 對藕節(jié) 中總黃酮得率結(jié)果的影響， 如圖 24所示 。 圖 24 酶解溫度對藕節(jié) 中總 黃酮得率的影響 由圖 24 可知，隨著酶 解 溫度的增大 藕節(jié)中總 黃酮 得率增大 ，當 解 酶溫度為 55℃時 得率 有最大值，而后隨著酶解溫度的 升高 總黃酮得率 反而減小，實驗 結(jié)果表明藕節(jié)中總黃酮得率 較佳的 酶解溫度為 55℃ 。 酸堿度 對 藕節(jié) 中總 黃酮得率 的影響 分別用 吸量管 精確取 mL于 50 mL的容量瓶中加入 mL 5%亞硝酸鈉溶液振蕩，靜置 6 min； 加入 mL 10%硝酸鋁溶液振蕩，靜置 6 min； 加入 mL 1 mol/L氫氧化鈉溶液，用 70%的乙醇定容至刻度線，靜置 6 min； 在 最大吸收波長 510 nm處測定吸光度，得 酸堿度 對藕節(jié) 中總黃酮得率 結(jié)果 的影響， 如圖 25所示 。 圖 25 酸堿度 對藕節(jié) 中總 黃酮得率的影響 楚雄師范學院本科論文（設(shè)計） 7 由圖 25可知，隨著 pH 值增大 藕節(jié)中總 黃酮得率增大，當 pH 值為 得率 有最大值，而后隨著 pH值 的 增大 總黃酮得率 反而減小， 實驗結(jié)果表明藕節(jié)中總黃酮得率較佳的 pH值為 。 酶 解時間 對 藕節(jié) 中總 黃酮得率的影響 分別用 吸量管 精確取 50 mL 的容量瓶中加入 mL 5%亞硝酸鈉溶液振蕩，靜置 6 min； 加入 mL 10%硝酸鋁溶液振蕩，靜置 6min； 加入 mL 1 mol/L氫氧化鈉溶液，用 70%的乙醇定容至刻度線，靜置 6 min； 在 最大吸收波長 510 nm處測定吸光度 ，得酶 解時間 對藕節(jié)黃酮得率結(jié)果 的 影響，如圖 26所示 。 圖 26 酶解時間對藕節(jié) 中總 黃酮得率的影響 由圖 26可知，隨著酶解時間的增加藕節(jié)中總 黃酮得率 增加 ，當酶解時間為 h時 得率 有最大值，而后隨著酶解時間的 增加 藕節(jié)中 總黃酮得率 反而減小，實驗結(jié)果表明藕節(jié)中總黃酮得率較佳的酶解時間為 h。 正交實驗 結(jié)果 根據(jù)單因素實驗，按 L9（ 34）正交實驗的要求，確定按表 22的數(shù)值進行 正交 實驗。 表 22 因素水平表 水平 A 酶濃度 (mg/ml) B酶解溫度 /℃ C pH值 D酶解時間 /h 1 50 2 55 3 60 由表 23可知，用 70%乙醇溶液作提取溶劑，酶濃度 mg/mL， 酶解溫度 55℃ ， pH值 為 ，酶解時間為 h，即 A1B2C2D3為 藕節(jié)中總黃酮提取的較 佳 提取 條件。從表 33 中看出 A 酶濃度（ mg/mL)的極差最小，為最小誤差項，各 單 因素 對酶輔助 法提取 藕節(jié) 黃酮類化合物的影響程度為 : B（酶 解溫度 ）＞ D（酶解 時間 ）＞ C（ pH值）＞ A（酶解 濃度 ）。 楚雄師范學院本科論文（設(shè)計） 8 表 23 正交 實驗 結(jié)果 實驗序號 因素 水平 總黃酮 得率/% A B C D 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K2 K3 R 按照正 交實驗所確定的最佳提取條件進行驗證性實驗， 做三次 平行實驗 ， 藕節(jié) 中黃酮的平均得率為 % ， 驗證 實 驗結(jié)果如表 24。 表 24 較 佳組合驗證實驗結(jié)果 吸光度 黃酮得率（ %） 黃酮平均得率（ %） 由此可知，采用酶 輔助法 提取藕節(jié)中 總 黃酮 得率 為 %。 乙醇回流法提取藕節(jié)中的總黃酮實驗結(jié)果 按 ， 測得藕節(jié) 中黃酮的平均得率為 % ，驗證 實驗 結(jié)果如表 25。 表 24乙醇 回流 法 提取 藕節(jié)中總黃酮 結(jié)果 吸光度 黃酮得率（ %） 黃酮平均得率（ %） 由此可知，采用 乙醇 回流 法 提取藕節(jié)中總 黃酮 得率 為 %。 3 結(jié)論 與討論 本 論文采用 酶 輔助法 提取 藕節(jié)中的總黃酮， 考查了酶濃度、酶解溫度、 pH值及酶解時間， 四個單 因 素對藕節(jié) 中總 黃酮得率的影響，最后通過正交實驗確定最佳提取條件 為 ： 70%乙醇作提取劑，濃度 為 mg/mL， 酶解溫度 55℃ ， pH值 為 ，酶解時間為 h。 最終藕節(jié)總黃酮得率為 %。 本論文 與乙醇回流提取相比得率提高了 %，說明 酶 輔助法有一定的優(yōu)異性。 楚雄師范學院本科論文（設(shè)計） 9 參考文獻 [1] 李瓊，施興風，李學輝 .蕓豆種子黃酮類化合物的抗氧化性研究 [J].種子， 2021， 28（ 12）： 7778． [2] 陳叢瑾，黃克瀛，李德良等 .植物中黃酮類化合物的提取方法研究概況 [J].生物質(zhì)化學工程， 2021，41（ 3）： 4246． [3] 余美料，陳鎮(zhèn)，黎海妮等 .蓮藕總黃酮的提取及鑒別 [J].右江民族醫(yī)學院學報， 2021， 1（ 27）： 9697． [4] 姚曉琳，朱新榮，段春紅等 .酶解法提取甜橙皮黃酮研究 [J].糧食與油脂， 2021， 2： 4246． [5] 許金蓉，王清章 .蓮藕中黃酮含量與分布研究 [J].湖北農(nóng)業(yè)科學， 2021， 2（ 50）： 386388． [6] 宋曉凱，吳立軍 .天然藥物化學 [M].北京：化學工業(yè)出版社， [7] 任倩，李志平，楊朝霞 .酶輔助乙醇法提取土茯苓總黃酮條件研究 [J].研究簡報， 2021,9:4648 [8] 劉曉光，毛波，胡立興．酶解法提取山楂黃酮的工藝 [J].食品研究與發(fā)展， 2021,8（ 31）： 5659． 、[9] 周春華，陶俊，李良?。徟旱幕瘜W成分與生物活性研究進展 [J].氨基酸和生物資源， 2021， 29（ 4）： 6369．楚雄師范學院本科論文（設(shè)計） 10 致謝 本論文從選題和開題、實驗設(shè)計和操作、論文撰寫和最終完成等各個環(huán)節(jié)都凝聚了楚雄師范學院化生系全體教師的心血和智慧。感謝我的導(dǎo)師李會端老師及無機教研室主任宋建梅老師和管春平老師在整個論文完成過程中的悉心指導(dǎo)與大力幫助，在此謹向無機教研室的各位老師致以最衷心的感謝。 最后我要感謝化生系所有的教師四年來在學習上的指導(dǎo)、生活上的幫助。感謝我的家人、同學和朋友一 路上的陪伴、鼓勵和支持。