改-艾滋病實(shí)驗(yàn)室的建立、生物安全要求及管理-資料下載頁(yè)
2025-09-03 11:34本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】保護(hù)被試驗(yàn)因子免受污染。動(dòng)物或植物都是一個(gè)現(xiàn)實(shí)的或潛在的危險(xiǎn)。一般健康工作者感染HIV的幾率是非常低。皮膚感染47例，單次HIV暴露的危險(xiǎn)性是%。護(hù)措施仍處于較為初級(jí)的階段。專家提出，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)導(dǎo)致醫(yī)務(wù)工作者發(fā)生生物安全事故的避免措施及辦。通過(guò)此課件的學(xué)習(xí)，使學(xué)員熟悉艾滋病實(shí)驗(yàn)室的分類及其職能，充。分掌握各類艾滋病實(shí)驗(yàn)室的必須配置和應(yīng)具備的管理制度。只占全部感染的18％，不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染卻高達(dá)82％。感染的研究表明，大多數(shù)可能由于病原微生物形成的感染性氣溶膠在空氣擴(kuò)散，有十分積極的作用，艾滋病實(shí)驗(yàn)室可分為幾類？不同類別的艾滋病實(shí)驗(yàn)室的主要職能和應(yīng)具備的條件是。①承擔(dān)全國(guó)艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)建設(shè)的業(yè)務(wù)技術(shù)指導(dǎo)和評(píng)價(jià)工作。艾滋病診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)估。包括艾滋病確證中心實(shí)驗(yàn)室：省級(jí)疾病預(yù)防控制中心。病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室人員技術(shù)培訓(xùn)。⑤建立職責(zé)范圍內(nèi)的艾滋病檢測(cè)樣品庫(kù)和質(zhì)控品庫(kù)。料庫(kù)和艾滋病檢測(cè)資料數(shù)據(jù)庫(kù)。定期向省級(jí)衛(wèi)生行
【正文】 防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。將試管裝入專用帶蓋的容器內(nèi)，容器的材料要易于消毒處理。 第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)易于消毒。在第三層容器外面要貼標(biāo)簽（數(shù)量，收、發(fā)件人）。 感染性廢棄物 的 處理 ① 廢棄物處置應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（ GB 194892020）和《消毒技術(shù)規(guī)范》（ 2020年版）。 ② 艾滋病實(shí)驗(yàn)室所有廢棄物，包括樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。 ③ 高壓蒸汽消毒， 121℃ ，保持 15?20min。 四、 艾滋病相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 特異性實(shí)驗(yàn)診斷 ① HIV抗體測(cè)定 ② HIV抗原的測(cè)定 ③ 核酸測(cè)定 ④ CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù) 患者 治療前評(píng)估 ⑴ 艾滋病常規(guī) HIV抗體檢測(cè) ⑵ CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù) ⑶ HIV的 RNA檢測(cè) ⑷ 全血細(xì)胞計(jì)數(shù)、肝 功、腎功、尿常規(guī) ⑸ 血糖、血脂檢查 ⑹ 肝炎標(biāo)志物檢測(cè)（ HAV、 HBV、 HCV） ⑺ HIV－ RNA1000kp/ml，基因型耐藥檢測(cè)（建議對(duì)進(jìn)入臨床關(guān)懷的所有患者進(jìn)⑻ PAP涂片 ⑼ PPD、 interferonγ release assay (IGRA) ⑽ 弓形蟲(chóng)抗體 IgG ⑾ RPR /VDRL ⑿ 衣原體、淋病雙球菌檢測(cè)－ STD治療 ⒀ 胸部 X線 ⒁ 輔助受體嗜性（ Tropism ） 檢測(cè) ⒂ HLAB*5701 檢測(cè) 常用藥物不良反應(yīng)監(jiān)測(cè) ① AZT： 嚴(yán)重貧血 ， 監(jiān)測(cè)血常規(guī) ② DDI： 胰腺炎 ， 監(jiān)測(cè) AMY ③ NVP： 皮疹和嚴(yán)重肝損害 ， 監(jiān)測(cè)肝功 11 ⑤ PI： 脂代謝、糖代謝異常 ，監(jiān)測(cè) 血脂、血糖 五、 HIV特殊檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室具體要求及功能分區(qū) （一） 血清學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室 ：必須具備 生物安全柜 （ 生物安全二級(jí) ）； 加氧 離心機(jī) ；冰箱 ； 酶標(biāo)儀，洗板機(jī) ；加樣器 。 （二） CD4檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室 ：具備 樣品處理區(qū) ； 流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū)。 CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃 建議 分 為 兩個(gè)房間，一是樣本準(zhǔn)備區(qū)， 二 是樣本檢測(cè)和分析區(qū)。 樣本的準(zhǔn)備區(qū)， 要求 房間 進(jìn) 出口之后有樣本接受區(qū) 和 樣本的存放區(qū)， 應(yīng)具備處理樣本的生物安全柜和冰箱。 樣本檢測(cè) 和分析 區(qū) ，必須具備 流 式細(xì)胞儀和其的一些 輔助 設(shè)備，包括 計(jì)算機(jī) 、打印機(jī) 、 結(jié)果分析和發(fā)布區(qū)。 實(shí)驗(yàn)室氣流要求從樣本準(zhǔn)備區(qū) 流動(dòng) 到樣本檢測(cè) 和分析 區(qū)。 樣品準(zhǔn)備區(qū)： 應(yīng)達(dá)到生物安全 二 級(jí)（ BSL2）實(shí)驗(yàn)室要求，用于樣品處理、流式檢測(cè)樣品制備。 須具備 生物安全柜 、 移液器、冰箱、漩渦混勻器 和 離心機(jī) 。 流式細(xì)胞 檢測(cè)區(qū) ：必備 流式細(xì)胞儀，流式細(xì)胞儀檢測(cè)區(qū)是 用于 完成 制備的樣本 進(jìn)行 上機(jī) 檢測(cè)。 （三） HIV核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室 要求分四個(gè)區(qū)域：試劑準(zhǔn)備區(qū)；標(biāo)本制備區(qū)； 擴(kuò) 增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。 臨床的 PCR診斷實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案 （如圖） ① 實(shí)驗(yàn)材料 , 只能從擴(kuò)增前區(qū) 流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)→樣品處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動(dòng)。 ② 實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。 ③ 盡量減少人員由擴(kuò)增后區(qū)返回?cái)U(kuò)增前區(qū)的頻度。 工作流向 專用走廊 產(chǎn)物分析區(qū) 擴(kuò)增區(qū) 標(biāo)本制備區(qū) 試劑準(zhǔn)備區(qū) 緩沖區(qū) 緩沖區(qū) 緩沖區(qū) 空氣流向 空氣流向 空氣流向 空氣流向 針對(duì) HIV的特異性的實(shí)驗(yàn)室檢查，包括 HIV抗體的檢查 、 CD4+T淋巴細(xì)胞的檢查或者 HIV核酸的測(cè)定等 ，那么，對(duì) 特殊實(shí)驗(yàn)室有 哪 些特殊的要求和功能分區(qū) 呢？ 12 標(biāo)本制備區(qū) 要求有生物安全柜 、 樣本 冰箱 、可調(diào) 移液器一套 （ 包括小量程、中量程 和 大量程 ）、 帶濾芯（防止氣溶膠）及無(wú) RNA酶的吸嘴 、臺(tái)式微型離心機(jī)（最大 RCF 16000?g，最小 RCF12500?g）、試管架、渦旋器、 無(wú)菌的 EP管 、 加熱塊 等。 標(biāo)本制備區(qū)的功能是 臨床標(biāo) 本的保存，核酸 (RNA、 DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定 RNA時(shí) cDNA的合成。 擴(kuò)增區(qū) 要求有螺式的 Cobas擴(kuò)增儀 、 RTPCR擴(kuò)增儀 、 NucliSens EasyQ、 普通 PCR儀，熒光定量 PCR儀 及專用工作服 等。 擴(kuò)增區(qū) 是 DNA或者 cDNA擴(kuò)增的區(qū)域。 此外，已制備的 DNA模板和合成的 cDNA（ 來(lái)自樣本制備區(qū) ） 的加入和主反應(yīng)混合液 （ 來(lái)自試劑貯存和制備區(qū) ） 制備成反應(yīng)混合液等 亦可 在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。 在巢式 PCR測(cè)定中，通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管，因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性，第二次加樣必 須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。 產(chǎn)物分析區(qū) 要求 有 孵箱 、 酶標(biāo)儀 、 洗板機(jī) 、 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 及 專用工作服 ，可能還需要 跑膠系統(tǒng) 和 凝膠成像系統(tǒng) 。 產(chǎn)物分析區(qū)功能是用來(lái)進(jìn)行擴(kuò)增片斷的測(cè)定。 艾滋病的職業(yè)暴露是指醫(yī)務(wù)工作者、實(shí)驗(yàn)室工作人員及有關(guān)監(jiān)管人員在從事 HIV/AIDS 診斷、治療、護(hù)理、預(yù)防、檢驗(yàn)、管理工作過(guò)程中，暴露于含有 HIV 的血液、體液和實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)液而引起的危害 。實(shí)驗(yàn)室人員的安全教育，是防止實(shí)驗(yàn)室感染的重要措施。除此之外，還應(yīng)健全改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室的配置和功能分區(qū)，完善實(shí)驗(yàn)室條例制度，從根本上控制職業(yè)危險(xiǎn)。
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