生化chapter0307aminoacidsa(1)-資料下載頁(yè)
2025-05-14 22:11本頁(yè)面
【正文】 (組 ) (纈 ) 十肽順序 肽段氨基酸順序測(cè)定 ?一般可用蛋白酶或酸直接水解原來(lái)的蛋白質(zhì)，從部分水解產(chǎn)物中分離出含有二硫鍵的肽段，所得到的肽段混合物可用 Brown及 Harltay的對(duì)角線電泳技術(shù)進(jìn)行分離，確定二硫鍵位置。 ?一般用胃蛋白酶水解原來(lái)的含二硫鏈的蛋白質(zhì)。因?yàn)槲傅鞍酌笇Ｒ恍暂^低，切點(diǎn)多，這樣生成的肽段（包括含有二硫橋的肽段）都比較小，后面的分離、鑒定工作均比較容易進(jìn)行。其次是胃蛋白酶的 pH在酸性范圍（ 1～ 2），有利于防止二硫鍵發(fā)生交換反應(yīng)而造成麻煩。 二硫鍵位置測(cè)定 二硫鍵位置測(cè)定 Brown和 Hartlay對(duì)角線電泳圖解 + + 第二向 第一向 a b 圖中 a、 b兩個(gè)斑點(diǎn)是 由一個(gè)二硫鍵斷裂產(chǎn)生的肽段。 二硫鍵位置測(cè)定 一級(jí)結(jié)構(gòu)的生物學(xué)意義 ?生物形態(tài)與分子結(jié)構(gòu)在進(jìn)化過(guò)程中是向著多樣化和專一化方向發(fā)展的。 ?蛋白質(zhì)的合成是受核酸控制的，但是隨著生物環(huán)境的變化， DNA也會(huì)發(fā)生偶然的突變，這將必然影響蛋白質(zhì)的生物合成，引起蛋白質(zhì)某些氨基酸的變化。 ?氨基酸的改變可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能喪失或更加完善。 一級(jí)結(jié)構(gòu)的進(jìn)化 ?β 半乳糖苷酶是一種催化半乳糖水解為單糖的水解酶蛋白，在細(xì)菌、真菌、動(dòng)物和人體內(nèi)均被發(fā)現(xiàn)。 ?來(lái)源于細(xì)菌中的 β 半乳糖苷酶為四聚體。 ?每個(gè)亞基又有五個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域組成。 ?在第三個(gè)結(jié)構(gòu)域中存在 α/β 或稱為“ TIM” 桶的結(jié)構(gòu)，酶的活性中心就存在于該結(jié)構(gòu)的 C末端。因此，該酶蛋白具有四個(gè)活性中心。 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)與高級(jí)結(jié)構(gòu) β 半乳糖苷酶的立體結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)與高級(jí)結(jié)構(gòu) ?血紅蛋白是高等動(dòng)物體內(nèi)負(fù)責(zé)運(yùn)載氧的一種蛋白質(zhì)。 ?人體血紅蛋白由四個(gè)亞基構(gòu)成，分別為兩個(gè) α 亞基（ 141個(gè)殘基）和兩個(gè) β 亞基（ 146個(gè)殘基），可以自動(dòng)組裝成α2β2 的形態(tài)。 ?每個(gè)亞基的血紅素結(jié)合 1分子氧，血紅蛋白四聚體可結(jié)合 4分子氧。 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)與高級(jí)結(jié)構(gòu) ?分子病是指由于基因突變導(dǎo)致蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變異，使蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能減退或喪失，從而造成生物體生理功能變化而引起的疾病，鐮刀形紅細(xì)胞貧血病的血紅細(xì)胞成鐮刀狀，容易發(fā)生溶血，從而造成嚴(yán)重貧血。 ?原因是患者血紅蛋白（ HbS）與正常人血紅蛋白（ HbA） β 亞基中有一個(gè)氨基酸殘基不同。 β鏈 N端氨基酸序列 1 2 3 4 5 6 7 8 HbS（患者） Val－ His－ Leu－ Thr－ Pro－ Val－ Glu－ Lys HbA（正常人） Val－ His－ Leu－ Thr－ Pro－ Glu－ Glu－ Lys 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)與高級(jí)結(jié)構(gòu) 正常紅細(xì)胞（左）與鐮刀形紅細(xì)胞（右） 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)與高級(jí)結(jié)構(gòu) 9fluorenyl(芴基 ) methoxycarbobyl (Fmoc) Group 5. 蛋白質(zhì)或多肽的人工合成 ?多肽合成就是把氨基酸按一定的順序排列起來(lái)，利用氨基和羧基的脫水形成肽鍵，進(jìn)而得到人們所需要結(jié)構(gòu)的多肽。 5. 蛋白質(zhì)或多肽的人工合成
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