離子交換柱層析法分離氨基酸-資料下載頁
2025-05-13 06:35本頁面
【正文】 開動(dòng)衡流泵 ， 以 24ml/h流速平衡 ， 直至流出液 pH與洗脫液相同 。 4. 加樣 揭去層析柱上口蓋子 ， 待柱內(nèi)液面至樹脂表面 1－ 2mm關(guān)閉出口 ， 沿管壁四周小心加入 ， 慢慢打開出口 ， 同時(shí)開始收集流出液 。 當(dāng)樣品液彎月面靠近樹脂頂端時(shí) ， 即刻加入少量檸檬酸緩沖液沖洗加樣品處數(shù)次 ， 然后注入檸檬酸緩沖液至液面高 3－ 4cm左右 ， 接恒流泵 。 5. 洗脫 以緩沖液洗脫 ， 開始用試管收集洗脫液 ， 每管收集 1mL， 共收集 60— 80管 。 6． 洗脫及氨基酸的鑒定 向各管收集液中加 1mL水合茚三酮顯色劑并混勻 ， 在沸水浴中準(zhǔn)確加熱 5min后冷卻至室溫 ， 再加入 3mL的 %硫酸銅溶液 。 混勻 ， 以收集液第 2管為空白 ， 測(cè)定 A570波長(zhǎng)的光吸收值 ， 以光吸收值為縱坐標(biāo) ， 以洗脫液體積為橫坐標(biāo)繪制洗脫曲線 。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 根據(jù)氨基酸的解離性質(zhì) ， 分析該實(shí)驗(yàn)條件下氨基酸從層析柱洗脫下來的順序 。 Separation of amino acids on a cation exchange column 注意事項(xiàng) 在裝柱時(shí)必須防止氣泡 、 分層及柱子液 面在樹脂表面以下等現(xiàn)象發(fā)生 。
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