沉淀反應與凝集反應yhl-資料下載頁
2025-05-10 20:20本頁面
【正文】 抗體球蛋白 帶負電荷較少，籍電滲作用向負極 泳動 ＋ 對流免疫電泳 通電 結果分析： ? 無沉淀線出現則表明無相應的抗原。 ? 沉淀線位于抗原抗體孔中間，說明兩者比例較適合。 ? 沉淀線偏向抗原孔一方，表示抗體濃度＞抗原，反之，則是抗體濃度＜抗原濃度。 對流免疫電泳 電泳時凝膠中 抗體不移動 ， 樣品孔中的抗原向正極泳動 ，隨著抗原量的逐漸減少，抗原泳動的基底區(qū)越來越窄，抗原抗體分子復合物形成的沉淀線逐漸變窄，形成一個形狀如火箭的不溶性復合物沉淀峰， 抗體濃度固定時，峰的高度與抗原量呈正相關 。 二、火箭免疫電泳 ： 單向免疫擴散＋電泳，定量檢測技術 2. 技術要點： %巴比妥瓊脂糖約 55℃ ，加入適量抗血清，混勻后制板，打孔，孔內加待測樣品，樣品孔放負極側， 6h后觀察瓊脂板上沉淀峰，繪制標準曲線，求出待測樣品濃度。 3. 影響因素： ?瓊脂（無電滲或電滲很小的）影響火箭形狀不規(guī)則 。 ?電泳終點時間的確定 。 ?標本數量多時應先通電后加樣 ,防止寬底峰形 。 ?IgG定量時，可用甲醛與 IgG上的氨基結合（甲?；?，抵消了電滲作用。 火箭免疫電泳圖 ①②③④ 為標準抗原； ⑤⑥ 為標本 + 三、免疫電泳 一）原理： 區(qū)帶電泳＋雙向擴散 。 蛋白質抗原在電場中，由于 遷移率 （取決于其 分子量 的大小和所帶 凈電荷 的多少）不同，其泳動速度不同，將復合蛋白質在凝膠中電泳分成肉眼不可見的若干區(qū)帶。 沿電泳方向挖一與之平行的抗體槽，加入相應抗血清進行雙向擴散 。 二）技術要點： 制備瓊脂板，打孔，加樣于孔內，電泳 2～ 3mA/cm ，～ 1h后，槽內加入相應抗血清作雙向擴散。 三）影響因素 ① 抗原抗體比例不當 ,需測抗原抗體最適比 。 ② 抗血清的抗體譜，混合抗血清的使用 。 ③ 電泳條件直接影響分辨率。 四）應用 純化抗原和抗體成分的分析及正常和異常免疫球蛋的識別與鑒定 1. 什么是沉淀反應？ 2. 沉淀反應的特點？ 3. 單向擴散試驗的原理和應用？ 4. 什么叫直接凝集反應，什么叫間接凝集反應？它們之間有何異同？ 5. 敘述間接血凝試驗的原理。 思考題
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