電鏡樣品的制備(2)-資料下載頁
2025-05-09 22:27本頁面
【正文】 方法：干燥的樣品 →雙刀切割 →粘樣鍍膜 →觀察 新切面 一、組織內(nèi)部結(jié)構(gòu)簡易剖出法： 適用于肝臟等實(shí)質(zhì)性器官以及密度大的組織 ： 方法：切痕 →掰開 →粘樣 →鍍膜觀察 適用于纖維組織、顆粒樣品 方法：干燥 →粘樣 →拉斷 →鍍膜觀察 二、環(huán)氧樹脂割斷法 ： 環(huán)氧樹脂 包埋樣品 固 化 敲 斷 溶去 樹脂 干燥 鍍膜 觀 察 80℃ 小錘敲擊刀背 三、冷凍割斷法： 常用二甲基亞砜 (DMSO)冷凍割斷法 取材 固定 清 洗 保護(hù) 包埋 固 化 斷 裂 融化 保護(hù)液 清洗 干燥 鍍膜 觀察 DMSO過渡， %， 25%， 50% 各 20~30分鐘， 緩沖液 液氮 冷卻 敲擊 斷裂 50%DMSO 四、管道鑄型法 為觀察 腔形器官 內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的 立體構(gòu)筑 和 分布情況 ， 而設(shè)計(jì)的制樣方法。 鑄型劑注入 官腔內(nèi)，待 其固化成形 后，用腐蝕 劑去掉組織， 從而使反映 官腔真實(shí)情 況的鑄型樣 品保留下來， 經(jīng)干燥鍍膜 后觀察分析 . 插圖 犬腎髓旁血管鑄型 犬腎小葉間動(dòng)脈 腎髓質(zhì)血管分布 腎小體 球動(dòng)脈 葉間動(dòng)脈 出球小動(dòng)脈 ： ?鑄型劑應(yīng)具有適當(dāng)?shù)酿ざ龋合喈?dāng) 20~50%的甘油黏度； ?鑄型劑成型后應(yīng)具有耐腐蝕，干燥不變形、脆裂、耐高溫； ?控制灌注壓力： 100mmHg左右，與組織和鑄型劑有關(guān)。 ： （ 1）鑄型劑：聚氯乙烯、甲基丙烯酸、丙烯酸單體、樹脂 類、工程塑料。 60℃ 下進(jìn)行半聚合，調(diào)節(jié)黏度適中。 （ 2）器官處理：摘取新鮮器官，生理鹽水由動(dòng)脈注入清洗， 1%戊二醛灌流固定，確保效果。 （ 3）加入硬化劑：灌注前加入， 10分鐘即可硬化。 （ 4）灌注鑄型： 控制注入壓力 ，確保完全注入而不變形 。 （ 5）樣品腐蝕清洗： 10~20%的 NaOH或 20~50%的鹽酸中， 常溫下約 7天，提高溫度可縮短腐蝕時(shí)間 。 （ 6）清洗、修整、干燥 (37℃ 1h)、即可鍍膜觀察。 五、離子蝕刻法 利用離子濺射儀輝光放電時(shí)產(chǎn)生的 陰離子 (電子 )沖擊 樣品 表面，使樣品表面的成分被剝離， 暴露 出樣品 內(nèi)層結(jié)構(gòu) 。 切割 斷裂：界面 斷開 蝕刻：表面 剝離 表面剝離使內(nèi)部結(jié)構(gòu)暴露 花粉破壁
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