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第一部分:光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)-資料下載頁

2025-08-26 11:41本頁面

【導(dǎo)讀】早在公元前一世紀(jì),人們就已發(fā)現(xiàn)通過球形透明物體去觀察微小物體時(shí),可以使其放大成像。后來逐漸對(duì)球形玻璃表面能使物體放大成像的規(guī)律有了認(rèn)識(shí)。1590年,荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。路結(jié)構(gòu),當(dāng)時(shí)的光學(xué)工匠遂紛紛從事顯微鏡的制造、推廣和改進(jìn)。17世紀(jì)中葉,英國(guó)的胡克和荷蘭的列文胡克,都對(duì)顯微鏡的發(fā)展做出了卓越的貢獻(xiàn)。前后,胡克在顯微鏡中加入粗動(dòng)和微動(dòng)調(diào)焦機(jī)構(gòu)、照明系統(tǒng)和承載標(biāo)本片的工作臺(tái)。不斷改進(jìn),成為現(xiàn)代顯微鏡的基本組成部分。1673~1677年期間,列文胡克制成單組元放大鏡式的高倍顯微鏡,其中九臺(tái)保存至今。和列文胡克利用自制的顯微鏡,在動(dòng)、植物機(jī)體微觀結(jié)構(gòu)的研究方面取得了杰出成就。的生物學(xué)家和醫(yī)學(xué)家發(fā)現(xiàn)細(xì)菌和微生物提供了有力的工具。發(fā)生折射現(xiàn)像,這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。性能高低的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小,分別標(biāo)刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。

  

【正文】 一些特殊要求: a. 環(huán)狀光闌( Ring slit) : 裝在聚光鏡的下方,而與聚光鏡組合為一體 相襯聚光鏡。它是由大小不同的環(huán)形光闌裝在一圓盤內(nèi),外面標(biāo)有 10X、 20X、 40X、 100X 等字樣,與相對(duì)應(yīng)倍數(shù)的物鏡配合使用。 b. 相板( Phase plate) : 裝在物鏡的后焦平面處,它分為兩部分,一是通過直射光的北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話: 01082895262 傳真: 01082895263 13 部分,為半透明的環(huán)狀,叫共軛面;另一是通過衍射光的部分, ?quot。補(bǔ)償面 ”。有相板的物鏡稱 ”相襯物鏡 ”,外殼上常有 ”Ph”字樣。 相襯鏡檢法是一種比較復(fù)雜的鏡檢方法,想要得到好 的觀察效果,顯微鏡的調(diào)試非常重要。除此之外還應(yīng)注意以下幾個(gè)方面: a. 光源要強(qiáng),全部開啟孔徑光闌; b. 使用濾色片,使光波近于單色。 6. 微分干涉對(duì)比顯微鏡( Differential interference contrast DIC) 微分干涉對(duì)比鏡檢術(shù)出現(xiàn)于 60 年代,它不僅能觀察無色透明的物體,而且圖像呈現(xiàn)出浮雕壯的立體感,并具有相襯鏡檢術(shù)所不能達(dá)到的某些優(yōu)點(diǎn),觀察效果更為逼真。 ( 1) 原理 微分干涉對(duì)比鏡檢術(shù)是利用特制的渥拉斯頓棱鏡來分解光束。分裂出來的光束的振動(dòng)方向相互垂直且強(qiáng)度相等,光束分 別在距離很近的兩點(diǎn)上通過被檢物體,在相位上略有差別。由于兩光束的裂距極小,而不出現(xiàn)重影現(xiàn)像,使圖像呈現(xiàn)出立體的三維感覺。 ( 2) 微分干涉對(duì)比鏡檢術(shù)所需的特殊部件: a. 起偏鏡 b. 檢偏鏡 c. 渥拉斯頓棱鏡 2 塊 ( 3) 微分干涉對(duì)比鏡檢時(shí)的注意事項(xiàng) a. 因微分干涉靈敏度高,制片表面不能有污物和灰塵。 b. 具有雙折射性的物質(zhì),不能達(dá)到微分干涉對(duì)比鏡檢的效果。 c. 倒置顯微鏡應(yīng)用微分干涉時(shí),不能用塑料培養(yǎng)皿。 7. 倒置顯微鏡( Inverted microscope) 倒置顯微鏡是為了適應(yīng)生物學(xué)、 醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的組織培養(yǎng)、細(xì)胞離體培養(yǎng)、浮游生物、環(huán)境保護(hù)、食品檢驗(yàn)等顯微觀察。 由于上述樣品特點(diǎn)的限制,被檢物體均放置在培養(yǎng)皿(或培養(yǎng)瓶)中,這樣就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離很長(zhǎng),能直接對(duì)培養(yǎng)皿中的被檢物體進(jìn)行顯微觀察和研究。因此,物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,故稱為 ”倒置顯微鏡 ”。倒置顯微鏡多用于無色透明的活體觀察。如果用戶有特殊需要,也可以選配其它附件,用來完成微分干涉、熒光及簡(jiǎn)易偏光等觀察。 目見倒置顯微鏡廣泛應(yīng)用于 patchclamp ,transgene ICSI 等領(lǐng)域。 8. 數(shù)碼顯微鏡 數(shù)碼顯微鏡是以攝像頭(即電視攝像靶或電荷耦合器)作為接收元件的顯微鏡。在顯微鏡的實(shí)像面處裝入攝像頭取代人眼作為接收器,通過這種光電器件把光學(xué)圖像轉(zhuǎn)換成電信號(hào)的圖像,然后對(duì)之進(jìn)行尺寸檢測(cè)、顆粒計(jì)數(shù)等工作。這類顯微鏡可以與計(jì)算機(jī)聯(lián)用,這便于實(shí)現(xiàn)檢測(cè)和信息處理的自動(dòng)化,多應(yīng)用于需要進(jìn)行大量繁瑣檢測(cè)工作的場(chǎng)合。 六、 光學(xué)顯微鏡的使用規(guī)程 北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話: 01082895262 傳真: 01082895263 14 (一) 實(shí)驗(yàn)時(shí)要把顯微鏡放在座前桌面上稍偏左的位置,鏡座應(yīng)距桌沿 6~ 7 cm 左右。 (二) 打開光源開關(guān),調(diào)節(jié)光強(qiáng)到合適大小。 (三) 轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,使低倍鏡頭 正對(duì)載物臺(tái)上的通光孔。先把鏡頭調(diào)節(jié)至距載物臺(tái) 1~ 2cm左右處,然后用左眼注視目鏡內(nèi),接著調(diào)節(jié)聚光器的高度,把孔徑光闌調(diào)至最大,使光線通過聚光器入射到鏡筒內(nèi),這時(shí)視野內(nèi)呈明亮的狀態(tài)。 (四) 將所要觀察的玻片放在載物臺(tái)上,使玻片中被觀察的部分位于通光孔的正中央,然后用標(biāo)本夾夾好載玻片。 (五) 先用低倍鏡觀察(物鏡 10X、目鏡 10x)。觀察之前,先轉(zhuǎn)動(dòng)粗動(dòng)調(diào)焦手輪,使載物臺(tái)上升,物鏡逐漸接近式樣。然后,左眼注視目鏡內(nèi),同時(shí)右眼不要閉合(要養(yǎng)成睜開雙眼用顯微鏡進(jìn)行觀察的習(xí)慣,以便在觀察的同時(shí)能用右眼看著繪圖), 并轉(zhuǎn)動(dòng)粗動(dòng)調(diào)焦手輪,使載物臺(tái)慢慢下降,不久即可看到玻片中材料的放大物像。 (六) 如果在視野內(nèi)看到的物像不符合實(shí)驗(yàn)要求(物像偏離視野),可慢慢調(diào)節(jié)載物臺(tái)移動(dòng)手柄。調(diào)節(jié)時(shí)應(yīng)注意玻片移動(dòng)的方向與視野中看到的物像移動(dòng)的方向正好相反。如果物像不甚清晰,可以調(diào)節(jié)微動(dòng)調(diào)焦手輪,直至物像清晰為止。 (七) 如果進(jìn)一步使用高倍物鏡觀察,應(yīng)在轉(zhuǎn)換高倍物鏡之前,把物像中需要放大觀察的部分移至視野中央(將低倍物鏡轉(zhuǎn)換成高倍物鏡觀察時(shí),視野中的物像范圍縮小了很多)。一般具有正常功能的顯微鏡,低倍物鏡和高倍物鏡基本齊焦,在用低倍物 鏡觀察清晰時(shí),換高倍物鏡應(yīng)可以見到物像,但物像不一定很清晰,可以轉(zhuǎn)動(dòng)微動(dòng)調(diào)焦手輪進(jìn)行調(diào)節(jié)。 (八) 在轉(zhuǎn)換高倍物鏡并且看清物像之后,可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)孔徑光闌的大小或聚光器的高低,使光線符合要求(一般將低倍物鏡換成高倍物鏡觀察時(shí),視野要稍變暗一些,所以需要調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱)。 (九) 觀察完畢,應(yīng)先將物鏡鏡頭從通光孔處移開,然后將孔徑光闌調(diào)至最大,再將載物臺(tái)緩緩落下,并檢查零件有無損傷(特別要注意檢查物鏡是否沾水沾油,如沾了水或油要用鏡頭紙擦凈),檢查處理完畢后即可裝箱。 七、 光學(xué)顯微鏡的維護(hù) (一) 必須 熟練掌握并嚴(yán)格執(zhí)行使用規(guī)程。 (二) 取送顯微鏡時(shí)一定要一手握住彎臂,另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜,以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡時(shí)要輕拿輕放。 (三) 觀察時(shí),不能隨便移動(dòng)顯微鏡的位置。 (四) 凡是顯微鏡的光學(xué)部分,只能用特殊的擦鏡頭紙與溶液一同擦拭,不能亂用他物擦拭,更不能用手指觸摸透鏡,以免汗液玷污透鏡。 (五) 保持顯微鏡的干燥、清潔,避免灰塵、水及化學(xué)試劑的玷污。 (六) 轉(zhuǎn)換物鏡鏡頭時(shí),不要搬動(dòng)物鏡鏡頭,只能轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器?,F(xiàn)在顯微鏡有電動(dòng)轉(zhuǎn)換 ,這點(diǎn)比較好 ,使用也很方便 .是一個(gè)發(fā)展方向 . ( 七) 切勿隨意轉(zhuǎn)動(dòng)調(diào)焦手輪。使用微動(dòng)調(diào)焦旋鈕時(shí),用力要輕,轉(zhuǎn)動(dòng)要慢,轉(zhuǎn)不動(dòng)時(shí)不要硬轉(zhuǎn)。 北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 電話: 01082895262 傳真: 01082895263 15 (八) 不得任意拆卸顯微鏡上的零件,嚴(yán)禁隨意拆卸物鏡鏡頭,以免損傷轉(zhuǎn)換器螺口,或螺口松動(dòng)后使低高倍物鏡轉(zhuǎn)換時(shí)不齊焦。 (九) 使用高倍物鏡時(shí),勿用粗動(dòng)調(diào)焦手輪調(diào)節(jié)焦距,以免移動(dòng)距離過大,損傷物鏡和玻片。 (十) 用畢將光源調(diào)到最小 ,這樣對(duì)燈泡的使用壽命很有幫助 ! 八、顯微鏡的日常保養(yǎng) 顯微鏡是一種貴重和精細(xì)的儀器,是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)和教學(xué)中不可或缺的輔助工具。所以,我們?cè)谑褂脮r(shí)和使用后就更要好好的維護(hù)和保養(yǎng),讓它更好的為我們的 工作學(xué)習(xí)服務(wù)。下面我們將介紹一些顯微鏡的維護(hù)和保養(yǎng)的知識(shí),來供大家參考!如果能對(duì)您有所幫助,這是我們最大的喜悅! ! 準(zhǔn)備 30%無水乙醇 + 70%乙醚,將不同的鏡頭單獨(dú)分開放置干燥劑器皿中,最好用棉花棒,紗布,柔軟的刷子等比較柔軟的東西來擦拭,注意不能用力擦,以防止損傷鍍膜層。油鏡當(dāng)時(shí)就要清洗,特別是 100X 的油鏡,處理不當(dāng)?shù)脑挘捌菀捉突蜷_膠。目鏡可以自己拆下來清洗, 16X 目鏡注意別裝反了,前片凹面在上。物鏡不要隨便拆下。指針不要用頭發(fā)來做,易弄臟鏡頭,廠家可配備一 個(gè)指針。一般 2 個(gè)月最好能集中保養(yǎng)一次。顯微鏡多時(shí),各個(gè)鏡頭要標(biāo)號(hào)以免弄錯(cuò)了搭配。 清潔灰塵用用棉花棒,紗布,柔軟的刷子等比較柔軟的東西來,注意輕 柔 慢 緩。有些較頑固的污跡如油跡,指紋等,可以用干凈的軟棉布,棉花棒鏡頭紙等蘸上無水酒精輕輕的擦去。如果是從油鏡上擦去浸油,應(yīng)用鏡頭紙,軟棉布或紗布,蘸上二甲苯輕輕擦去。注意,不要用二甲苯清洗雙目鏡筒底部的入射透鏡或目鏡內(nèi)的棱鏡表面。因?yàn)榧兙凭投妆饺菀兹紵?,在將電源開關(guān)打開或關(guān)閉時(shí)要特別當(dāng)心不要引燃這些液體。防患于未然。 清潔 我們反對(duì)使用有機(jī)溶劑(如酒精,乙醚,稀釋劑等)來清洗儀器的油漆和塑料表面,建議使用硅布,還有更頑固的污跡可以使用軟性的 清潔劑來清洗。塑料表面只需要用軟布蘸水就可以了清洗了。 當(dāng)顯微鏡在放假等長(zhǎng)時(shí)間不使用的情況下,請(qǐng)您用塑料罩蓋好,并儲(chǔ)放在干燥的地方防塵防霉。同時(shí)我們強(qiáng)烈建議您將物鏡和目鏡保存在干燥器之類的容器中,并防些干燥劑。 顯微鏡的精細(xì)和貴重,要求我們要更加的愛護(hù)它。為了保持它的性能的穩(wěn)定,我們建議您定期的檢查,保養(yǎng)。 北京麥克奧迪儀器儀表有限公司 聯(lián)系 人:霍剛 電話: 053182070261 13969156723 Email:
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