【導(dǎo)讀】性和防御相關(guān)基因的表達(dá)，研究了醇誘導(dǎo)下番茄果實(shí)的防御反應(yīng)。葉醇和葉醇誘導(dǎo)能夠引起植物的防御性反應(yīng)。與香葉醇相比，葉醇處理對(duì)果實(shí)的。傷害作用更為明顯，引發(fā)了更多的多酚氧化酶活性的提高。

　　

【正文】 線 可以看出， PCR 反應(yīng) 呈指數(shù) 增長，表明該 PCR 體系是 符合 實(shí)驗(yàn) 要求。 醇誘導(dǎo) 對(duì) LOX 基因表達(dá) 的影響 脂肪氧合酶（ lipoxygenase, LOX）基因是真核細(xì)胞中普遍存在的酶， 能 將長鏈不飽和脂肪酸氧化成它們的過氧化合物。脂肪氧合酶基因的表 達(dá)是傷口和病原物攻擊誘導(dǎo)的，是植物內(nèi)源防御體系的一部分 (Felton et al., 1992)。如在 Arabidopsis(Belland Mullet, 1993)、大豆 (Sarawitz and Siedow, 1996)、 馬鈴薯 (Royo et al., 1996)上的 LOX mRNA 積累可由昆蟲攻擊引起。在植物中 ， LOX 參與激素茉莉酮酸酯的合成，從而調(diào)控植物對(duì)損傷的反應(yīng)。在番茄葉片上， TomLOXD 基因的表達(dá)可由損傷誘導(dǎo)， TomLOXD 解碼的葉綠體 LOX 是類西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 28 十八烷防御信號(hào)途徑 的一個(gè)組成成分，在植物的害蟲防御中起作用 (Heitz et al., 1997)。馬鈴薯中 LOXH3 基因的反義缺失使得馬鈴薯降低 PIN 損傷誘導(dǎo)水平，提高取食害蟲的重量。 可見 LOX 基因的表達(dá)水平與植物的防御反應(yīng)相關(guān)。 圖 4 醇誘導(dǎo) 對(duì) LOX 基因表達(dá) 的影響 從 圖 4 可以看出，與 葉醇處理番茄果實(shí) 1d 后的 LOX 基因 表達(dá)相比，香葉醇處理 1d 和 3d 時(shí)，其相應(yīng)的 LOX 基因 相對(duì)表達(dá)量為 和 ，僅占葉醇處理1d 時(shí)的 80%和 30%。葉醇處理 3d 時(shí)，其相應(yīng)的 LOX 基因 相對(duì)表達(dá)量占葉醇處理1d 的 2%。香葉醇 和葉醇浸泡組的 LOX 基因 相對(duì)表達(dá)量分別占葉醇處理 1d 的 75%和 7%。 結(jié)果表明 LOX 屬于早期基因，隨著香葉醇或葉醇處理的時(shí)間延長，經(jīng)過醇誘導(dǎo)的 LOX 基因表達(dá) 量越低。 醇誘導(dǎo) 對(duì) CDI 基因表達(dá) 的影響 組織蛋白酶抑制劑 (CDI)與植物損傷后系統(tǒng)的防御反應(yīng)有關(guān)，當(dāng)植物防御時(shí)該基因的相對(duì)表達(dá)量會(huì)增高。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 29 圖 5 醇誘導(dǎo)對(duì) CDI 基因表達(dá)的影響 從 圖 5 可以看出，與 葉醇處理番茄果實(shí) 1d 后的 CDI 基因 表達(dá)相比，香葉醇處理 1d 和 3d 時(shí)，其相應(yīng) 的 CDI 基因 相對(duì)表達(dá)量是 和 ，是葉醇處理 1d時(shí)的 和 倍。葉醇處 理 3d 時(shí)，其相應(yīng)的 CDI 基因 相對(duì)表達(dá)量為 ，是葉醇處理 1d 的 倍。香葉醇和葉醇浸泡組的 CDI 基因 相對(duì)表達(dá)量分別是葉醇處理 1d 的 和 倍。 結(jié)果表明隨著香葉醇或葉醇處理的時(shí)間 延 長，經(jīng)過醇誘導(dǎo)的 CDI 基因的表達(dá) 量越高 ； 同時(shí)對(duì)于香葉醇和葉醇處理時(shí)間相同的材料，受香葉醇影響的 CDI 基因的表達(dá) 量較后者高。 醇誘導(dǎo) 對(duì) PS 基因表達(dá) 的影響 原系統(tǒng)素蛋白（ PS） 與植物損傷后系統(tǒng)的防御反應(yīng)有關(guān)，該基因的相對(duì)表達(dá)量會(huì)在植物防御時(shí)相應(yīng)的增加。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 30 圖 6 醇誘導(dǎo)對(duì) PS 基因表達(dá)的影響 從 圖 6 可以看出，與葉醇處理番茄果實(shí) 1d 后的 PS 基因 表達(dá)相比，香葉醇處理1d 和 3d 時(shí)，其相應(yīng)的 PS 基因 相對(duì)表達(dá)量是 和 ，是葉醇處理 1d 時(shí)的 和 2 倍。葉醇處理 3d 時(shí)，其相應(yīng)的 PS 基因 相對(duì)表達(dá)量是葉醇處理 1d 的 倍。香葉醇和葉醇浸泡組的 PS 基因 相對(duì)表達(dá)量分別是 和 ，是葉醇處理 1d 的 和 倍。 結(jié)果表明隨著香葉醇誘導(dǎo)的時(shí)間越長，經(jīng)過香葉醇誘導(dǎo)的 PS 基因的表達(dá) 量越低；隨著葉醇誘導(dǎo)的時(shí)間越長，經(jīng)過葉醇誘導(dǎo)的 PS 基因的表達(dá) 量越高，同時(shí) 香葉醇和葉醇浸泡組的 PS 基因 表達(dá)量 最高。 醇誘導(dǎo) 對(duì) inhII基因表達(dá) 的影響 蛋白酶抑制劑（ proteinase inhibitor, PIN）基因 PIN 是小分子蛋白質(zhì)，對(duì)昆蟲有防御作用。 PIN 抑制昆蟲消化性蛋白酶，導(dǎo)致昆蟲由于饑餓而生長遲緩和死亡。植物受植食性昆蟲或機(jī)械損傷后誘導(dǎo) PIN mRNA 的 積 累 (Green and Ryan,1972。 Ryan,1981)，且這種積累是局部和系統(tǒng)性的 (Cordero et al.,1994)。昆蟲損傷還誘導(dǎo)玉米、馬鈴薯、水稻和西紅柿的 PIN 基因的表達(dá) (Anderson et al., 1997)。受損傷誘導(dǎo)的 PIN 基 因主要有半胱氨酸蛋白酶抑制劑 CPIN、絲氨酸蛋白酶抑制劑 SPIN 和胰島素蛋白酶抑制劑 TPIN 基因。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 31 圖 7 醇誘導(dǎo)對(duì) inhII 基因表達(dá)的影響 從 圖 7 可以看出，與葉醇處理番茄果實(shí) 1d 后的 inhII 基因 表達(dá)相比，香葉醇處理 1d 的 inhII 基因 相對(duì)表達(dá)量屎 ，僅占葉醇處理 1d 的 34%，香葉醇處理3d 的 inhII 基因 相對(duì)表達(dá)量是葉醇處理 1d 的 倍。葉醇處理 3d 時(shí)，其相應(yīng)的 inhII 基因 相對(duì)表達(dá)量是葉醇處理 1d 的 倍。香葉醇和葉醇浸泡組的 inhII基因 相對(duì)表達(dá)量分別是 和 ，是葉醇處 理 1d 的 和 倍。 結(jié)果表明 隨著香葉醇或葉醇處理的時(shí)間越長，經(jīng)過醇誘導(dǎo)后的 inhII 基因的表達(dá) 量越高。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 32 第 4章 結(jié) 論 近年來 ,植物誘導(dǎo)抗性的研究報(bào)道較多 ,尤 其 是昆蟲取食誘導(dǎo)的植物間接防御 ,已經(jīng)成為新的研究熱點(diǎn)。關(guān)于植物誘導(dǎo)抗蟲性的基本特征、理化機(jī)制和對(duì)昆蟲及其天敵的影響 ,松樹誘導(dǎo)抗蟲性機(jī)制 ,外源茉莉酸類物質(zhì)誘導(dǎo)的植物抗蟲性及作用機(jī)理 ,昆蟲誘導(dǎo)的植物蛋白酶抑制劑和揮發(fā)性化合物國內(nèi)已有一些研究，但醇誘導(dǎo)對(duì)植物的傷害作用的研究少見報(bào)道。 本文主要 通過對(duì) PPO多酚氧化酶比活性測(cè)定和實(shí)時(shí)定量 PCR分析防御相關(guān)基因的表達(dá) ，研究了醇誘導(dǎo)后番茄果實(shí)的次生代謝及其相關(guān)信號(hào)途徑。 噴施時(shí)間相同和浸泡的時(shí)間相同 的 情況下，與 香葉醇 相比，葉醇處理對(duì)果實(shí)的傷害作用更為明顯，引發(fā)了更多的 多酚氧化酶 活性的提高。同時(shí)表明香葉醇誘導(dǎo) 能夠引起植物的防御性反應(yīng)。 LOX 基因 屬于早期基因，隨著香葉醇或葉醇處理的時(shí)間 延 長，經(jīng)過醇誘導(dǎo)的 LOX 基因的表達(dá) 量越低。 隨著香葉醇或葉醇處理的時(shí)間 延 長，經(jīng)過醇誘導(dǎo)的 CDI 基因的表達(dá) 量越高。 結(jié)果表明隨著香葉醇誘導(dǎo)的時(shí)間 延 長，經(jīng)過香葉醇誘導(dǎo)的 PS 基因的表達(dá)量越低；隨著葉醇誘導(dǎo)的時(shí)間 越長，經(jīng)過葉醇誘導(dǎo)的 PS 基因的表達(dá) 量越高，同時(shí) 香葉醇和葉醇浸泡組的 PS 基因 表達(dá)量 最高。 隨著香葉醇或葉醇處理的時(shí)間 延 長，經(jīng)過醇誘導(dǎo)后的 inhII 基因的表達(dá)量越高。 綜上所述，經(jīng)過醇誘導(dǎo)后有關(guān)植物防御反應(yīng)的相關(guān)基因的表達(dá)量都會(huì)相應(yīng)的上調(diào)，而由于不同酶的特性使他們的表達(dá)的時(shí)間和表達(dá)量會(huì)有些不同。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 33 致謝 感謝我的 指導(dǎo)老師 曹穎老師， 她嚴(yán) 謹(jǐn)?shù)淖黠L(fēng)和言傳身教的品質(zhì) 深深地感染了我，她的思維方式也 將會(huì)一直是我工作、學(xué)習(xí)的榜樣；她對(duì)科學(xué)的執(zhí)著和循循善誘的教導(dǎo)給予 了 我無盡的啟迪； 再次 感謝她在整個(gè)畢業(yè)設(shè)計(jì)過程 和 論文 的 編輯 過程中的細(xì)心指導(dǎo)。 在此 還要感謝所有教導(dǎo)過我的老師，感謝你們?cè)诖髮W(xué) 期間 間對(duì)我人生觀、價(jià)值觀的引導(dǎo)。學(xué)生將秉承諸位老師的優(yōu)良作風(fēng)，在 今后 中 唱響 人生絢麗 的音符 。也祝各位老師， 身體健康 萬事如意。 西南科技大學(xué)本科生畢業(yè)論文 34 參考文獻(xiàn)： [1]潘永貴，施瑞城 .采后果蔬受機(jī)械傷害的生理生化反應(yīng) [J].植物生理學(xué)通訊，20， 36(6):568572. 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