【正文】 作用[[8792]。國際腫瘤研究機構(gòu)(IARC)將無機鉛及鉛的化合物列為“可疑致癌物”}2B組)[90]。鉛在體內(nèi)分布廣泛，在肝臟，腎臟等一些內(nèi)臟器官和組織中易于積累。當血液中鉛積累達到飽和時，便以磷酸鉛的形式積累于骨骼中。面對國際上通行的所有豬下水采用單一鉛含量限量標準，根據(jù)我國消費豬下水的需求，研究鉛在豬體內(nèi)不同組織器官內(nèi)的分布與累積，驗證現(xiàn)行豬下水中鉛限量標準的科學性，為制定細化的禽畜下水鉛限量標準提供依據(jù)。本實驗通過濕式消解一原子吸收法研究了不同劑量鉛暴露條件下豬各組織器官內(nèi)鉛分布的情況。3. 1材料與方法 硝酸優(yōu)級純，北京化工廠 30% H20:分析純，北京化工廠 鉛標準溶液，國家標準物質(zhì)中心 濕式消解裝置 原子吸收光譜儀SB53原子吸收分光光度計AAS, Avanta PM, GBC 去離子水中國農(nóng)業(yè)大學應用化學院 單通道移液槍德國Ependorf JA5103A電子天平上海民橋精密科學儀器有限公司(51 Og, 1 mg3. 1. 2. 1試驗動物及劑量分組 選取體重15kg左右，健康狀況良好的五指山小型豬20頭(中國中國農(nóng)業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所提供)，根據(jù)“胎次相近，品種相同，體重相當，公母比例一致”的原則，隨機分為5組，每組4頭，編號。經(jīng)一周預飼后，稱重，經(jīng)生物學統(tǒng)計，確定組間差異不顯著后進入正式試驗，飼期100d。各組分別飼喂正常飼料(工組)和分別添加鉛Smg/kg(II組)，15mg/kg ( III組)，45mg/lcg ( LV組)和13 5 mg/kg(V組)的飼料。豬舍同第二章。3. 1. 2. 2取樣方法 飼養(yǎng)試驗結(jié)束后將所有豬屠宰。宰前禁飼24小時，禁飼期自由飲水。 肌肉樣品:按照圖31所示取前腿肉、后腿肉、肋排肉、里脊和臀尖肉各SOg左右。 脂肪樣品:于豬背部取脂肪樣品SOg左右。 全血樣品:取新鮮的豬屠宰血，加1%肝素抗凝。 豬皮樣品:于豬背部取豬皮1 Ocm2 。 豬骨樣品:采集股骨和9, 10根肋骨。 骨髓樣品:取豬股骨骨髓。 毛發(fā)樣品:取豬背部豬毛，去離子水洗凈，烘干后待測。 內(nèi)臟樣品:采集左邊內(nèi)臟中部樣品，切取SOg左右。 豬耳樣品:采集豬左耳中部樣品lOg左右，去毛待測。 豬尾樣品:采集豬尾巴中段約2cm(無骨)，去毛待測。 小腸樣品:采集豬小腸中段約1 Ocm，沖洗，濾紙拭干水分，待測。 大腸樣品:采集豬大腸中段約1 Ocm，沖洗，濾紙拭干水分，待測。 豬胃樣品:排清胃內(nèi)消化物，去離子水沖洗，濾紙拭干水分，采集1 Ocm2左右，待測。 大腦樣品:采集整個大腦。 小腦樣品:采集整個小腦。 ， g，置入潔凈的1 Sml旋蓋離心管中80 0C保存，待消化處理。 3. 1. 2. 3分析方法 飼料中鉛含量的測定采用濕式消解一石墨爐原子吸收法: g樣品，精確到 g，置于三角瓶中，加入10 mL混合酸(HNO}:HCL04=4:1)，加蓋浸泡過夜，加一小漏斗于電爐上消解，冷卻后，用滴管將消化液轉(zhuǎn)入25mL容量瓶，多次洗滌三角瓶，定容，同時作試劑空白。用石墨爐原子吸收分光光度計測定鉛含量。 豬組織器官樣品測定采用微波消解一石墨爐原子吸收法: g樣品，精確到 g，置于三角瓶中，加入10 mL混合酸(HNO}:HCL04=4:1)，加蓋浸泡過夜，加一小漏斗于電爐上消解，冷卻后，用滴管將消化液轉(zhuǎn)入25mL容量瓶，多次洗滌三角瓶，定容，同時作試劑空白。用石墨爐原子吸收分光光度計測定鉛含量。 表31石墨爐原子吸收儀工作條件 3. 2結(jié)果與分析 我國《飼料衛(wèi)生標準》GB 130782001}g1]規(guī)定，豬配合飼料中鉛含量限量標準為5mg/kg。本實驗飼料中鉛含量經(jīng)濕式消解一石墨爐原子吸收法測定結(jié)果為:mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/kg?？梢钥闯鲲暳现秀U本底(工組鉛含量)較低，遠低于國家標準中對飼料中鉛含量的限量要求。 由表34可知，隨著飼料中鉛含量的增加，豬內(nèi)臟器官中的鉛含量呈現(xiàn)不同的變化趨勢。其中肝臟和腎臟的鉛含量呈明顯遞增趨勢。 隨著飼料中鉛含量的增加，肝臟中的鉛含量隨之升高。除對照組之外，4個暴露劑量下的肝臟鉛含量均超過國家標準(C 0. 5 mg/kg。, , ，說明鉛在肝臟組織中富集程度較高。 隨著飼料中鉛含量的增加，豬腎臟中的鉛含量也逐漸升高。由表34可知，mg/kg劑量組腎臟中鉛含量約為對照組鉛含量的17倍， mg/kg劑量組腎臟鉛含量， mg/，說明腎臟在某種程度上能夠富集一定量的鉛。 心、肺、胃、大腸、小腸和脾臟等組織器官內(nèi)的鉛累積程度較低，當飼料含鉛量為 mg/kg C V組)時，上述組織器官內(nèi)的鉛含量均未超過國家標準規(guī)定的禽畜肉類 mg/kg)和禽畜下水(0. 5 mg/lcg)的鉛限量標準。說明以上六種組織器官對鉛的累積量較低。 由縱向比較的結(jié)果可知， mg/kg劑量組下八種內(nèi)臟組織的鉛含量均無顯著差異， mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/kg四個劑量組下的肝臟鉛含量顯著高于其它內(nèi)臟組織的鉛含量(P ), mg/ mg/kg劑量組下腎臟的鉛含量顯著高于除肝臟外的其它組織的鉛含量(P )。結(jié)果提示，用正常飼料飼喂時，腎臟的鉛含量最高，其次是心臟、肺、肝臟。當改用含鉛的飼料飼喂時，隨著飼料鉛含量的增加，肝臟的鉛含量最高，其次是腎臟，說明肝臟對鉛的富集量較高。 表34不同鉛飼喂劑量下豬內(nèi)臟器官中的鉛含量(單位:mg/kg) 禽畜下水鉛限量的國家標準National Standard: mg/kgNote: Different letters in a same line mean the data before them are significant different at level of p . 圖32給出了各器官中鉛含量在不同鉛飼喂劑量下的直觀結(jié)果。由圖32可以看出，不同劑量組下豬內(nèi)臟組織中的鉛含量不同。用正常飼料飼喂時，各組織器官中的鉛含量基本保持在同一水平線上。隨著飼料鉛含量的增加，鉛在各內(nèi)臟組織的分布量出現(xiàn)一定差異。肝臟中鉛含量在各個鉛飼喂劑量，都均處于最高水平，當鉛的飼喂劑量增加時，這種差異增大。隨著飼料中鉛劑量的增加，肝臟和腎臟中的鉛含量明顯高于其它組織器官。心臟、肺、胃、脾臟、大腸和小腸等組織器官中鉛含量在各個鉛飼喂劑量下都處于較低水平，且在各飼喂劑量間無顯著差異。因此，食用肝臟和腎臟的鉛中毒風險高于其它豬下水組織。、脂肪中的分布與積累 鉛在豬肌肉組織和脂肪中的積累數(shù)據(jù)見表35。由表35可知，隨著飼料鉛含量的增加，豬肌肉組織的鉛含量無明顯變化。與其余四種肌肉組織相比，肋排肉中的鉛含量相對較高，但在各個劑量組下，其鉛含量均低于國家標準。脂肪的鉛含量高于肌肉組織中鉛含量， mg/ mg/kg劑量組的脂肪鉛含量超過國家對禽畜肉鉛含量的限量標準，而五種肌肉組織的鉛含量即使在鉛最高劑量下也均未超過國家標準對禽畜 mg/kg，說明肌肉組織不易積累鉛。 表35不同鉛飼喂劑量下豬的肌肉組織和脂肪中鉛含量(單位:mg/kg) 圖33給出了不同鉛飼喂劑量下的肌肉組織和脂肪組織中鉛含量的直觀結(jié)果。由圖33可以看出，隨著飼料鉛含量的增加，鉛在大多數(shù)肌肉組織中積累量無顯著變化，且其變化與鉛飼喂量間的關(guān)系無規(guī)律可循。脂肪中鉛含量在多個鉛劑量下表現(xiàn)出較高水平。 mg/kg劑量組肋排肉的鉛含量高于脂肪鉛含量外，其余四個劑量組下脂肪的鉛含量均高于各肌肉組織的鉛含量。因此，就鉛含量而言，食用脂肪的風險稍高于肌肉組織。. 圖33不同鉛飼喂劑量下豬肌肉組織和脂肪中的鉛含量 Fig. 33 Lead content of muscles and fat corresponding to different lead feeding doeses、豬尾和豬舌中的分布與積累 表36為不同鉛飼喂劑量下，豬耳、豬尾和豬舌中鉛含量的分布情況。由表36可 以看出，隨著飼料中鉛含量的增加，豬耳、豬舌和豬尾三種組織中的鉛含量呈現(xiàn)不一致的變化趨勢?？傮w而言，五個鉛劑量組的豬耳、豬舌和豬尾中的鉛含量均未超過肉 mg/kg，說明鉛在這三種組織中的積累量較低。 圖34給出了不同鉛飼喂劑量下豬耳、豬舌和豬尾中鉛含量的直觀圖。由圖34可以看出，豬舌中鉛含量在不同鉛飼喂劑量下無顯著變化，豬耳和豬尾中鉛含量則隨飼料鉛含量的增加呈無規(guī)律顯著變化?？傮w而言，豬耳中鉛含量在各個鉛飼喂劑量下均較低。豬舌中鉛含量較高。豬尾中鉛含量最高。因此，同等條件下，食用豬尾時的鉛中毒風險高于豬耳和豬舌。但其劑量均未超過國家的安全標準限量。 由表37可以看出，隨著飼料鉛含量的增加，鉛在骨中的積累量逐漸增加，且在骨質(zhì)和骨髓中的積累程度有區(qū)別。骨質(zhì)中積累大于骨髓中積累。股骨和肋骨對鉛的積累也有區(qū)別，股骨較肋骨易積累鉛。股骨骨質(zhì)鉛含量高于肋骨鉛含量，但差異不顯著(尸， mg/kg劑量組開始，股骨骨髓的鉛含量顯著低于股骨骨質(zhì)和肋骨的鉛含量(P)。Note: Different letters in a same line mean the data before them are significant different at level of p . 由圖35可以更為直觀地看出:隨著鉛飼喂劑量的增加，各種骨組織中的鉛含量均表現(xiàn)出明顯的增大趨勢，但股骨骨髓中鉛含量的變化幅度最小，股骨骨質(zhì)中鉛含量的變化幅度最大，肋骨中鉛含量變化次之。在各個鉛飼喂劑量下，股骨骨質(zhì)中鉛含量均為最高，肋骨中鉛含量稍低，股骨骨髓中鉛含量遠低于前兩者。這說明，鉛更容易在骨質(zhì)中積累，而在骨髓中的積累量較少，這可能與骨髓的代謝活躍有關(guān)。但是，即便如此，骨髓中鉛含量的最低值( mg/kg)也高要高于國家限量( mg/lcg。因此，骨髓中殘留的少量鉛也會對人體造成危害。骨質(zhì)組織中鉛如果能在烹飪過程中進入骨湯中，也會對人體造成危害。為了考察骨質(zhì)中鉛的溶出特性，論文的第五章對這一特性也進行了研究。 由表38可以看出，隨著飼料中鉛含量的增加，豬大腦、小腦、豬血和豬皮等組織中的鉛含量呈現(xiàn)不一致的變化趨勢。豬血和豬皮兩種組織中鉛含量在四個鉛劑量組的 mg/kg，說明鉛在這兩種組織中不易積累。而鉛在豬 mg/kg。鉛在豬毛中的積累量隨著飼料中鉛含量的增加而增加，mg/kg o 0. 046 mg/kg、 mg/kg劑量組下豬毛的鉛含量與其余四種組織的鉛含量比較無顯著差(P ， mg/kg, mg/ mg/kg劑量組下豬毛中鉛含量顯著高于其余組織中的鉛含量(。綜上所述，鉛在豬毛中較易積累，積累趨勢與鉛在豬肝臟、腎臟、豬骨中的積累趨勢相似。 由圖36看以直觀地看出，豬毛中鉛含量隨飼料中鉛含量的增大而顯著增加，而大腦、小腦、豬皮和豬血中鉛含量則無顯著變化?？傮w而言，豬毛中鉛含量最高，在最高鉛飼喂劑量條件下接近國家限量標準。其它器官中鉛含量從高到低依次為大腦、小腦、豬血和豬皮。3. 3討論 本章研究結(jié)果表明，隨著鉛含量的增加，豬組織器官中的鉛含量均有不同程度的升高，說明鉛在豬組織器官中均可富集。但從富集程度上看，不同組織器官中鉛富集狀況有差異，骨骼、骨髓、肝臟、腎臟等組織鉛富集量遠高于肌肉組織等部位。這與前人研究結(jié)果基本相符[[7779]。有學者對鉛的分布機制進行了初步研究。結(jié)果表明，鉛經(jīng)口染毒后以離子狀態(tài)被吸收，進入血液循環(huán)，并以鉛鹽與血漿蛋白結(jié)合的形式分布于全身各組織[}93} 0 1975年口本《產(chǎn)業(yè)醫(yī)學》發(fā)表論文報道[[94]醋酸鉛經(jīng)口染毒豚鼠，約94%的鉛被排泄，其中通過尿液排泄約15%。通過糞便排泄79% 。 6%被機體吸收儲存，其中骨骼中儲存量約為4%。進一步研究證明[[95]，鉛在動物各組織器官中分布并不均勻，鉛初期主要分布在肝臟、腎臟中，其次為脾、肺、胃，數(shù)周后約有95%的磷酸氫鉛轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定而不溶的磷酸鉛，沉積于骨骼、毛發(fā)中，其中有90 } 39。 95%的鉛貯存于骨骼內(nèi)[[96,97]這與本文研究結(jié)果一致。 本章結(jié)果表明，鉛在骨骼內(nèi)的蓄積量較大， mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/, , ，遠遠超過國家標準中對禽畜肉類和禽畜下水鉛含量的限量標準。而豬肉、豬耳、豬舌、豬尾等組織器官中的鉛含量較低，即使飼喂鉛含量超過國家標準30倍以上的飼料( mg/kg，仍能保證這些組織器官的鉛含量低于國家限量標準。 這提示我們，飼養(yǎng)過程不足以導致豬肉、豬耳、豬舌、豬尾等肉類組織和心臟、肺、胃、大腸、小腸五種下水組織的鉛含量超標，但對于肝臟、腎臟和豬骨等組織，即便飼喂符合國家標準的飼料，也可能導致其鉛含量超標。 我國現(xiàn)行國家標準GB 27622005規(guī)定， mg/kg，可食用禽畜下水中鉛限量為0. 5 mg/kg，而對于骨骼和骨髓的鉛含量沒有制定相應的國家限量標準。因此，在鉛限量方面