【正文】 本章結(jié)果表明，鉛在骨骼內(nèi)的蓄積量較大， mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/, , ，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過國家標(biāo)準(zhǔn)中對禽畜肉類和禽畜下水鉛含量的限量標(biāo)準(zhǔn)。但從富集程度上看，不同組織器官中鉛富集狀況有差異，骨骼、骨髓、肝臟、腎臟等組織鉛富集量遠(yuǎn)高于肌肉組織等部位。豬血和豬皮兩種組織中鉛含量在四個鉛劑量組的 mg/kg，說明鉛在這兩種組織中不易積累。Note: Different letters in a same line mean the data before them are significant different at level of p . 由圖35可以更為直觀地看出:隨著鉛飼喂劑量的增加，各種骨組織中的鉛含量均表現(xiàn)出明顯的增大趨勢，但股骨骨髓中鉛含量的變化幅度最小，股骨骨質(zhì)中鉛含量的變化幅度最大，肋骨中鉛含量變化次之。豬舌中鉛含量較高。 mg/kg劑量組肋排肉的鉛含量高于脂肪鉛含量外，其余四個劑量組下脂肪的鉛含量均高于各肌肉組織的鉛含量。因此，食用肝臟和腎臟的鉛中毒風(fēng)險高于其它豬下水組織。當(dāng)改用含鉛的飼料飼喂時，隨著飼料鉛含量的增加，肝臟的鉛含量最高，其次是腎臟，說明肝臟對鉛的富集量較高。除對照組之外，4個暴露劑量下的肝臟鉛含量均超過國家標(biāo)準(zhǔn)(C 0. 5 mg/kg。 豬組織器官樣品測定采用微波消解一石墨爐原子吸收法: g樣品，精確到 g，置于三角瓶中，加入10 mL混合酸(HNO}:HCL04=4:1)，加蓋浸泡過夜，加一小漏斗于電爐上消解，冷卻后，用滴管將消化液轉(zhuǎn)入25mL容量瓶，多次洗滌三角瓶，定容，同時作試劑空白。 小腸樣品:采集豬小腸中段約1 Ocm，沖洗，濾紙拭干水分，待測。 全血樣品:取新鮮的豬屠宰血，加1%肝素抗凝。3. 1材料與方法 硝酸優(yōu)級純，北京化工廠 30% H20:分析純，北京化工廠 鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心 濕式消解裝置 原子吸收光譜儀SB53原子吸收分光光度計AAS, Avanta PM, GBC 去離子水中國農(nóng)業(yè)大學(xué)應(yīng)用化學(xué)院 單通道移液槍德國Ependorf JA5103A電子天平上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司(51 Og, 1 mg3. 1. 2. 1試驗動物及劑量分組 選取體重15kg左右，健康狀況良好的五指山小型豬20頭(中國中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所提供)，根據(jù)“胎次相近，品種相同，體重相當(dāng)，公母比例一致”的原則，隨機分為5組，每組4頭，編號。下一章內(nèi)容將進(jìn)一步研究鉛在豬體內(nèi)組織器官中的分布情況。2. 3討論 在染鉛期間，試驗豬的口常生長結(jié)果說明其生長、飲食、體態(tài)特征等均未表現(xiàn)出異常。為了進(jìn)一步驗證鉛對試驗豬的影響，選取血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶C ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶CAST),堿性磷酸酶CALP)和Y一谷氨酞基轉(zhuǎn)移酶(} GGT)四種酶為檢測指標(biāo)。說明此鉛暴露的劑量條件對wzsP的生長不會產(chǎn)生明顯影響。2. 2結(jié)果與分析 預(yù)飼結(jié)束后動物的分組及體重數(shù)據(jù)見表22。根據(jù)Mrb : M c4Hiao}rb}3Hao= : ，換算后得知各組每餐的飼料量及醋酸鉛的添加量見表21。經(jīng)一周預(yù)飼后，稱重，經(jīng)生物學(xué)統(tǒng)計，確定組間差異不顯著后進(jìn)入正式試驗，飼期100d，每隔20d稱量一次體重并記錄。 (3)加工工藝對豬組織中鉛含量的影響。針對以上情況，我國應(yīng)根據(jù)本國國情需要，開展鉛在豬體內(nèi)不同組織器官內(nèi)的分布及積累情況研究，并制定細(xì)化的禽畜可食用下水中的鉛含量限量標(biāo)準(zhǔn)，以保障國民的食品安全。以用基礎(chǔ)口糧飼喂454的豬為實驗動物，測定其肝、腎、肌肉中的鉛含量，結(jié)果分別為, , ，, (國家殘留限量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定肝臟、腎臟、肌肉鉛含量分別低于0. 5 , 0. 5 , 0. 2mg/kg ) }}9}。骨骼中的鉛至少有兩個庫，一個在小梁骨(松質(zhì)骨)中，另一個在皮骨質(zhì)(密質(zhì)骨)中。2室主要是軟組織，也許還包含某些含骨骼的活性交換部分。長期攝入有害重金屬元素污染的食品對人體產(chǎn)生的危害性較大。在對北京市海淀區(qū)豬腎中鉛砷福污染狀況中發(fā)現(xiàn)，抽查樣品為30份，其中鉛檢測結(jié)果有3份超標(biāo)，超%， mg/kg。據(jù)報道[[28]，一個年產(chǎn)6萬頭牲豬的養(yǎng)殖場，因為使用了福、鉛超標(biāo)的礦物質(zhì)添加劑，而導(dǎo)致大范圍的牲豬屠宰肌肉發(fā)白。營養(yǎng)學(xué)界經(jīng)常會推薦大家吃豬肝，特別是對兒童、孕婦、乳母、老年人以及貧血等人群，豬肝一直是首選食物。由于國際上動物雜碎產(chǎn)品的價格很低，加之我國消費量的提升，導(dǎo)致我國大量從國外進(jìn)口動物雜碎[[65]。其次是廣東省，為2. 45千克。有報道，鉛冶煉廠和電池廠工人的肺癌、消化道癌以及腎癌的標(biāo)準(zhǔn)死亡率從1至2. 5 }o，其對應(yīng)的血鉛范圍為40w 100 }g/100 m1}64} o1. 2豬的消費情況和存在問題 據(jù)報道，2007年中國豬肉產(chǎn)量占世界的47%，穩(wěn)居世界第一位。在臨床上[[59]，急性鉛腎病是以氨基酸、葡萄糖、磷酸鹽的重吸收過少為特征。高濃度鉛急性神經(jīng)毒作用(血鉛100 a g/dL)早在60年代就有報道，目前人們更為關(guān)心的是慢性低濃度接觸鉛(血鉛45 a g/dL)所引起的亞臨床影響。Huel等人發(fā)現(xiàn)母親孕期的發(fā)鉛濃度與兒童(6歲)的總感知能力、語言能力、定量能力和記憶能力指數(shù)呈明顯的負(fù)相關(guān)[[47]。蓄積在人體內(nèi)的鉛及其化合物對人體的神經(jīng)系統(tǒng)、血液系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和骨等都具有較大的毒害作用。 AHLGREN利用上述動力學(xué)模型對非職業(yè)性或環(huán)境污染時接觸鉛的人群進(jìn)行了推算，口吸收量Ab為15 a g/ d，口交換率} 10, } 12, } 21，見圖11。 腎是鉛排泄的主要器官。最大的，也是動力學(xué)上最J漫的動力池是骨，半衰期大于20年。只有極少部分能在肺中沉積，但隨即從呼吸道中清除并吞咽到消化道。水和飲料中的鉛吸收率比食物中大。而且，與慢性鉛中毒不同的是，急性鉛中毒時鉛的主要沉積組織是肝和腎而不是骨【‘“，川。也可經(jīng)氣管、支氣管咳出，再咽入消化道。人體鉛攝入量與食物種類、消費量及含鉛量有關(guān)，如蔬菜、水果和果汁等罐裝食品，由于用鉛焊接縫而導(dǎo)致食物含鉛量增加，便每口攝鉛量也增加。%經(jīng)呼吸道[[22]。隨地下水進(jìn)入江河水源。鉛是地球上分布廣泛、含量豐富且最嚴(yán)重的環(huán)境污染物之一【17,18]。由于自然因素或人為因素導(dǎo)致的環(huán)境鉛污染，會使地下水及土壤普遍含有鉛，鉛進(jìn)入環(huán)境或生態(tài)系統(tǒng)后就會存留、積累和遷移，并通過食物鏈進(jìn)一步被人體吸收，從而危害人類健康f=}gl。以各種化學(xué)狀態(tài)或化學(xué)形態(tài)存在的重金屬，在進(jìn)入環(huán)境或生態(tài)系統(tǒng)后就會存留、積累和遷移，造成危害。但是，進(jìn)入環(huán)境中的鉛卻不易被降解，而且其長期蓄積在土壤中，會破壞土壤的自凈能力，使土壤成為污染物的“儲存庫”，最終降低土壤肥效。美國環(huán)保局1986年報道，2歲兒童攝入鉛的主要途徑為:食物47%、塵土45%、飲水6%、空氣和土壤各1 % o Davies報道英國2歲兒童每口吸收的鉛有97%通過消化道，只有3%通過呼吸道[[21]。在波蘭，當(dāng)?shù)厥卟说南M量與人體血鉛水平呈正相關(guān)，這是因為土壤受到鉛污染導(dǎo)致蔬菜鉛含量增加的結(jié)果。、分布和代謝1. 1. 3. 1鉛的吸收、分布和代謝途徑 鉛化合物可經(jīng)呼吸道和消化道進(jìn)入體內(nèi)。而血液中的鉛約有95%分布在紅細(xì)胞內(nèi)，主要在紅細(xì)胞膜，血漿只占5%。一項研究表明，%%的鉛。鉛在大氣中是以固態(tài)的粉塵形式或是氧化鉛微粒或是蒸汽的形式存在。血鉛是血漿和紅細(xì)胞之間鉛濃度平衡的結(jié)果，如果血鉛水平達(dá)到100 a g/dL，其中有1%或更少的鉛在血漿中。骨中鉛隨著年齡的增長而增長，兒童骨骼中的鉛占體鉛含量的70%，隨著年齡的增長骨鉛含量可達(dá)總體鉛含量的95%。在妊娠期母體血鉛有輕微的降低，可能是與血液稀釋有關(guān)。這個模型對鉛中毒病例的分析說明，在停止職業(yè)性鉛污染后，血鉛值會較快地衰減，其中一部分會進(jìn)入骨骼，而骨骼中鉛的衰減速度很慢，因此骨骼中會較長時間存留鉛元素，成為人體內(nèi)部長期存在的中毒源庫。損傷神經(jīng)系統(tǒng)，導(dǎo)致手腕無力下垂，以及引發(fā)腦病。 人體在接觸高濃度鉛引起的中毒易累及腦部而引起中毒性腦病[[51]，此病發(fā)生緩慢，常無特征性，其癥狀常有興奮或倦睡、腸胃不適癥癥、運動失調(diào)、頭痛等，嚴(yán)重時可出現(xiàn)昏迷。我國張燕在遼寧的研究也發(fā)現(xiàn)，接觸鉛組兒童( mg/ L)在智能發(fā)育、動作能力、應(yīng)物能力根據(jù)這些資料分析，鉛的致癌機理不是直接引起DNA的改變，而是通過降低細(xì)胞的DNA修復(fù)能力來增加腫瘤發(fā)生的危險性[[61 ]。根據(jù)國家統(tǒng)計局資料顯示，2006年我國城鎮(zhèn)居民豬肉人均購買量為20. 00千克[[66]。雖然各地區(qū)對豬肉及其制品的消費量存在差異，但從整體上講，人們對豬肉及其制品的消費前景是可觀的。阿斯達(dá)食品連鎖店的高級肉類采購員吉姆因此，伴隨著人們對食品營養(yǎng)關(guān)注度的提升，豬內(nèi)臟的消費量定會逐漸增加。 中國豬肉和豬下水的消費量很高，給人民提供優(yōu)質(zhì)的營養(yǎng)資源的同時也伴隨著一些污染問題。面對目前國際上通行的單一禽畜下水鉛限量標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)我國對豬下水的消費情況，驗證現(xiàn)行豬下水中鉛限量標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性，制定細(xì)化的禽畜下水鉛限量標(biāo)準(zhǔn)是非常有必要的。當(dāng)然，骨組織不能無限量的容納鉛，當(dāng)骨鉛含量達(dá)到飽和時，動物繼續(xù)與鉛接觸，則血液和軟組織中鉛的濃度升高，可引起中毒癥狀。參與血液循環(huán)的鉛99%以上存在于紅細(xì)胞中，僅有不到1%的鉛存在于血漿中，血漿和紅細(xì)胞中的鉛在幾分鐘內(nèi)迅速達(dá)到平衡。大量動物實驗表明，肝、腎等內(nèi)臟組織中的鉛含量遠(yuǎn)高于肌肉組織的鉛含量。近幾年，食品鉛超標(biāo)特別是豬肉制品及豬下水鉛超標(biāo)的現(xiàn)象時有發(fā)生。得出進(jìn)食后的鉛在豬組織器官中的分布與累積情況，找出豬體內(nèi)富集鉛的主要器官。研究中選用體型較小的五指山豬為動物模型，設(shè)計了鉛風(fēng)險評估的試驗方案，通過飼喂不同含鉛量的飼料，觀察鉛對豬體重及體態(tài)特征的影響。(I組)、 ( II組)、C III組)、 ( LV組) mg/kg C V組)。2. 1. 2. 5統(tǒng)計學(xué)方法 所用數(shù)據(jù)均以x士s表示。每20 d按時稱量豬體重并記錄數(shù)據(jù)。適應(yīng)性飼養(yǎng)期，曾整體出現(xiàn)腹瀉癥狀，在更換飼料后，再未出現(xiàn)腹瀉狀況。 ALT活力呈現(xiàn)明顯的上升趨勢，與對照組比較，各染鉛組ALT活力均較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PP。yGGT是在氨基酸吸收中參與y一谷氨酞基循環(huán)的一個重要的酶，不同器官中yGGT的理化性質(zhì)具有一定差異，血清中的yGGT主要來自肝臟，它是能夠較好反映膽汁淤積型肝損傷的指標(biāo)[[86] 綜上所述，最高劑量組鉛(V組)對試驗豬的肝臟有一定程度的損傷，但這種損傷沒有通過體態(tài)特征表現(xiàn)出來。當(dāng)血液中鉛積累達(dá)到飽和時，便以磷酸鉛的形式積累于骨骼中。宰前禁飼24小時，禁飼期自由飲水。 內(nèi)臟樣品:采集左邊內(nèi)臟中部樣品，切取SOg左右。 ， g，置入潔凈的1 Sml旋蓋離心管中80 0C保存，待消化處理。 由表34可知，隨著飼料中鉛含量的增加，豬內(nèi)臟器官中的鉛含量呈現(xiàn)不同的變化趨勢。說明以上六種組織器官對鉛的累積量較低。肝臟中鉛含量在各個鉛飼喂劑量，都均處于最高水平，當(dāng)鉛的飼喂劑量增加時，這種差異增大。 表35不同鉛飼喂劑量下豬的肌肉組織和脂肪中鉛含量(單位:mg/kg) 圖33給出了不同鉛飼喂劑量下的肌肉組織和脂肪組織中鉛含量的直觀結(jié)果。 圖34給出了不同鉛飼喂劑量下豬耳、豬舌和豬尾中鉛含量的直觀圖。骨質(zhì)中積累大于骨髓中積累。骨質(zhì)組織中鉛如果能在烹飪過程中進(jìn)入骨湯中，也會對人體造成危害?？傮w而言，豬毛中鉛含量最高，在最高鉛飼喂劑量條件下接近國家限量標(biāo)準(zhǔn)。 6%被機體吸收儲存，其中骨骼中儲存量約為4%。 我國現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB 27622005規(guī)定， mg/kg，可食用禽畜下水中鉛限量為0. 5 mg/kg，而對于骨骼和骨髓的鉛含量沒有制定相應(yīng)的國家限量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，鉛經(jīng)口染毒后以離子狀態(tài)被吸收，進(jìn)入血液循環(huán)，并以鉛鹽與血漿蛋白結(jié)合的形式分布于全身各組織[}93} 0 1975年口本《產(chǎn)業(yè)醫(yī)學(xué)》發(fā)表論文報道[[94]醋酸鉛經(jīng)口染毒豚鼠，約94%的鉛被排泄，其中通過尿液排泄約15%。綜上所述，鉛在豬毛中較易積累，積累趨勢與鉛在豬肝臟、腎臟、豬骨中的積累趨勢相似。但是，即便如此，骨髓中鉛含量的最低值( mg/kg)也高要高于國家限量( mg/lcg。但其劑量均未超過國家的安全標(biāo)準(zhǔn)限量。由表36可 以看出，隨著飼料中鉛含量的增加，豬耳、豬舌和豬尾三種組織中的鉛含量呈現(xiàn)不一致的變化趨勢。與其余四種肌肉組織相比，肋排肉中的鉛含量相對較高，但在各個劑量組下，其鉛含量均低于國家標(biāo)準(zhǔn)。用正常飼料飼喂時，各組織器官中的鉛含量基本保持在同一水平線上。由表34可知，mg/kg劑量組腎臟中鉛含量約為對照組鉛含量的17倍， mg/kg劑量組腎臟鉛含量， mg/，說明腎臟在某種程度上能夠富集一定量的鉛。本實驗飼料中鉛含量經(jīng)濕式消解一石墨爐原子吸收法測定結(jié)果為:mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/kg, mg/kg。 大腦樣品:采集整個大腦。 骨髓樣品:取豬股骨骨髓。豬舍同第二章。國際腫瘤研究機構(gòu)(IARC)將無機鉛及鉛的化合物列為“可疑致癌物”}2B組)[90]。 進(jìn)一步對血清酶活力進(jìn)行測定，結(jié)果表明，低劑量組( mg/kg)僅有ALT活力顯著升高(P 。由表24可以看出，隨著染鉛劑量的增高，AST活力呈現(xiàn)遞增的趨勢，但與對照組相比，差異無