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正文內(nèi)容

血管緊張素ⅰ放射免疫分析方法(固相抗體法)的建立(編輯修改稿)

2024-11-17 22:17 本頁(yè)面
　

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ；第三組125i―ai加50？l，標(biāo)準(zhǔn)品加100？l；第四組125i―ai加50？l，標(biāo)準(zhǔn)品加50？l。　　　　標(biāo)準(zhǔn)品（或樣品、質(zhì)控血清）100？l和標(biāo)記物100？l加于包被管中，混勻，然后放2―8℃靜置過(guò)夜（15―24h），棄溶液，加500？l洗滌液清洗2―3次，測(cè)各管放射性計(jì)數(shù)?！　　　§`敏度：以20個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)管的計(jì)數(shù)平均值―2s對(duì)應(yīng)的劑量值表示。準(zhǔn)確度：任取一份血漿標(biāo)本，測(cè)定基值后分別加入0pg/ml ，250pg/ml，625 pg/ml，1560 pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品，再次測(cè)定，計(jì)算回收率。精密度：測(cè)定批內(nèi)和批間變異系數(shù)（cv%）。健全性：將一份高濃度樣品稀釋成1：1：1：1：1：11：31：64分別測(cè)定其含量。經(jīng)回歸處理后成一條直線，y= x +，r=?！　?結(jié)果與討論　　（一抗）包被實(shí)驗(yàn)　　不同滴度抗體包被實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于表1，表1結(jié)果表明，當(dāng)抗體滴度為1：16萬(wàn)―1：8萬(wàn)時(shí)，隨著抗體滴度的減小，包被管的結(jié)合率逐步升高；當(dāng)抗體滴度為1：8萬(wàn)―1：2萬(wàn)時(shí)，包被管的結(jié)合率沒(méi)有出現(xiàn)明顯升高，基本保持同一水平。所以在不影響放免藥盒靈敏度的前提下，選擇1：9萬(wàn)作為抗體的工作稀釋度，用于包被。（該處可以作圖，不列表）　　，包被溫度對(duì)包被的影響　　結(jié)果列于表2由表2可知，包被溫度和包被時(shí)間對(duì)包被管免疫結(jié)合的影響依賴于包被時(shí)加入抗體的濃度。當(dāng)加入抗體的滴度為1：2萬(wàn)和1：4萬(wàn)時(shí)，升高包被溫度使包被管的免疫結(jié)合增加，而延長(zhǎng)包被時(shí)間對(duì)包被管的免疫結(jié)合無(wú)顯著影響；當(dāng)加入抗體滴度為1：14萬(wàn) 　　和1：16萬(wàn)時(shí)，升高包被溫度包被管的免疫結(jié)合顯著減少，原因可能是抗體在低濃度時(shí)較不穩(wěn)定，包被過(guò)程中較高的溫度使抗體的活性損失；當(dāng)加入抗體滴度為1：8萬(wàn)和1：9萬(wàn)時(shí)，包被溫度對(duì)包被管
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