【文章內容簡介】 225。nɡ)免疫學檢驗,直接凝集試驗 顆粒性抗原與凝集素直接結合并出現(xiàn)凝集現(xiàn)象的試驗稱作直接凝集試驗(direct agglutination test) 玻片法：定性試驗，適用于新別離細菌的鑒定或分型 試管法：定量試驗，檢測(jiǎn c232。)待測血清中是否存在相應抗體和測定抗體含量,第四十七頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗凝集試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,間接凝集試 將可溶性抗原(或抗體)先吸附于一種與免疫無關的，一定大小的不溶性顆粒(統(tǒng)稱為載體顆粒)的外表，然后與相應抗體(或抗原)作用，在有電解質存在的適宜條件(ti225。oji224。n)下，所出現(xiàn)的特異性凝集反響稱為間接凝集反響。 敏感性高，但特異性較差,第四十八頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗凝集(n237。ngj237。)試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,間接血凝試驗 將抗原致敏于紅細胞外表，用以檢測相應抗體，在與相應抗體反響時出現(xiàn)肉眼可見凝集，稱為間接血凝試驗(passive heamagglutination assay, PHA) 將抗體致敏于紅細胞外表，用以檢測檢樣本(y224。ngběn)中相應抗原，致敏紅細胞在與相應抗原反響時發(fā)生凝集，稱為反向間接血凝試驗(reverse passive heamagglutination assay, RPHA)。,第四十九頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗凝集(n237。ngj237。)試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,乳膠凝集試驗 聚苯乙烯乳膠是利用化工原料聚苯乙稀經(jīng)過(jīnggu242。)乳液聚合得到的高分子乳膠液，乳膠微球直徑約0.8?m。 對蛋白質、核酸等高分子物質具有良好的吸附性能。 利用聚苯乙烯乳膠的微球作載體，以吸附某些抗原(或抗體)，即能用以檢測相應的抗體(或抗原)，稱為乳膠凝集反響。(latex agglutination test),第五十頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗凝集(n237。ngj237。)試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,協(xié)同凝集試驗 葡萄球菌(p t225。o qi jūn)A蛋白(staphylococal protein A，簡稱SPA)是大多數(shù)金黃色葡萄球菌(p t225。o qi jūn)的特異性外表抗原，能與多種哺乳動物IgG分子的Fc片結合。 SPA與IgG結合后，其Fab片暴露于外，并保持其抗體活性。 當此被覆著特異性抗體的葡萄球菌與相應的抗原結合時，就可互相連結引起協(xié)同凝集反響，簡稱COAG。,第五十一頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)沉淀試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,可溶性抗原(如細菌的外毒素、內毒素、菌體 裂解液，病毒的可溶性抗原、血清、組織浸出液 等)與相應抗體結合，在適量電解質存在下，形成(x237。ngch233。ng) 肉眼可見的白色沉淀，稱為沉淀試驗 (precipitation test)。,第五十二頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)沉淀試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,環(huán)狀沉淀試驗(sh236。y224。n) 在小口徑試管內先參加抗血清，然后小心沿管壁參加待檢抗原于血清外表，使之成為分界清晰的兩層 數(shù)分鐘后，兩層液面交界處出現(xiàn)白色環(huán)狀沉淀，即為陽性反響。 本法主要用于抗原的定性試驗，如炭疽病的診斷(Ascoli試驗)。試驗時出現(xiàn)白色沉淀帶的最高抗原稀釋倍數(shù)，即為血清的沉淀價。,第五十三頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)沉淀試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,瓊脂免疫擴散試驗 抗原抗體在瓊脂凝膠中擴散，當二者在比例適當處相遇，即發(fā)生(fāshēng)沉淀反響，形成肉眼可見的沉淀帶，此種反響稱為瓊脂免疫擴散，又簡稱瓊脂擴散和免疫擴散。 單向單擴散 單向雙擴散 雙向單擴散 雙向雙擴散,第五十四頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)酶標抗體技術,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,根據(jù)抗原(k224。ngyu225。n)抗體反響的特異性和酶催化反響的高敏感性而建立起來的免疫檢測技術。 根本程序：標記－抗原抗體復合物－底物 根據(jù)底物溶液的顏色反響來判定有無相應的免疫反響。顏色反響的深淺與標本中相應抗體或抗原的量呈正比。,第五十五頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)酶標抗體技術,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) ELISA是當前應用(y236。ngy242。ng)最廣、開展最快的一項新技術。其根本過程是將抗原(或抗體)吸附于固相載體，在載體上進行免疫酶染色反響，底物顯色后用肉眼或分光光度計判定結果。,第五十六頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗酶標抗體(k224。ngtǐ)技術,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,免疫組化染色技術 標本制備和處理：組織切片、壓片、涂片、細胞蓋片；消除內源性過氧化酶 染色：間接法、直接(zh237。jiē)法 顯色 觀察,第五十七頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗放射免疫(miǎny236。)測定〔RIA〕,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,將同位素測量的高度敏感性和抗原抗體反響的高度特異性結合(ji233。h233。)起來而建立的免疫分析技術 可定量分析，也可定性分析 特異性強、靈敏度高、準確性和精密度好,第五十八頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗中和試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,抗體能否中和病毒的感染性而建立的免疫學試驗(sh236。y224。n)稱為中和試驗(sh236。y224。n)。 主要用于病毒感染的血清學診斷、病毒別離株的鑒定、不同病毒株的抗原關系研究、疫苗免疫原性的評價、免疫血清的質量評價和檢測動物血清中的抗體等。,第五十九頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)中和試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,終點法中和試驗(endpoint neutralization test) 固定病毒稀釋血清法：測定病毒毒價；固定病毒稀釋血清接種細胞或動物，計算(j236。 su224。n)中和價 固定血清稀釋病毒法：固定血清稀釋病毒接種細胞或動物，計算LD50，然后計算中和指數(shù)〔中和組LD50/對照組LD50〕,第六十頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗中和試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,空斑減少試驗(plague reduction test)：空斑數(shù)減少50％的血清量作為中和滴度 病毒稀釋成每一接種劑量含100PFU，加倍比稀釋的血清，37℃ 1h 接種細胞 參加(jiār249。)預溫的營養(yǎng)瓊脂 計算空斑數(shù),第六十一頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫血清學實驗(sh237。y224。n)其他檢測技術,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,免疫(miǎny236。)轉印技術〔immunoblotting〕 免疫沉淀〔immunoprecipitation〕 化學發(fā)光免疫測定〔chemiluminescent immunoassay，CLIA〕 膠體金免疫檢測技術,第六十二頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗沉淀試驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,間接血凝試驗 將抗原致敏于紅細胞外表，用以檢測相應抗體，在與相應抗體反響時出現(xiàn)肉眼可見凝集(n237。ngj237。)，稱為間接血凝試驗(passive heamagglutination assay, PHA) 將抗體致敏于紅細胞外表，用以檢測檢樣本中相應抗原，致敏紅細胞在與相應抗原反響時發(fā)生凝集，稱為反向間接血凝試驗(reverse passive heamagglutination assay, RPHA)。,第六十三頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,一、凝聚性試驗 凝集(n237。ngj237。)試驗：由顆粒性抗原參與 沉淀試驗：由可溶性抗原參與,第六十四頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,一、凝聚性試驗(sh236。y224。n) 凝集試驗：由顆粒性抗原參與 沉淀試驗：由可溶性抗原參與,第六十五頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Logo,免疫(miǎny236。)血清學實驗,臨床(l237。n chu225。nɡ)免疫學檢驗,一、凝聚性試驗(sh236。y224。n) 凝集試驗：由顆粒性抗原參與 沉淀試驗：由可溶性抗原參與,第六十六頁，共一百零六頁。,www.themegallery.com,Company Lo