gp96多肽復(fù)合物／樹突狀細胞疫苗研究(編輯修改稿)
2025-10-07 00:28 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 處理 動物數(shù) 腫瘤植入后生存天數(shù)Ⅰ 種植 10 52Ⅱ GP96 8 Ⅲ DC 8 ※Ⅳ GP96+DC 8 77※△第二十四 頁 ，共四十五 頁 。SCIDPAa※ ：與 Ⅰ 組比較， P?！?：與 Ⅱ 組和 Ⅲ 組比較， P SCID小鼠腫瘤植入后不同時間的腫瘤體積 (X177。Scm179。)組數(shù) 處理 動物數(shù) 腫瘤植入后天數(shù)21 28 32Ⅰ 重建 16 177。 177。 177。Ⅱ GP96 8 177?！? 177?！?177。※Ⅲ DC 8 177?！?177?！?177。※Ⅳ GP96+DC 8 177。※△ 177?！?177?！?100%第二十五 頁 ，共四十五 頁 。SCID小鼠腫瘤植入后的生存時間組數(shù) 處理 動物數(shù) 腫瘤植入后生存天數(shù)Ⅰ 重建 16 37Ⅱ GP96 8 52※Ⅲ DC 8 ※Ⅳ GP96+DC 8 ＞ 62※△第二十六 頁 ，共四十五 頁 。第二十七 頁 ，共四十五 頁 。討 論第二十八 頁 ，共四十五 頁 。gP96在肺癌中的表達基因表達的檢測 mRNA水平：原位雜交、 Northern Blot、核酸酶保護分析 Realtime RTPCR、半定量 RTPCR 。蛋白水平。 方法 比較原位雜交 僅能提供 mRNA在細胞內(nèi)的定位信息，不能確定 mRNA的含量，受人為因素影響大，無法檢測極微量的 mRNA Northern Blot 敏感性低，樣品用量大，對實驗條件要求高，需要應(yīng)用放射性物質(zhì)，不適合檢測低豐度的 mRNA Realtime RTPCR 儀器和試劑盒價格昂貴，標準物難以獲得 核酸酶保護分析 操作復(fù)雜，價格昂貴 半定量 RTPCR 高度敏感、準確、簡便、快捷、對儀器要求低、可重復(fù)性強、易于掌握 第二十九 頁 ，共四十五 頁 。 與正常組織相比，肺癌組織中編碼 gp96的基因在 mRNA水平的表達明顯增高的。這進一步證實了在罹患腫瘤時，以 gp96為代表的 HSPs合成明顯增加，這是機體受到腫瘤刺激產(chǎn)生的熱休克反響，以此來維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，是機體的一種保護性反響。 半定量 RTPCR法 mRNA水平gP96肺癌組織正常肺組織免疫組化法 蛋白水平引物設(shè)計循環(huán)次數(shù)操作中注意：模板內(nèi)對照第三十 頁 ，共四十五 頁 。gP96的提取 提取 gP96的經(jīng)典方法〔 Srivastava〕：飽和硫酸銨沉淀 刀豆球蛋白 A親和層析 DEAE離子交換層析〔提取率估計在 2030%，蛋白提取量在 15150ug/g組織 〕存在的普遍問題： 蛋白提取率低 ，尚無法滿足臨床需要解決：更改其中的試劑或步驟： 去除飽和硫酸銨沉淀過程，離子交換層析柱換用MonoQ或 POROS20QE柱
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