【文章內(nèi)容簡介】 抑蛋白 p53 葡萄糖 6磷酸脫氫酶 P53突變 突變的 p53 葡萄糖 6磷酸脫氫酶 葡萄糖 6磷酸脫氫酶激活 啟動因子 葡萄糖 戊糖磷酸代謝途徑 TAC NADPH 果糖 6磷酸 3磷酸甘油醛 二氧化碳 抑制 瓦博格氏效應 第五十頁，共一百二十九頁。 NADPH在人體內(nèi)的化學反響中起遞氫體的作用，作為 GSH復原酶的輔酶，它可以使氧化型谷胱甘肽〔GSSG〕復原成為復原型谷胱甘肽〔GSH〕 ,使細胞內(nèi) GSH含量增高。 第五十一頁，共一百二十九頁。 谷胱甘肽過氧化物酶以復原型谷胱甘肽 (GSH)作為供氫體來分解 H2O2，生成氧化型谷胱甘肽 (GSSG)，使細胞內(nèi)GSH:GSSG的比率下降。 GSH生成 GSSG過程中形成腫瘤細胞的低氧狀態(tài)，激活氧感受器和缺氧信號傳導通路。 第五十二頁，共一百二十九頁。 第五十三頁，共一百二十九頁。 細胞內(nèi)氧化型 /復原型谷胱甘肽 (GSSG/GSH)的改變作用于氧感受器分子，使其構象發(fā)生改變，導致蛋白質(zhì)的巰基由氧化型向復原型轉變，促使缺氧特異性轉錄因子 低氧誘導因子〔 hypoxiainducible factor； HIF 〕 HIF1a的磷酸化并與 HIF1b結合而形成一個完整的 HIF1轉錄復合體。 第五十四頁，共一百二十九頁。 HIF1轉錄復合體對糖代謝基因的調(diào)控是腫瘤能量代謝重編程的重要機制之一，它對腫瘤細胞糖代謝進行調(diào)控，對谷氨酸替代途徑調(diào)節(jié)，與相應靶基因上的缺氧反響元件 (HRE)結合，促進基因的表達 .并通過第二信使 活性氧族 (ROS)與激酶系統(tǒng)發(fā)生聯(lián)系并激活該激酶系統(tǒng)。 第五十五頁，共一百二十九頁。 谷胱甘肽過氧化物酶使細胞 GSH:GSSG的比率下降。 H2O2與細胞內(nèi)的鐵離子作用，通過 Feton反響，產(chǎn)生 OH OH和 GSSG都可與蛋白質(zhì)分子上的巰基相互作用，影響蛋白質(zhì)構象。低氧時 H2O2濃度下降，使 OH的濃度隨之下降，同時使 GSH的濃度升高，導致蛋白質(zhì)的巰基由氧化型向復原型轉變，使一些轉錄因子〔如 HIF1〕的構象發(fā)生改變，激活其結合 DNA的活性，促進低氧敏感基因EPO的轉錄表達。 第五十六頁，共一百二十九頁。 過氧化氫酶催化 H2O2過程中可間接激活鳥苷酸環(huán)化酶〔soluble guanylate cyclase， sGC〕，增加 cGMP〔鳥嘌呤核糖苷 339。,539。環(huán)磷酸酯〕的水平。而 cGMP抑制低氧敏感基因的表達。低氧時 H2O2濃度下降，使這條信號途徑的活性降低。 第五十七頁，共一百二十九頁。 在氧含量正常的條件下，由 NAD〔 P〕 H所脫下的電子迅速傳遞給氧分子，產(chǎn)生超氧陰離子，這在細胞漿中造成了一種相對高的氧化狀態(tài)。超氧陰離子歧化生成過氧化氫，最終導致活性氧〔 ROS〕的增加，在結合鐵離子的部位容易引起 feton反響〔人體內(nèi)的過氧化物與低 Fe反響生成氧自由基的反響 )，誘導調(diào)節(jié)蛋白的位置專一性氧化。在低氧條件下，氧含量的減少將引起這一系統(tǒng)氧轉運率的降低，由此降低了 ROS的產(chǎn)生速率，導致細胞內(nèi)環(huán)境處于一個低氧和相對復原性的狀態(tài)。 第五十八頁，共一百二十九頁。 低氧時血紅素氧合酶及一氧化氮合成酶〔 NOS〕活性受到抑制，使內(nèi)源性 CO及 NO產(chǎn)生量下降，調(diào)控 cGMP的產(chǎn)生下降，從而對低氧敏感基因 EPO的抑制作用減弱。 第五十九頁，共一百二十九頁。 腫瘤細胞 瓦博格 效應 NADPH 增加 GSH/GSSG 比例下降 激活氧感受器 和缺氧信號 傳導通路 缺氧特異性轉錄因子 HIF1a 穩(wěn)定和活性增強 激活 第二信使 ROS 與激酶系統(tǒng) EPO基因 表達水平升高 NADPH 氧化酶 H2O2下降 cGMP抑制 激活 鳥苷酸環(huán)化酶 OH下降， GSH升高， 激活 HIF1 結合 DNA的活性 血紅素氧合酶 及 NOS活性抑制 內(nèi)源性 CO 及 NO下降 FH合成 和釋放增多 第六十頁，共一百二十九頁。 缺氧可使線粒體出現(xiàn)線粒體單價電子滲漏〔 univalent leak〕；胞內(nèi) Ca2+超載，觸發(fā)線粒體攝取 Ca2+并使 Ca2+在線粒體內(nèi)積聚；抑制線粒體內(nèi)脫氫酶的功能；以上改變可使線粒體腫脹、嵴斷裂崩解、鈣鹽沉積、外膜破裂和基質(zhì)外溢。 第六十一頁，共一百二十九頁。 線粒體損傷導致含復原態(tài)鐵原卟啉自由體〔 FH〕的蛋白，諸如細胞色素、氧感受器、 FixL跨膜蛋白、過氧化氫酶、過氧化物酶、血紅素加氧酶〔 heme oxygenase, HO〕 、 NAD〔 P〕 H氧化酶、鳥氨酸氧化酶〔 guanylatc cyclase,GC〕和一氧化氮合成酶〔 nityic oxide syathase,NOS〕等外溢、游離。 第六十二頁，共一百二十九頁。 FH位于細胞蛋白的肽鏈靠近外表的一個疏水核內(nèi)，它主要依靠 Fe2+與 F8His的咪唑氮配位而掛在 Pr鏈上。但是它之所以能固定在蛋白質(zhì)的固定位置上而且取向一定，主要是因為還有大約 21個殘基逼近 FH，距離在 4A176。之內(nèi)，這些殘基中有 60多處與 FH比較靠近，可以發(fā)生極性與非極性的相互作用，足以保持 FH在細胞蛋白中的位置。 第六十三頁，共一百二十九頁。 第六十四頁，共一百二十九頁。 FH的極性局部丙酸基側鏈伸向親水的外表，在生理 pH下解離成負離子，在 α鏈中，有一個丙酸基與 CD3His相連；在 β鏈中， FH的兩個丙酸基分別與 CD3Ser和 E10Lys相連。 FH與肽鏈之間的靜電引力對于維持 FH在細胞蛋白中的位置有很大作用。 第六十五頁，共一百二十九頁。 第二信使 ROS與激酶系統(tǒng)使一種親脂性物質(zhì)〔 Hydrophilic fatty molecules〕進入細胞蛋白疏水核內(nèi)，它所帶的負電荷中和了肽鏈上His、 Lys所帶的正電荷，使它們不再與 FH丙酸基側鏈保持靜電吸引，從而使 FH在細胞蛋白中脫落。 第六十六頁，共一百二十九頁。 還有的學者認為親脂性物質(zhì)進入細胞蛋白疏水核，與 FH中心的Fe2+通過 Fenton反響產(chǎn)生 ． OH〔羥自由基〕， ． OH具有極高的氧化復原勢，反響力極強，幾乎可以和生物細胞內(nèi)所有類型的分子以的反響速率作用。 第六十七頁，共一百二十九頁。 109～ 1011mol1 ． s1化學反響 0級，相當于幾個飛秒。 飛秒〔 femtosecond〕也叫毫微微秒，即 10的負 15次秒，簡稱 fs。 1飛秒只有 1秒的一千萬億分之一。 第六十八頁，共一百二十九頁。 但是，． OH壽命短暫，因而最靠近 ． OH的部位受到攻擊的可到性也最大，同 Fe2+絡合的 FH卟啉環(huán)由于在空間位置上的態(tài)勢，首先受到 ． OH的攻擊，共價鍵斷裂，其結構遭到不可逆轉的破壞， FH析出。 第六十九頁，共一百二十九頁。 第七十頁，共一百二十九頁。 細胞內(nèi) GSH含量增高 細胞蛋白構象改變 EPO基因表達增強