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正文內(nèi)容

實驗室安全基礎知識(編輯修改稿)

2025-03-10 14:24 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 。 ⑤大型儀器的使用 : 普通冰箱和低溫冰箱 (存放和處理樣品 )、 高壓鍋、離心機、液氮罐、生物安全柜、生化培養(yǎng)箱、電泳設備、超凈臺、 PCR 儀、搖床、超聲破碎儀、顯微鏡等。 ⑥消毒和滅菌方法 : 物理滅菌(紫外、過濾、灼燒、高壓 )法、化學滅菌 (熏蒸、酒精、消毒液 ) 法等。 ⑦辦公用品使用的培訓 : 電話、傳真機、電腦、打印機等。 五、 實驗 室 設備 ? 選擇設備時應符合一些基本原則,即: ? 在設計上應能阻止或限制操作人員與感染性物質(zhì)間的接觸 ? 建筑材料應防水、耐腐蝕并符合結(jié)構(gòu)要求 ? 設備裝配后應無毛刺、銳角以及易松動的部件 ? 設備的設計、建造與安裝應便于操作、易于維護、清潔、清除污染和進行質(zhì)量檢驗。應盡量避免使用玻璃及其他易碎的物品。 ? 需要詳細咨詢設備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格,以確保設施具備必要的安全特性。 基本生物安全設備 ? 移液輔助器 —— 避免用口吸的方式移液。有不同設計的多種產(chǎn)品可供使用。 ? 生物安全柜,在以下情況使用: ? —— 處理感染性物質(zhì);如果使用密封的安全離心杯,并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣,則這類材料可在開放實驗室離心 ? —— 空氣傳播感染的危險增大時 ? —— 進行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動物鼻腔接種以及從動物或卵胚采集感染性組織)。 ? 一次性塑料接種環(huán),也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán),以減少生成氣溶膠。 ? 螺口蓋試管及瓶子。 ? 用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當工具。 ? 一次性巴斯德塑料移液管,盡量避免使用玻璃制品。 ? 在投入使用前,像高壓滅菌器和生物安全柜等設備必須用正確方法進行驗收。應參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。 常用設備的 安全操作注意事項( 1) ? 生物安全柜分為 I、 II、 III個不同等級。 ? I級能夠保護工作人員和周圍環(huán)境,但不能切實保護操作樣本,因此生物安全柜 I級不能用于食品微生物檢驗的無菌操作。 ? II級生物安全柜在設計上不但能提供個體防護,而且能保護工作臺面的物品不受空氣的污染,其有四種不同的類型( A A B1和 B2型),可用于操作危險度II級和 III級的感染性物質(zhì)。 ? III級生物安全柜則可提供更高級別的生物安全保護。 常用設備的 安全操作注意事項( 2) ? 生物安全柜使用要點: ( 1)使用者應熟知生物安全柜的使用方法和局限性; ( 2)使用前后,工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑擦拭消毒,生物安全柜風機應至少運行 5min完成凈化后使用; ( 3)使用中不能打開玻璃觀察檔板,應穿個體防護服; ( 4)生物安全柜內(nèi)盡量少放置器材或標本、不能影響后部壓力排風系統(tǒng)的氣流循環(huán); ( 5)放入生物安全柜的物品應采用 70%酒精來清除表面污染??梢栽谙緞┙竦拿砩线M行實驗,以吸收可能濺出的液滴; ( 6)耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及移液適宜于盛放盤不應放在生物安全柜的外面;( 7)在工作臺面上的操作應按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進行; ( 8)在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中,應避免使用明火,可使用電熱式接種環(huán)滅菌器,最好使用一次性無菌接種環(huán); ( 9)盡可能避免雙臂頻繁進出生物安全柜,否則會干擾空氣屏障的完全性,影響防護; ( 10)一旦發(fā)生生物學危害物品溢出,應在生物安全柜運行狀態(tài)下清理,使用有效的消毒劑,盡可能減少氣溶膠,所有接觸溢出的物品都要進行消毒或高壓滅菌。 ( 11)每年應對生物安全防護效果進行測試,定期維護。 常用設備的 安全操作注意事項( 3) ? 離心機 離心機是最常用的實驗室儀器,最易導致實驗室污染。掌握正確的離心機使用技術(shù)十分重要。 (1)在使用實驗室離心機時,儀器良好的機械性能是保障微生物安全的前提條件。 (2)應按照操作手冊來操作離心機。 (3)離心機放置的高度應當使小個子工作人員也能夠看到離心機內(nèi)部,以正確放置十字軸和離心桶。 (4)離心管和盛放離心標本的容器應當由厚壁玻璃制成,或最好為塑料制品,并且在使用前應檢查是否破損。 (5)用于離心的試管和標本容器應當始終牢固蓋緊 (最好使用螺旋蓋 )。 (6)離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進行。 (7)離心桶和十字軸應按重量配對,并在裝載離心管后正確平衡。 (8)操作指南中應給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。 (9)空離心桶應當用蒸餾水或乙醇 (異丙醇, 7 O% )來平衡。 (1 O)對于危險度 3級和 4級的微生物,必須使用可封口的離心桶 (安全杯 )。 (11)當使用固定角離心轉(zhuǎn)子時,必須小心不能將離心管裝得過滿,否則會導致漏液。 (1 2)應當檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯,應重新評估離心操作規(guī)范。 (1 3)應當檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細微裂痕。 (1 4)每次使用后,要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。 (1 5)使用后應當將離心桶倒置存放使平衡液流干。 (1 6) 良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護,以防止感染性氣溶膠和可擴散粒子的產(chǎn)生。 常用設備的 安全操作注意事項( 4) ? 移液管、移液器 (1)應使用移液設備,嚴禁用口吸取。 (2)所有移液管應帶有棉塞以減少移液器具的污染。 (3)不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。 (4)感染性物質(zhì)不能使用移液管反復吹吸混合。 (5)不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。 (6)刻度對應 (mark— to— mark)移液管不需要排出最后一滴液體,因此最好使用這種移液管。 (7)污染的移液管應該完全浸泡在盛有適當消毒液的防碎容器中。移液管應當在消毒劑中浸泡適當時間后再進行處理。 (8)盛放廢棄移液管的容器不能放在外面,應當放在生物安全柜內(nèi)。 (9)有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。 (1O)在打開隔膜封口的瓶子時,應使用可以使用移液管的工具,而避免使用皮下注射針頭和注射器。 (11)為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴散,在工作臺面應當放置一塊浸有消毒液的布或吸有消毒液的紙,使用后將其按感染性廢棄物處理。 常用設備的 安全操作注意事項( 5) ? 接種環(huán) 使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán),能夠避免在酒精燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。最好使用不需要進行消毒的一次性接種環(huán)。 常用設備的 安全操作注意事項( 6) ? 冰箱與冰柜 (1)冰箱、低溫冰箱和干冰柜應當定期除霜和清潔,應清理出所有在儲存過程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時應戴厚橡膠手套并進行面部防護,清理后要對內(nèi)表面進行消毒。冰箱內(nèi)物品放置應規(guī)范。 (2)儲存在冰箱內(nèi)的所有容器應當清楚地標明內(nèi)裝物品的科學名稱、儲存日期和儲存者的姓名。未標明的或廢舊物品應當高壓滅菌并丟棄。 (3)應當保存一份凍存物品的清單。 (4)除非有防爆措施,否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應注明這一點。 常用設備的 安全操作注意事項( 7) ? 高壓滅菌器和滅菌消毒設備 (1)應由受過良好培訓的人員負責高壓滅菌器的操作和日常維護。 (2)預防性的維護程序應包括:由有資格人員定期檢查滅菌器柜腔、門的密封性以及所有的儀表和控制器。 (3)應使用飽和蒸氣,并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學品,這些物質(zhì)可能污染正在滅菌的物品。 (4)所有要高壓滅菌的物品都應放在空氣能夠排出并具有良好熱滲透性的容器中;滅菌器柜腔裝載要松散,以便蒸汽可以均勻作用于裝載物。 (5)當滅菌器內(nèi)部加壓時,互鎖安全裝置可以防止門被打開,而沒有互鎖裝置的高壓滅菌器,應當關(guān)閉主蒸汽閥并待溫度下降到 80℃ 以下時再打開門。 (6)當高壓滅菌液體時,由于取出時液體可能因過熱而沸騰,故應采用慢排式設置。 (7)即使溫度下降到 80℃ 以下,操作者打開門時也應當戴適當?shù)氖痔缀兔嬲謥磉M行防護。 (8)在進行高壓滅菌效果的常規(guī)監(jiān)測中,生物指示劑或熱電偶計應置于每件高壓
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